![Phân tích tư tưởng của nhân dân qua đoạn thơ: Những người vợ nhớ chồng… Những cuộc đời đã hóa sông núi ta trong Đất nước của Nguyễn Khoa Điềm](https://timtailieu.net/upload/document/136415/phan-tich-tu-tuong-cua-nhan-dan-qua-doan-tho-039-039-nhung-nguoi-vo-nho-chong-nhung-cuoc-doi-da-hoa-song-nui-ta-039-039-trong-dat-nuoc-cua-nguyen-khoa-136415.jpg)
Phát triển và ứng dụng kỹ thuật PCR đa mồi trong chẩn đoán E. coli gây tiêu chảy từ phân Đọc thêm thuvienykhoa.vn
Số trang: 8
Loại file: pdf
Dung lượng: 316.16 KB
Lượt xem: 10
Lượt tải: 0
Xem trước 2 trang đầu tiên của tài liệu này:
Thông tin tài liệu:
Tiêu chảy lμ một vấn đề sức khoẻ toμn cầu. Bệnh hay gặp ở trẻ em. ở các n−ớc đang phát triển, có ít nhất 1 tỷ tr−ờng hợp tiêu chảy hμng năm vμ số tử vong lμ 5 đến 7 triệu. Trung bình một năm một trẻ mắc 3,3 lần tiêu chảy. Tại Việt Nam, một số nghiên cứu cho thấy, số lần bị tiêu chảy trong một năm đối với một trẻ từ 2,2 – 6. Tại các n−ớc công nghiệp phát triển, tiêu chảy vẫn còn phổ biến ở trẻ em, ng−ời giμ vμ các khách du...
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Phát triển và ứng dụng kỹ thuật PCR đa mồi trong chẩn đoán E. coli gây tiêu chảy từ phân Đọc thêm thuvienykhoa.vn TCNCYH 23 (3) 2003 Ph¸t triÓn vµ øng dông kü thuËt PCR ®a måi trong chÈn ®o¸n E. coli g©y tiªu ch¶y tõ ph©n NguyÔn Vò Trung1, Lª Huy ChÝnh1, Lª V¨n Phñng1, Andrej Weintraub2 1 Bé m«n Vi sinh, §¹i häc Y Hµ Néi, 2 Khoa Vi sinh -MiÔn dÞch -BÖnh häc BÖnh viÖn Huddinge, ViÖn Karolinska-Thuþ §iÓn Kü thuËt PCR ®a måi lÇn ®Çu tiªn ®−îc nghiªn cøu thµnh c«ng ë ViÖt nam b»ng c¸ch phèi hîp8 cÆp måi ®Ó chÈn ®o¸n 5 lo¹i E. coli g©y tiªu ch¶y (ETEC, EHEC, EIEC, EPEC, EAEC) tõ ph©ntrÎ em d−íi 5 tuæi bÞ tiªu ch¶y. Kü thuËt nµy cho phÐp chÈn ®o¸n chÝnh x¸c 5 lo¹i E. coli g©y tiªuch¶y chØ b»ng mét ph¶n øng PCR víi ®é nh¹y vµ ®é ®Æc hiÖu gÇn 100% vµ tiÕt kiÖm nguyªn vËtliÖu, thêi gian gÊp 5 lÇn so víi tiÕn hµnh tõng ph¶n øng PCR riªng biÖt. Qua ph©n tÝch 310 bÖnhphÈm ph©n tiªu ch¶y, 90 chñng E. coli g©y bÖnh ®· ®−îc ph©n lËp chiÕm 29,04% tæng sè c¸c bÖnhphÈm. Trong ®ã, EAEC lµ 58 chñng chiÕm 18,71%, ETEC 2 chñng (0,65%), EPEC 24 chñng(7,7%), vµ EIEC 6 chñng (1,94%).i. §Æt vÊn ®Ò n»m trong tÕ bµo vi khuÈn m· ho¸ cho c¸c yÕu tè ®éc lùc: Enteropathogenic E. coli (EPEC), Tiªu ch¶y lµ mét vÊn ®Ò søc khoÎ toµn cÇu. enterohemorrhagic E. coli (EHEC),BÖnh hay gÆp ë trÎ em. ë c¸c n−íc ®ang ph¸t enterotoxigenic E. coli (ETEC), enteroinvasivetriÓn, cã Ýt nhÊt 1 tû tr−êng hîp tiªu ch¶y hµng E. coli (EIEC) vµ enteroaggregative E. colin¨m vµ sè tö vong lµ 5 ®Õn 7 triÖu. Trung b×nh (EAEC) [3, 4]. HiÖn nay cã bèn ph−¬ng ph¸pmét n¨m mét trÎ m¾c 3,3 lÇn tiªu ch¶y. T¹i ®−îc dïng ®Ó chÈn ®o¸n c¸c E. coli nµy:ViÖt Nam, mét sè nghiªn cøu cho thÊy, sè lÇnbÞ tiªu ch¶y trong mét n¨m ®èi víi mét trÎ tõ • Dùa vµo c¸c tÝnh chÊt sinh vËt ho¸ häc.2,2 – 6. T¹i c¸c n−íc c«ng nghiÖp ph¸t triÓn, • §Þnh týp huyÕt thanh.tiªu ch¶y vÉn cßn phæ biÕn ë trÎ em, ng−êi giµvµ c¸c kh¸ch du lÞch ®Õn c¸c n−íc ®ang ph¸t • C¸c thö nghiÖm dùa trªn nh÷ng ®ÆctriÓn. Cã nhiÒu nguyªn nh©n dÉn ®Õn tiªu ch¶y. ®iÓm vÒ ®éc lùc.Trong ®ã, vi khuÈn ®ãng vai trß quan träng. C¸c ph−¬ng ph¸p nµy hÇu nh− kh«ng thÓ Trong sè c¸c vi khuÈn g©y tiªu ch¶y, E. coli chÈn ®o¸n ®−îc hoÆc rÊt tèn kÐm.hiÖn nay lµ c¨n nguyªn næi tréi, thu hót ®−îc sù • C¸c ph−¬ng ph¸p sinh häc ph©n tö:quan t©m cña c¸c b¸c sÜ l©m sµng, nhi khoa, visinh v× nã lµ c¨n nguyªn cña 1/3 sè tr−êng hîp + HiÖn nay chñ yÕu lµ hai ph−¬ng ph¸p:tiªu ch¶y. ViÖc chÈn ®o¸n gÆp khã kh¨n v× c¸c MÉu dß ADN (ADN probe) vµ ph¶n øng chuçitriÖu chøng l©m sµng kh«ng ®Æc hiÖu. Cã 5 lo¹i (Pylymerase Chain Reaction - PCR). TuyE. coli g©y tiªu ch¶y, ®−îc ph©n lo¹i theo c¸c nhiªn ®é nh¹y cña ph−¬ng ph¸p mÉu dß ADNc¬ chÕ g©y bÖnh kh¸c nhau dùa trªn c¸c gien6TCNCYH 23 (3) 2003thÊp, thao t¸c phøc t¹p vµ ®ßi hái mét sè l−îng II. ®èi t−îng vµ Ph−¬ng ph¸plín vi sinh vËt trong bÖnh phÈm. nghiªn cøu + PCR lµ kü thuËt tæng hîp acid nucleic ThiÕt kÕ nghiªn cøu. §¸nh gi¸ mét nghiÖmtrong èng nghiÖm. Trong ®ã, mét ®o¹n ADN ph¸p chÈn ®o¸n vµ nghiªn cøu m« t¶.®−îc nh©n lªn ®Æc hiÖu. Trong kü thuËt nµy, hai®o¹n oligonucleotid, ®−îc gäi lµ måi, g¾n ®Æc PCR chÈn ®o¸n E. coli g©y tiªu ch¶y tõhiÖu vµo ®o¹n ADN ®Ých vµ ®−îc khuÕch ®¹i bÖnh phÈm ph©n. Chóng t«i sö dông th−êngtheo mét sè chu kú ®−îc lÆp ®i lÆp l¹i. Chu kú qui chÈn ®o¸n E. coli g©y tiªu ch¶y b»ng PCRnµy gåm viÖc lµm t¸ch hai sîi cña ®o¹n ADN, theo th−êng qui cña Khoa Vi sinh l©m sµng,g¾n hai oligonucleotid vµo hai sîi nµy theo BÖnh viÖn Huddinge, ViÖn Karolinska,nguyªn t¾c bæ sung vµ kÐo dµi ®o¹n Stockholm, Thuþ §iÓn. BÖnh phÈm ph©n sauoligonucleotid d−íi t¸c ®éng cña enzym ADN khi thu thËp ®−îc cÊy lªn trªn m«i tr−êng chopolymerase. Trong PCR, ADN ®Ých ®−îc t¨ng vi khuÈn ®−êng ruét, ®Ó ë 370 C sau 18-24 giê.lªn theo hµm sè mò sau mçi chu kú. S¶n phÈm Vi khuÈn trªn ®Üa m«i tr−êng ®−îc hoµ vµocña PCR ®−îc ph¸t hiÖn sau khi ®iÖn di trªn dung dÞch ®Öm phosphat, ®un c¸ch thuû ëagarose, nhuém b»ng ...
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Phát triển và ứng dụng kỹ thuật PCR đa mồi trong chẩn đoán E. coli gây tiêu chảy từ phân Đọc thêm thuvienykhoa.vn TCNCYH 23 (3) 2003 Ph¸t triÓn vµ øng dông kü thuËt PCR ®a måi trong chÈn ®o¸n E. coli g©y tiªu ch¶y tõ ph©n NguyÔn Vò Trung1, Lª Huy ChÝnh1, Lª V¨n Phñng1, Andrej Weintraub2 1 Bé m«n Vi sinh, §¹i häc Y Hµ Néi, 2 Khoa Vi sinh -MiÔn dÞch -BÖnh häc BÖnh viÖn Huddinge, ViÖn Karolinska-Thuþ §iÓn Kü thuËt PCR ®a måi lÇn ®Çu tiªn ®−îc nghiªn cøu thµnh c«ng ë ViÖt nam b»ng c¸ch phèi hîp8 cÆp måi ®Ó chÈn ®o¸n 5 lo¹i E. coli g©y tiªu ch¶y (ETEC, EHEC, EIEC, EPEC, EAEC) tõ ph©ntrÎ em d−íi 5 tuæi bÞ tiªu ch¶y. Kü thuËt nµy cho phÐp chÈn ®o¸n chÝnh x¸c 5 lo¹i E. coli g©y tiªuch¶y chØ b»ng mét ph¶n øng PCR víi ®é nh¹y vµ ®é ®Æc hiÖu gÇn 100% vµ tiÕt kiÖm nguyªn vËtliÖu, thêi gian gÊp 5 lÇn so víi tiÕn hµnh tõng ph¶n øng PCR riªng biÖt. Qua ph©n tÝch 310 bÖnhphÈm ph©n tiªu ch¶y, 90 chñng E. coli g©y bÖnh ®· ®−îc ph©n lËp chiÕm 29,04% tæng sè c¸c bÖnhphÈm. Trong ®ã, EAEC lµ 58 chñng chiÕm 18,71%, ETEC 2 chñng (0,65%), EPEC 24 chñng(7,7%), vµ EIEC 6 chñng (1,94%).i. §Æt vÊn ®Ò n»m trong tÕ bµo vi khuÈn m· ho¸ cho c¸c yÕu tè ®éc lùc: Enteropathogenic E. coli (EPEC), Tiªu ch¶y lµ mét vÊn ®Ò søc khoÎ toµn cÇu. enterohemorrhagic E. coli (EHEC),BÖnh hay gÆp ë trÎ em. ë c¸c n−íc ®ang ph¸t enterotoxigenic E. coli (ETEC), enteroinvasivetriÓn, cã Ýt nhÊt 1 tû tr−êng hîp tiªu ch¶y hµng E. coli (EIEC) vµ enteroaggregative E. colin¨m vµ sè tö vong lµ 5 ®Õn 7 triÖu. Trung b×nh (EAEC) [3, 4]. HiÖn nay cã bèn ph−¬ng ph¸pmét n¨m mét trÎ m¾c 3,3 lÇn tiªu ch¶y. T¹i ®−îc dïng ®Ó chÈn ®o¸n c¸c E. coli nµy:ViÖt Nam, mét sè nghiªn cøu cho thÊy, sè lÇnbÞ tiªu ch¶y trong mét n¨m ®èi víi mét trÎ tõ • Dùa vµo c¸c tÝnh chÊt sinh vËt ho¸ häc.2,2 – 6. T¹i c¸c n−íc c«ng nghiÖp ph¸t triÓn, • §Þnh týp huyÕt thanh.tiªu ch¶y vÉn cßn phæ biÕn ë trÎ em, ng−êi giµvµ c¸c kh¸ch du lÞch ®Õn c¸c n−íc ®ang ph¸t • C¸c thö nghiÖm dùa trªn nh÷ng ®ÆctriÓn. Cã nhiÒu nguyªn nh©n dÉn ®Õn tiªu ch¶y. ®iÓm vÒ ®éc lùc.Trong ®ã, vi khuÈn ®ãng vai trß quan träng. C¸c ph−¬ng ph¸p nµy hÇu nh− kh«ng thÓ Trong sè c¸c vi khuÈn g©y tiªu ch¶y, E. coli chÈn ®o¸n ®−îc hoÆc rÊt tèn kÐm.hiÖn nay lµ c¨n nguyªn næi tréi, thu hót ®−îc sù • C¸c ph−¬ng ph¸p sinh häc ph©n tö:quan t©m cña c¸c b¸c sÜ l©m sµng, nhi khoa, visinh v× nã lµ c¨n nguyªn cña 1/3 sè tr−êng hîp + HiÖn nay chñ yÕu lµ hai ph−¬ng ph¸p:tiªu ch¶y. ViÖc chÈn ®o¸n gÆp khã kh¨n v× c¸c MÉu dß ADN (ADN probe) vµ ph¶n øng chuçitriÖu chøng l©m sµng kh«ng ®Æc hiÖu. Cã 5 lo¹i (Pylymerase Chain Reaction - PCR). TuyE. coli g©y tiªu ch¶y, ®−îc ph©n lo¹i theo c¸c nhiªn ®é nh¹y cña ph−¬ng ph¸p mÉu dß ADNc¬ chÕ g©y bÖnh kh¸c nhau dùa trªn c¸c gien6TCNCYH 23 (3) 2003thÊp, thao t¸c phøc t¹p vµ ®ßi hái mét sè l−îng II. ®èi t−îng vµ Ph−¬ng ph¸plín vi sinh vËt trong bÖnh phÈm. nghiªn cøu + PCR lµ kü thuËt tæng hîp acid nucleic ThiÕt kÕ nghiªn cøu. §¸nh gi¸ mét nghiÖmtrong èng nghiÖm. Trong ®ã, mét ®o¹n ADN ph¸p chÈn ®o¸n vµ nghiªn cøu m« t¶.®−îc nh©n lªn ®Æc hiÖu. Trong kü thuËt nµy, hai®o¹n oligonucleotid, ®−îc gäi lµ måi, g¾n ®Æc PCR chÈn ®o¸n E. coli g©y tiªu ch¶y tõhiÖu vµo ®o¹n ADN ®Ých vµ ®−îc khuÕch ®¹i bÖnh phÈm ph©n. Chóng t«i sö dông th−êngtheo mét sè chu kú ®−îc lÆp ®i lÆp l¹i. Chu kú qui chÈn ®o¸n E. coli g©y tiªu ch¶y b»ng PCRnµy gåm viÖc lµm t¸ch hai sîi cña ®o¹n ADN, theo th−êng qui cña Khoa Vi sinh l©m sµng,g¾n hai oligonucleotid vµo hai sîi nµy theo BÖnh viÖn Huddinge, ViÖn Karolinska,nguyªn t¾c bæ sung vµ kÐo dµi ®o¹n Stockholm, Thuþ §iÓn. BÖnh phÈm ph©n sauoligonucleotid d−íi t¸c ®éng cña enzym ADN khi thu thËp ®−îc cÊy lªn trªn m«i tr−êng chopolymerase. Trong PCR, ADN ®Ých ®−îc t¨ng vi khuÈn ®−êng ruét, ®Ó ë 370 C sau 18-24 giê.lªn theo hµm sè mò sau mçi chu kú. S¶n phÈm Vi khuÈn trªn ®Üa m«i tr−êng ®−îc hoµ vµocña PCR ®−îc ph¸t hiÖn sau khi ®iÖn di trªn dung dÞch ®Öm phosphat, ®un c¸ch thuû ëagarose, nhuém b»ng ...
Tìm kiếm theo từ khóa liên quan:
kỹ thuật PCR chẩn đoán E. coli báo cáo khoa học nghiên cứu y học sinh lý học tài liệu y họcTài liệu liên quan:
-
63 trang 333 0 0
-
Tổng quan hệ thống về lao thanh quản
6 trang 320 0 0 -
5 trang 314 0 0
-
8 trang 270 1 0
-
13 trang 268 0 0
-
Tổng quan hệ thống hiệu quả kiểm soát sâu răng của Silver Diamine Fluoride
6 trang 260 0 0 -
Báo cáo khoa học Bước đầu tìm hiểu văn hóa ẩm thực Trà Vinh
61 trang 255 0 0 -
Vai trò tiên lượng của C-reactive protein trong nhồi máu não
7 trang 245 0 0 -
Khảo sát hài lòng người bệnh nội trú tại Bệnh viện Nhi Đồng 1
9 trang 233 0 0 -
Tóm tắt luận án tiến sỹ Một số vấn đề tối ưu hóa và nâng cao hiệu quả trong xử lý thông tin hình ảnh
28 trang 225 0 0