TÌM HIỂU VỀ PHAGE LAMBDA

Năm 1917 các nhà nghiêncứu canada Felix d’herellexuất bản m ột bài báo vềm ột chất đối kháng vi sinhvật vô hình của trực khuẩngây bệnh kiết lỵ.
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
TÌM HIỂU VỀ PHAGE LAMBDATÌMHIỂUVỀPHAGELAMBDA NGUYỄN THỊ HUỲNH G VG D :C Ô MAI NHÓ M 8: PH AN Ị É ẢO TH B TH D ƯƠN G U ỐC ƯỜNG C Q NGUYỄN THỊ NGỌC BÍCH HUỲNH THỊ THÚY DiỄM1.Giớithiệu N ăm 1917 ác à c nh nghi n ê cứu canada i d’ ele Felx her l xuấtbản ộtbàibáo ề m v m ộtchấtđốikháng nh visi vậtvô ì củar c ẩn tự khu h nh gây ệnh ếtl .Ô ng ọi ki ỵ b g l ác à c bact i erophage r vius. Sau óên àyútngắn đ t n r chỉhểhực ẩn. tt khu Năm 1930 Martin Schlessinger xác định kích thướt của một vi khuẩn bằng micromet. Năm 1951 một sinh viên tại đại học Wisconsin, Ester Lederberg phát hiện thể thực khuẩn lambda, một trong những thể thực khuẩn lambda được sử dụng trong các vector thể thực khuẩn. Lambda thể thực khuẩn đẵ trở thành đối tượng thực nghiệm vì lý do có thể nhất là cách chia vi khuẩn đã được phát triển như một phương tiện để nghiên cứu vật chủ của nó, E.COLI. Các khám phá như dẫn truyền trung gian của các gen vi khuẩn, kế thừa từ việc nghiên cứu các thể thực khuẩn lambda.1.1Địnhnghĩ aPhagelambda Là AND dạng vòng Họ: siphoviridae Lambda thể thực khuẩn có đầu và đuôi Là thể thực khuẩn ôn hòa. Đặc điểm của phage lambda: Kích thước của phage lambda: có chiều dài 48-50 kb. Trong khi đó vector phage lambda gt10 và gt11 được thiết kế có độ dài lên tới 43.34 kb. Vậy nên đoạn DNA có chiều dài khoảng 0-9kb. Phage lambda : là phage ôn hòa không thực hiện đầy đủ các chu kì phát triển trong tế bào. Những tế bào vi khuẩn khi bị nhiểm phage vẫn tiếp tục phát triển mạnh và các phage này sẽ không ra ngoài tế bào. Hiện tượng này diễn ra sẽ không kèm hiện tượng nhiễm phage độc. trong một trường hợp lí hóa nào đó có thể xảy ra hiện tượng phage ôn hòa trở thành phage độc.1.2 cấu trúc phage lambda Thểhực ẩnà ộtl ạivius ủa ẩn t khu l m o r c vikh Lambdathểthựckhuẩnlàmộthạtvirusbaogồmmộtđầu,chứasợiđôi DNAtuyếntínhlàvậtliệuditruyềncủanó,vàmộtcáiđuôicóthểcó cácsợiđuôi.Cáchạtthểthựckhuẩnnhậndiệnvàgắnvớichủcủanó, E.coli,DNAtrongđầucủathểthựckhuẩnđểbịđẩyrathôngquađuôi vàotrongtếbàochấtcủatếbàovikhuẩn.Điềunàydẫnđếnlắpráp củacáchạtnhiềuthểthựckhuẩnmớitrongtếbàovàlygiảitếbàotiếp theo:baogồmcảvirionđãđượclắpráp,vàomôitrường.Tuynhiên, trongđiềukiệnnhấtđịnhADNthểthựckhuẩncóthểhòanhậpvào nhiễmsắcthểtếbàochủtrongconđườnglysogenic(tềm an) i t .1.3phânloạiphagelambda Lambda promoter : lambda promoter, lambda PL, lambda PR tỏ ra hiệu quả gấp 10 lần so với lac promoter. Sự phiên mã của promoter này bị ức chế bởi sản phẩm của gen lambdaCI. Một đột biến trong repressor, cI857, đưa ra sự mẫn cảm với nhiệt độ.vd: tại nhiệt độ 28 repressor được hoạt hóa và quá trình phiên mã bị ức chế, nhưng ở nhiệt độ 42 repressor bị bất hoạt và promoter được cảm hóa. Phage lambda cải tiến: chủng lambda dại không thể làm vector tách dòng vì chứa quá nhiều vị trí enzyme cắt, do đó cần tạo ra phage lambda cải tiến dùng cho cách dòng. Nếu biến chủng ở vị trí giới hạn thí một đoạn DNA chuyên biệt của phage co thể mất đi để thay thế bằng một DNA ngoại lai gọi là vetor thay thế.1.4 Quá trình nhân lên của phage lambda Sau khi bơm DNA vào tế bào chất hoặc sau khi prophage tách khỏi NST, DNA của phage lambda lặp tức khép vòng và bắt đầu quá trình sao chép. Quá trình tiến hành theo 2 giai đoạn: Giai đoạn 1:từ phân tử DNA kép, khép vòng tiến hành sao chép theo kiểu theta để tăng số lượng khuôn cho phiên mã và khuôn cho sao chép. Sau đó từ điểm khởi đầu tiến hành sao chép theo hai hướng đối diện nhau và kết thúc khi hai Giai đoạn 2: sao chép theo cơ chế vòng tròn xoay. Enzyme cắt do phage đã mã hóa nhận biết vị trí chuyên biệt trên cả hai mạch để cắt thành các đoạn genmo. Genmo tạo thành có chiều dài bằng 79-106% chiều dài của genmo lambda bình thường. Sau khi tổng hợp protein cấu trúc sẽ tiến hành lắp ráp để 1.5 Chu trình sinh tan Sau khi xâm nhập, sợi DNA kép của phage lambda lập tức khép vòng và biểu hiện gen. có hai gen được biểu hiện sớm là CI và Cro. Gen CI mã hóa cho protein CI là ức chế lambda. Khi chất này được tích lũy thì sẽ ngăn quá trình ...