Phân tích đồng thời các hợp chất auxin và gibberellin trong rau xanh

Bài viết Phân tích đồng thời các hợp chất auxin và gibberellin trong rau xanh thực hiện việc xây dựng và phát triển phương pháp phân tích đồng thời các hợp chất auxin và gibberellin trong rau sử dụng thiết bị sắc ký lỏng ghép nối với đầu dò khối phổ bẫy ion.
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Phân tích đồng thời các hợp chất auxin và gibberellin trong rau xanh Tạp chí phân tích Hóa, Lý và Sinh học - Tập 26, Số 3B/2021 PHÂN TÍCH ĐỒNG THỜI CÁC HỢP CHẤT AUXIN VÀ GIBBERELLIN TRONG RAU XANH Đến tòa soạn 18-02-2021 Nguyen Quang Trung, Le Van Nhan Center for Research and Technology Transfer – Vietnam Academy of Science and Technology SUMMARY PROCESS OF SIMULTANEOUS ANALYSIS OF AUXIN AND GIBBERELLIN IN VEGETABLES In this study, auxin and gibberellin compounds in vegetables were simultaneous analyzed using HPLC- ESI-MS2. The method shows good linearity for all compounds including IAA, IBA, ICA, IPA, GA 3, GA4, and GA7 with R2 > 0.996. The method detection limit (MDL) and method quantification limit (MQL) were 2,1-32,6 ng.g-1 and 6,9-108,6 ng.g-1, respectively. In addition, the matrix effect ranged from 85- 118% whereas the overal recovery was dropped into the range of 90,58-102,56%, and RSD was in 0,44-15,25%. The data indicated that the innovation method was simple, accurate, and efficient for the analysis of auxin and gibberellin in vegetable tissues. It could be further studied to develop and apply this method in analyzing plant growth regulators in fruits and agricultural products. Keywords: auxin, gibberellin, plant growth regulator, vegetable. 1. MỞ ĐẦU thích sinh trưởng thực vật không có nhãn mác Chất kích thích sinh trưởng thực vật được xem và nguồn gốc xuất xứ vẫn được nông dân là một trong những giải pháp tốt trong nông truyền tai nhau sử dụng do hiệu quả nhanh nghiệp để thúc đẩy nhanh quá trình tăng trưởng chóng và vượt trội của chúng mang lại cho cây của cây. Trong tự nhiên, các chất kích thích trồng. Đây là một trong những nguyên nhân sinh trưởng thực vật còn được gọi là các tiềm ẩn có thể gây nên tình trạng ngộ độc thực hoocmon sinh trưởng thực vật, là những chất phẩm và ô nhiễm môi trường liên quan đến dư được sinh ra trong cây. Bằng con đường hóa lượng của các hóa chất sử dụng trong sản xuất học nhân tạo, nhiều hợp chất khác nhau, có nông nghiệp. Do đó, việc nghiên cứu và xây hoạt tính tương tự với các chất kích thích sinh dựng quy trình phân tích các chất kích thích trưởng thực vật tự nhiên được tổng hợp nhân sinh trưởng thực vật đóng vai trò quan trọng tạo và dùng để điều chỉnh quá trình sinh trưởng, trong việc đánh giá dư lượng và thực trạng sử phát triển của cây nhằm tăng năng suất và dụng chúng trong sản xuất nông nghiệp. phẩm chất của cây trồng. Tuy nhiên, trong tự nhiên hàm lượng các chất Việc sử dụng các chất kích thích sinh trưởng kích thích sinh trưởng thực vật có nồng độ rất thực vật trong sản xuất nông nghiệp cũng diễn thấp (10-9 đến 10-6 M), do đó, việc phát triển ra khá phổ biến ở Việt Nam, tuy nhiên, rất ít một phương pháp phân tích định lượng các công trình công bố nghiên cứu về phương pháp chất này là một thách thức lớn đối với các nhà phân tích và đánh giá dư lượng của các chất khoa học (Maren và Sergi, 2011; Izumi et al., này trong các sản phẩm nông nghiệp, đặc biệt 2009). Bên cạnh đó, các chất kích thích sinh là rau xanh. Mặt khác, có nhiều loại thuốc kích trưởng có tính chất hóa học và cấu trúc đa dạng, 18 khiến cho việc định lượng đồng thời trở nên  Pha động: DI (Chứa 0,1% FA) và MeOH khó khăn (Yu et al., 2012). Một số phương (chứa 0,1% FA) pháp phân tích các phytohormone đã được  Tốc độ dòng: 0,1 mL/min nghiên cứu như: bioassay, xét nghiệm miễn  Nhiệt độ cột tách: 40oC. dịch, sắc ký khí khối phổ (GC-MS)... Tuy  Gradient: 15 phút với tỷ lệ dung môi nhiên, hạn chế của các phương pháp này là methanol biến đổi từ 30-90%. việc chuẩn bị mẫu phức tạp, trong khi đó độ 2.3. Điều kiện khối phổ đặc hiệu và độ lặp lại thấp, và nhiều chất bị Sử dụng thiết bị phân tích khối phổ LCQ Fleet phân hủy ở nhiệt độ cao (GC)… do đó, nên MS (Thermo Fisher Scientific, Germany) với làm giới hạn phạm vi ứng dụng của chúng nguồn ion hóa điện hóa (ESI). trong phân tích các chất kích thích sinh trưởng Bơm trực tiếp dung dung dịch chuẩn 1 ng.µL-1 thực vật (Weiler, 1984; Sandberg et al., 1987.; của các chất phân tích vào detector MS sử Meyer et al., 2003; Del và Blanch, 2007). dụng kim bơm Hamilton (500 µL, Hoa Kỳ) ở Thiết bị HPLC có hiệu quả thấp đối với việc tốc độ dòng 5 µL.min-1. định lượng các hoocmon thực vật ở hàm lượng Điều kiện phân tích khối phổ: được trình bày ở nano, nguyên nhân có thể do quá trình tinh chế Bảng 1. mẫu phức tạp (Pan et al., 2010; Qingfeng et al., Bảng 1. Điều kiện phân tích khối phổ 2014). Sự kết hợp của HPLC với đầu dò khối phổ giúp cải thiện độ nhạy và độ chọn lọc, cũng như cho phép xác định và định lượng đồng thời nhiều hợp chất trong một thí nghiệm (Ljung và cộng sự, 2004; Qingfeng et al., 2014; Matías et al., 2015). Tuy nhiên, tùy vào điều kiện của các phòng thí nghiệm mà có thể sử dụng các đầu dò khối phổ khác nhau như: đầu dò ba tứ cực (TQ), bẫy ion, tứ cực thời gian bay (Q-TOF) và Orbitrap. Trong nghiên cứu này, chúng tôi thực hiện xây dựng và phát triển phương pháp phân tích đồng Phần mềm Xcallibur (Version 2.2, Thermo thời các hợp chất auxin và gibberellin trong rau Fisher Scientific) được sử dụng để xử lý dữ sử dụng thiết bị sắc ký lỏng ghép nối với đầu liệu. dò khối phổ bẫy ion. 2. THÍ NGHIỆM 2.1. Hóa chất thí ...