Thu nhận protein điều chỉnh miễn dịch FIP từ hệ sợi nấm Ganoderma colossum Donk

Các hoạt chất trong nấm Hoàng chi (Ganoderma colosum Donk) của Việt Nam cho đến nay vẫn chưa có nhiều nghiên cứu, đặc biệt là loại protein điều chỉnh miễn dịch – FIP – đang được giới khoa học hết sức chú ý trong việc nghiên cứu sử dụng điều trị các bệnh hiểm nghèo. Mục tiêu: Thu nhận FIP từ nuôi cấy sợi nấm Hoàng chi, xác định khối lượng phân tử và đánh giá khả năng chống ngưng kết máu của FIP.
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Thu nhận protein điều chỉnh miễn dịch FIP từ hệ sợi nấm Ganoderma colossum DonkY Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 20 * Phụ bản của Số 1 * 2016 Nghiên cứu Y học THU NHẬN PROTEIN ĐIỀU CHỈNH MIỄN DỊCH FIP TỪ HỆ SỢI NẤM GANODERMA COLOSSUM DONK Lê Nguyễn Uyên Chi*TÓM TẮT Mở đầu: Các hoạt chất trong nấm Hoàng chi (Ganoderma colosum Donk) của Việt Nam cho đến nay vẫnchưa có nhiều nghiên cứu, đặc biệt là loại protein điều chỉnh miễn dịch – FIP – đang được giới khoa học hết sứcchú ý trong việc nghiên cứu sử dụng điều trị các bệnh hiểm nghèo. Mục tiêu: Thu nhận FIP từ nuôi cấy sợi nấm Hoàng chi, xác định khối lượng phân tử và đánh giá khả năngchống ngưng kết máu của FIP. Đối tượng – phương pháp nghiên cứu: Sinh khối hệ sợi nấm Hoàng chi thu được từ việc nuôi cấy dịch thể.FIP được thu nhận và tinh sạch bằng sắc ký lọc gel. Protein được định khối lượng phân tử bằng điện di SDS-PAGE. Hoạt tính chống ngưng kết máu của FIP tách chiết được chứng minh trên máu người và máu cừu. Kết quả: Mẫu protein thu được từ sợi nuôi cấy nấm Hoàng chi có khối lượng là 13,114 kiloDalton (kDa) vàmang hoạt tính của họ FIP là gây ngưng kết đối với máu cừu, nhưng hoàn toàn làm tan đối với 4 nhóm máungười. Kết luận: Nghiên cứu lần đầu tiên xác định sự hiện diện của dòng protein điều chỉnh miễn dịch ly trích từhệ sợi nuôi cấy nấm Hoàng chi ở Việt Nam. Kết quả này là cơ sở để thực hiện những nghiên cứu về tìm hiểu trìnhtự gen mã hóa cho FIP, ứng dụng tiếp theo trong công nghệ sản xuất FIP tái tổ hợp để bào chế dược liệu từ thảomộc, giúp phòng và hỗ trợ điều trị bệnh. Từ khóa: Ganoderma colossum, nuôi cấy hệ sợi, FIPs.ABSTRACT AN IMMUNOMODULATORY PROTEIN EXTRACTED FROM THE MYCELIUM OF GANODERMA COLOSSUM DONK Le Nguyen Uyen Chi * Y Hoc TP. Ho Chi Minh * Vol. 20 - Supplement of No 1 - 2016: 9 - 14 Background – Objectives: Active elements of the Ganoderma colossum – one type of lingzhi mushroomfound in Vietnam – have not been much studied till now. One of them was the immunomodulatory protein - FIP,which was promised as an efficient medical herbal drug for treatment of diseases. Methods: FIP was isolated from the cultured mycelium of G. colossum. Its molecular weight was measuredby SDS-PAGE electrophoresis. The ability of hemaglutination of FIP was tested with human and sheep red bloodcells. Results: FIP’s molecular weight was 13.114 kDa. Aggregation was observed from sheep red blood cells in thepresence of purified FIP of G. colossum. However, no aggregation was seen for any type of human red blood cells. Conclusions: This research was firstly determined the presence of an immunomodulatory protein isolatedfrom cultured mycelia of G. colossum in Vietnam. This finding served as a foundation for further experiments ofFIP gene, as well as the production of recombinant FIP in herbal drugs to prevent and support the treatment fordiseases. Keywords: Ganoderma colossum, mycelium, FIPs. *Khoa Khoa học cơ bản, ĐH Y Dược TP Hồ Chí Minh Địa chỉ liên hệ : TS. Lê Nguyễn Uyên Chi ĐT: 012-1639-5936 Email: uyenchile@hotmail.comKhoa học Cơ bản 9Nghiên cứu Y học Y Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 20 * Phụ bản của Số 1 * 2016ĐẶT VẤN ĐỀ lượng, thành phần amino acid và có khối lượng trung bình từ 11 – 15 kDa(18) (bảng 1). Nấm Hoàng chi (Ganoderma colosum Donk) là Các thử nghiệm lâm sàng đã chứng minh tấtmột loài nấm quý hiếm của Việt Nam đã được cả các protein FIP đều có những hoạt tính tươngchứng minh là có thành phần hoạt chất đa dạng tự nhau: không làm ngưng kết máu người(4,7,8);với hoạt tính sinh học rất cao như kháng khả năng điều chỉnh các đáp ứng miễn dịch cơkhuẩn(5,13), kháng HIV type I(2), ức chế tế bào ung thể thông qua một số cơ chế quan trọng nhưthư gan(17). Mặc dù với thành phần hoạt chất tăng sinh tế bào lách, ức chế các phản ứng quáđược biết khá đa dạng, song các nghiên cứu hiện mẫn của cơ thể, kích thích cơ thể sản sinh cácnay chủ yếu mới tập trung vào các triterpenoid interleukin(4,7,9,14). Các khám phá gần đây cũngnhư colossolactones (A-G)(2,5), phenolic(3) c ...