Tối ưu hóa môi trường lên men bề mặt (SSP) của chủng Aspergil lus niger GM56 (ĐB 106) để thu Xylanaza cung cấp cho chăn nuôi

Trong nghiên cứu này, các tác giả tiến hành tối ưu hóa môi trường lên men bề mặt của chủng A. niger GM56 (ĐB106) theo phương pháp Box -Willson trên quy mô lớn nhằm thu được nhiều lương xylanaxa để phục vụ cho các nghiên cứu ứng dụng tiếp theo. Mời các bạn cùng tham khảo.
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Tối ưu hóa môi trường lên men bề mặt (SSP) của chủng Aspergil lus niger GM56 (ĐB 106) để thu Xylanaza cung cấp cho chăn nuôi Journal of Science of Hanoi National University of Education Natural sciences, Volume 52, Number 4, 2007, pp. 120- 126TÈI ×U HÂA MÆI TR×ÍNG L–N MEN B— MT (SSP) CÕA CHÕNG Aspergillus niger GM56 (B 106) š THU XYLANAZA CUNG C‡P CHO CH‹N NUÆI Ph÷ìng Phó Cæng, Mai Thà H¬ng, Nguy¹n Thnh ¤t Khoa Sinh håc KTNN, Tr÷íng HSP H Nëi1 Mð ¦uXylanaza l mët trong nhúng enzyme câ nhi·u ùng döng trong thüc ti¹n, tr¶n th¸ giîinh§t l c¡c n÷îc câ n·n khoa håc ti¶n ti¸n xylanaza ÷ñc nghi¶n cùu v· nhi·u m°t v÷ñc dòng rëng r¢i trong nhi·u ngnh cæng nghi»p, g¦n ¥y ÷ñc sû döng nhi·u º t«ngtrång vªt nuæi [7]. Ð Vi»t Nam xylanaza h¦u nh÷ ch÷a ÷ñc nghi¶n cùu, hìn núa c¡c lo¤ithùc «n cæng nghi»p cho gia sóc, gia c¦m c¦n tê hñp enzym trong â câ xylanaza th¼ asè ·u nhªp ngo¤i. Trong t¤p ch½ Næng Nghi»p v PTNT sè 15 v 16 n«m 2005 chóng tæi¢ tuyºn chån c¡c chõng Aspergillus câ kh£ n«ng sinh xylanaza, çng thíi n¥ng cao ho¤tt½nh enzym b¬ng ph÷ìng ph¡p g¥y ët bi¸n b¬ng tia tû ngo¤i UV. K¸t qu£ tø chõng gècAspergillus. niger GM56 chóng tæi ¢ t¤o ra chõng ët bi¸n A. niger GM56 (B 106) cân«ng su§t sinh xylanaza cao hìn so vîi chõng gèc tø 15 24 % tr¶n mæi tr÷íng l¶n menrn sinh ra l÷ñng xylanaza 1865 IU/ g ch§t khæ [1,2] º câ thº ÷a chõng ny s£n xu§ttr¶n quy mæ lîn thu nhi·u xylanaza hìn ¡p ùng nhu c¦u ái häi enzym cho ngnh ch«nnuæi. Ch½nh v¼ vªy trong nghi¶n cùu ny chóng tæi ti¸n hnh tèi ÷u hâa mæi tr÷íng l¶nmen b· m°t cõa chõng A. niger GM56 (B106) theo ph÷ìng ph¡p Box -Willson tr¶n quymæ lîn nh¬m thu ÷ñc nhi·u l÷ñng xylanaza º phöc vö cho c¡c nghi¶n cùu ùng döngti¸p theo.2 Vªt li»u v ph÷ìng ph¡p nghi¶n cùu2.1 Vªt li»u:+ Vi sinh vªt : Chõng A. niger GM56 (B 106) ÷ñc sinh ra tø g¥y ët bi¸n chõng A.niger GM56 b¬ng tia UV. Chõng A. niger GM56 ÷ñc tuyºn chån tø bë s÷u tªp nguçngen RNM cõa pháng th½ nghi»m Cæng ngh» - Sinh håc Tr÷íng HSP H Nëi câ kh£ n«ngsinh xylanaza tr¶n ph¸ phö ph©m næng nghi»p. + Mæi tr÷íng : 120 PHUONG PHU CONG - Mæi tr÷íng kho¡ng cì sð : Crapek dox (g/l) : KN O3 : 3; KH2 P O4 : 1; M gSO4 7H2 O: 0,5 ; KCl : 0,5 ; F eSO4 : 0,01; NaCl : 10; - Cì ch§t lãi ngæ nghi·n.2.2 Ph÷ìng ph¡p nghi¶n cùu+ X¡c ành ho¤t t½nh xylanaza b¬ng ph÷ìng ph¡p cõa Bailey (1992): 1 ìn và ho¤t t½nhxylanaza (IU) ÷ñc x¡c ành l l÷ñng enzym c¦n thi¸t º gi£i phâng 1 µ mol xylose tø oatspelts xylan trong 1 phót ð i·u ki»n ph£n ùng [5]. + X¡c ành hm l÷ñng ÷íng khû b¬ng ph÷ìng ph¡p DNS lªp ç thà chu©n xylose[3,8]. + Sû döng ph÷ìng ph¡p tèi ÷u hâa Box willson quy ho¤ch thüc nghi»m bªc 1 vîi 3bi¸n [4,6]; Y = b0 + b1 x1 + b2 x2 + b3 x3 trong â Y l ¤i l÷ñng c¦n tèi ÷u, b0 ; b1 ; b2 ; b3 lc¡c h» sè hçi quy; x1 ; x2 ; x3 l c¡c bi¸n sè. Kiºm tra c¡c h» sè cõa ph÷ìng tr¼nh hçi quytheo ti¶u chu©n student c¡c h» sè câ ngh¾a n¸u > Sb*t. Kiºm tra sü th½ch ùng cõa mæh¼nh ta sû döng chu©n Fishers vîi mùc câ ngh¾a khi FB > Ftt .3 K¸t qu£ v th£o luªn3.1 T¼m i·u ki»n tèi ÷u v· nhi»t ë, ë ©m, thíi gian l¶n kh£ n«ng sinh xylanaza:Chóng tæi ¢ kh£o s¡t c¡c y¸u tè £nh h÷ðng cõa nhi»t ë, ë ©m, thíi gian qu¡ tr¼nh l¶nmen b· m°t chõng A. niger GM56 (B 106) tr¶n quy mæ s£n xu§t lîn. K¸t qu£ kh£o s¡t÷ñc thº hi»n ð b£ng 1. Ghi chó : Mæi tr÷íng rn cì ch§t lãi ngæ ÷ñc lm ©m b¬ng mæi H¼nh 1:tr÷íng kho¡ng cì sð KNO3 : 3g/l; KH2 PO4 : 1g/l; MgSO4 7H2 O : 0,5g/l ; KCl : 0,5g/l ;FeSO4 : 0,01g/l; NaCl : 10g/l; Kho£ng x¡c ành cõa c¡c y¸u tè l:26 Tèi ÷u hâa mæi tr÷íng l¶n men b· m°t (SSP) Thíi gian ( gií): x1 [30 40] ; Nhi»t ë (0C) : x2 [ 25 - 35]; ë ©m (%): x3 [70 80] Sau ¥y l kho£ng bi¸n êi cõa c¡c y¸u tè ¢ chån. Ma trªn thüc nghi»m k¸t qu£ ghi H¼nh 2:ð b£ng 3. Kiºm tra sü hëi tö cõa c¡c sè li»u theo chu©n Cochran khi bi¸t bªc tü do f1= k-1 = 2 v f2 = N = 8 vîi mùc câ ngh¾a p = 0,05 tra b£ng ÷ñc GB = 0, 516 > Gt = 0, 336nh÷ vªy c¡c sai sè hëi tö l câ ngh¾a nh÷ nhau do vªy c¡c th½ nghi»m ÷ñc o còng mëtë ch½nh x¡c nh÷ nhau. T½nh c¡c h» sè hçi quy ta ÷ñc b0 = 979, 38; b1 = 8, 21; b2 = 31, 79; b3 = −5, 29; tø âta thi¸t lªp ÷ñc ph÷ìng tr¼nh hçi quy câ d¤ng: Y = 979, 38 + 8, 21x1 + 31, 79x2 ˘5, 29x3 . Kiºm tra sü câ ngh¾a cõa c¡c h» sè tr¶n theo ti¶u chu©n student: H» sè mæ h¼nh cângh¾a n¸u > Sb*t. Vîi N = 8 m f = N (k-1) = 16 vîi mùc câ ngh¾a p = 0,05 tra b£ngph¥n phèi student t¼m ra ÷ñc t = 2,12. Ta t½nh ÷ñc Sb*t = 1,87 ...