Phát hiện các thể đột biến ở VSV

Phát hiện các thể đột biến ở VSVMuốn phát hiện các đột biến có hiệu quả cần có hệ thống chọn lọc để tìm thấy các đột biến hiếm hoi trong khối rất lớn các dạng không đột biến. Các hệ thống chọn lọc đột biến có nhiều phụ thuộc vào các đột biến khác nhau. Liên quan đến chọn lọc đột biến ở vi sinh vật, người ta đưa ra khái niệm lực phân giải (resolving power).
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Phát hiện các thể đột biến ở VSV Phát hiện các thể đột biến ở VSVMuốn phát hiện các đột biến có hiệu quảcần có hệ thống chọn lọc để tìm thấy cácđột biến hiếm hoi trong khối rất lớn cácdạng không đột biến. Các hệ thống chọnlọc đột biến có nhiều phụ thuộc vào cácđột biến khác nhau. Liên quan đến chọnlọc đột biến ở vi sinh vật, người ta đưa rakhái niệm lực phân giải (resolvingpower). Khái niệm này dùng để chỉ khảnăng phát hiện các đột biến rất hiếm sovới không đột biến.Có nhiều phương pháp để phát hiện cácloại đột biến ở vi sinh vật:- Phương pháp đề kháng: ở vi khuẩncác tác nhân chọn lọc thường là thuốc vàphage. Các đột biến được dễ dàng pháthiện trên môi trường agar có thuốc hayphage ở dạng các khuẩn lạc được mọclên.- Phương pháp làm giàu chậm: việcphát hiện đột biến khuyết dưỡng khókhăn hơn. Dung dịch vi khuẩn pha loãngđược cấy lên bề mặt môi trường agar tốithiểu để mọc rời thành khuẩn lạc. Mộtlớp môi trường tương tự được đổ lêntrên, phủ lớp mỏng. Hộp petri được ủ đểcác khuẩn lạc bình thường mọc lên. Sauđó, đổ phủ thêm một lớp môi trường dinhdưỡng có chất bổ sung và ủ tiếp cho chấtbổ sung khuếch tán. Các đột biến khuyếtdưỡng sẽ mọc sau khi có chất bổ sung,nên khuẩn lạc nhỏ hơn do mọc chậm.- Phương pháp làm giàu hạn chế: làdạng đơn giản của phương pháp làm giàuchậm. Các vi khuẩn được cấy trên môitrường tối thiểu có một ít bổ sung. Trongđiều kiện đó các đột biến khuyết dưỡngmọc đến khi hết chất dinh dưỡng bổ sungthì dừng, nên tạo khuẩn lạc nhỏ. Các vikhuẩn bình thường tiếp tục mọc tạokhuẩn lạc to.- Phương pháp làm giàu nhờ penicillin:được áp dụng cho các vi khuẩn.Penicillin có tác dụng diệt các vi khuẩnbình thường khi phân chia. Các vi khuẩnđược cho vào môi trường tối thiểu cópenicillin. Các vi khuẩn đang tăng trưởngbị diệt chỉ có các tế bào đột biến khôngtăng trưởng còn sống sót. Sau đó hỗn hợpđược cấy lên môi trường không cópenicillin thì các đột biến khuyết dưỡngmọc lên với tỷ lệ tương đối cao hơn.- Phương pháp chọn lọc: được sử dụngđể chọn lọc các đột biến khuyết dưỡng ởnấm sợi.Dung dịch các bào tử được nuôi trongmôi trường dinh dưỡng thiếu chất bổsung. Các đột biến thiếu chất bổ sungkhông mọc được, các dạng bình thườngmọc ra nhiều sợi. Khi lọc qua màng lọcsợi thủy tinh, các dạng bình thường nhiềusợi bị giữ lại, các dạng đột biến đi quamàng lọc. Dung dịch có nhiều dạng độtbiến được cấy trên môi trường có chất bổsung và kiểm tra tìm các dạng đột biến.- Trong phương pháp in, các vi khuẩnđược cấy để mọc rời từng khuẩn lạc trênmôi trường dinh dưỡng tối thiểu. Cáckhuẩn lạc đột biến không mọc lên được.Căn cứ vào đột biến không mọc ở bảnsao tách các đột biến khuyết dưỡng.Ngoài ra còn có các phương pháp chuyênbiệt để phát hiện các loại đột biến khác.