Phân tích tổng thể sắc đồ và phân loại kim ngân bằng sắc ký lỏng hiệu năng cao

Trong nghiên cứu này, phương pháp định lượng đồng thời các hoạt chất sinh học trong dược liệu Kim ngân được áp dụng cho số lượng mẫu lớn cùng với phân tích tổng thể sắc đồ và phân tích phân loại nguồn dược liệu Kim ngân để đánh giá chất lượng tổng thể của dược liệu này.
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Phân tích tổng thể sắc đồ và phân loại kim ngân bằng sắc ký lỏng hiệu năng caoTẠP CHÍ Y - DƢỢC HỌC QUÂN SỰ SỐ 8-2013PHÂN TÍCH TỔNG THỂ SẮC ĐỒ VÀ PHÂN LOẠI KIM NGÂNBẰNG SẮC KÝ LỎNG HIỆU NĂNG CAOChử Văn Mến*; Nguyễn Văn Long*; Vũ Tuấn Anh*; Phạm Xuân Phong**TÓM TẮTKim ngân là một dược liệu được sử dụng trong cổ truyền. Tác dụng điều trị của dược liệu nàyphụ thuộc nhiều vào nguồn gốc phân bố. Trong nghiên cứu trước của chúng tôi, phương pháp phântích sắc ký lỏng hiệu năng cao được sử dụng để định lượng đồng thời 4 hoạt chất sinh học làconiferin, axít loganic, sweroside và loganin. Trong nghiên cứu này, phương pháp phân tích đượcáp dụng định lượng 4 hoạt chất sinh học trong 92 mẫu từ Hàn Quốc và Trung Quốc cùng với phântích tổng thể sắc đồ nhằm phân biệt dược liệu từ những nguồn khác nhau. Hàm lượng của coniferin,loganic axít, sweroside và loganin được xác định là 0,032 - 1,206 mg/g, 0,033 - 20,425 mg/g,0,017 - 10,09 mg/g và 0,018 - 10,255 mg/g trong dược liệu khô. Phân tích tổng thể sắc đồ dựa vàoLDA cho thấy Kim ngân từ các vùng khác nhau có thể được phân biệt chính xác tới 80%.* Từ khóa: Kim ngân; HPLC; LDA; Phân tích sắc đồ.CHROMATOGRAPHIC FINGERPRINT AND DISCRIMINANT ANALYSIS FOR THEQUALITY EVALUATION OFLONICERAE FOLIUM ET CAULIS BY HPLCsummaryLonicerae folium et caulis is an important traditional herbal drug. The therapeutic effectiveness ofthis herb depends strongly on the geographical origin. In our previous report, the HPLC analyticalmethod has been developed for the simultaneous determination of four bioactive compounds:coniferin, loganic acid, sweroside and loganin. In this study, the analytical method was applied toquantitate four bioactive compounds in 92 samples collected from Korea and China together withpattern recognition analysis to differentiate the herbs from different regions. Contents of coniferin,loganic acid, sweroside and loganin were calculated to be 0.032 - 1.206 mg/g, 0.033 - 20.425 mg/g,0.017 - 10.09 mg/g, and 0.018 - 10.255 mg/g in dried plant. The pattern recognition analysis wascarried out using LDA (Linear Discriminant Analysis) showed Lonicerae folium et caulis from differentorigins can be differentiated with the accuracy of 80%.* Key words: Lonicerae folium et caulis; HPLC; LDA; Pattern analysis.ĐẶT VẤN ĐỀKim ngân, còn gọi là Nhẫn đông có tênkhoa học là Lonicera japonica thuộc họCơm cháy (Caprifoliaceae), mọc chủ yếu ởcác nước Đông Á như Việt Nam, Trung Quốc,Hàn Quốc và Nhật Bản... được sử dụng đểchống viêm, chống dị ứng, mẩn ngứa trongy học cổ truyền [1]. Nghiên cứu về thànhphần hóa học và tác dụng sinh học của cây* Học viện Quân y** Viện Y học Cổ truyềnQuân độiNgười phản hồi (Corresponding): Chử Văn Mến (chuvanmen@gmail.com)Ngày nhận bài: 15/8/2013; Ngày phản biện đánh giá bài báo: 23/8/2013Ngày bài báo được đăng: 25/9/20135TẠP CHÍ Y - DƢỢC HỌC QUÂN SỰ SỐ 8-2013Kim ngân cho thấy: các nhóm hoạt chấtnhư phenolic, iridoids, saponin và flavonoidscó tác dụng chống oxy hóa, chống viêm,chống dị ứng... [4, 10]. Tuy nhiên, do ảnhhưởng của khí hậu, thổ nhưỡng và thờigian thu hái nên hàm lượng các hoạt chấtvà tác dụng sinh học của Kim ngân bị biếnđộng nhiều. Ở Việt Nam, Kim ngân chủ yếuđược nhập khẩu từ các nước Đông Á nhưTrung Quốc, một số ít từ Hàn Quốc và NhậtBản. Vì vậy, đánh giá chất lượng toàn diệnnguyên liệu kim ngân được thu mua ởnhững nơi khác nhau là cần thiết, góp phầnđảm bảo chất lượng thuốc. Trong nghiên cứuOHtrước, phương pháp định lượng đồng thời4 hoạt chất sinh học: coniferin, axít loganic,sweroside và loganin (hình 1) trong dượcliệu Kim ngân đã được tiến hành trên 92mẫu thu mua tại các nơi khác nhau củaTrung Quốc và Hàn Quốc có tính chọn lọcvà chính xác cao [2, 3]. Trong nghiên cứunày, phương pháp định lượng đồng thờicác hoạt chất sinh học trong dược liệu Kimngân được áp dụng cho số lượng mẫu lớncùng với phân tích tổng thể sắc đồ vàphân tích phân loại nguồn dược liệu Kimngân để đánh giá chất lượng tổng thể củadược liệu này.COOR1HOHOHOHOOOHOHOHR2OOHOHOConiferin (1)OOHOOOHOHOOOHHOOHLoganic acid (2)Loganin (4)R1 R2HOHCH3 CH3HSweroside (3)Hình 1: Cấu trúc của chất đánh dấu trong phân tích định lượng Kim ngân.VẬT LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁPNGHIÊN CỨU1. Hoá chất và thiết bị.- Hoá chất: nội chuẩn: methyl paraben;chuẩn coniferin, axít loganic, sweroside vàloganin được chiết xuất, phân tách, tinh chếvà xác định cấu trúc; methanol, nước cất,axít formic đạt tiêu chuẩn cho sắc ký lỏng.- Thiết bị: máy sắc ký lỏng hiệu năng caoShimadzu, Detector UV-VIS và Detectordiode array được nối với máy tính IBM.62. Mẫu nghiên cứu.Mẫu Kim ngân thu mua ở các nơi khácnhau tại Trung Quốc, Hàn Quốc, mẫu đượclưu tại Đại học Dược, Đại học Quốc giaChung Nam, Hàn Quốc.3. Điều kiện sắc ký.Cột: cột phân tích pha đảo OptimapakRP18 (250 x 4,6 mm; 5 μm) của công ty RSTech, Hàn Quốc; bước sóng phát hiện254 nm; pha đ ...