Tóm tắt Luận án Tiến sĩ Công nghệ sinh học: Nghiên cứu tạo dòng và tối ưu điều kiện biểu hiện gen mã hóa nattokinase trong Bacillus subtilis BD170 tái tổ hợp

Đề tài “Nghiên cứu tạo dòng và tối ưu điều kiện biểu hiện gen mã hóa nattokinase trong Bacillus subtilis BD170 tái tổ hợp” nhằm mục đích cung cấp nguồn dược chất tự nhiên cho các ứng dụng trong lĩnh vực y dược học.
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Tóm tắt Luận án Tiến sĩ Công nghệ sinh học: Nghiên cứu tạo dòng và tối ưu điều kiện biểu hiện gen mã hóa nattokinase trong Bacillus subtilis BD170 tái tổ hợp ĐẠI HỌC HUẾ TRƢỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC NGUYỄN THỊ ANH THƢ NGHIÊN CỨU TẠO DÒNG VÀ TỐI ƯU ĐIỀU KIỆNBIỂU HIỆN GEN MÃ HÓA NATTOKINASE TRONG Bacillus subtilis BD170 TÁI TỔ HỢP TÓM TẮT LUẬN ÁN TIẾN SĨ CÔNG NGHỆ SINH HỌC HUẾ, 2024Công trình đã được hoàn thành tại: Trường Đại học Khoa học, Đại học Huế Người hướng dẫn khoa học: GS.TS. NGUYỄN HOÀNG LỘC Phản biện 1: GS.TS. Nghiêm Ngọc Minh Viện nghiên cứu hệ gen, Viện Hàn lâm KH&CN Việt Nam Phản biện 2: PGS.TS. Lê Việt Dũng Trường Đại học Cần Thơ Phản biện 3: PGS.TS. Nguyễn Hữu Quân Trường Đại học Sư phạm, Đại học Thái Nguyên Luận án sẽ bảo vệ tại Hội đồng chấm luận án cấp Đại học,họp tại: Đại học Huế.Vào hồi …. giờ ….ngày …. tháng ….. năm …… Có thể tìm hiểu luận án tại: - Thư viện Quốc gia. - Thư viện Trường Đại học Khoa học, Đại học Huế ĐẠI HỌC HUẾ TRƢỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC NGUYỄN THỊ ANH THƢ NGHIÊN CỨU TẠO DÒNG VÀ TỐI ƯU ĐIỀU KIỆNBIỂU HIỆN GEN MÃ HÓA NATTOKINASE TRONG Bacillus subtilis BD170 TÁI TỔ HỢPTÓM TẮT LUẬN ÁN TIẾN SĨ CÔNG NGHỆ SINH HỌC Ngành: CÔNG NGHỆ SINH HỌC Mã số: 9 42 02 01 Người hướng dẫn Khoa học: GS.TS. NGUYỄN HOÀNG LỘC HUẾ, 2024 MỞ ĐẦU1. Tính cấp thiết của đề tài Nhồi máu cơ tim và các bệnh tim mạch là những bệnh rất nghiêmtrọng, ảnh hưởng lớn đến sức khỏe con người và là nguyên nhânchính gây đột tử ở người. Ở người bình thường, sự tích tụ fibrin vàphân hủy fibrin trong máu được duy trì cân bằng, tuy nhiên khi fibrinkhông bị phân hủy gây nên sự mất cân bằng, dẫn đến nhồi máu cơtim và các rối loạn đông máu khác. Khi đó, máu đông sẽ hình thànhtrong thành mạch. Theo thời gian, cholesterol có xu hướng bám vàothành động mạch tạo các mảng bám trong động mạch máu. Nếu cácmảng bám bị vỡ, máu sẽ đông lại dẫn đến sự tắc nghẽn dòng máu lưuthông trong động mạch. Ngoài ra, cục máu đông có thể tự tách ra vàdi chuyển đến các vị trị khác theo dòng tuần hoàn máu đến bất cứ cơquan nào trong cơ thể người và có thể gây nên những nguy hiểmnghiêm trọng. Bacillus là một trong những nhóm vi sinh vật được ứng dụngnhiều nhất để sản xuất enzyme, phụ gia thực phẩm, vitamin, khángsinh và thuốc diệt côn trùng. Bên cạnh ưu điểm sản xuất proteinngoại bào mạnh, vi khuẩn thuộc chi Bacillus còn sử dụng sản xuấtcác protein tái tổ hợp không glycosyl hóa do đặc tính di truyền củachúng được nghiên cứu rất kỹ và dễ dàng kiểm soát quá trình sinhtổng hợp thông qua các kỹ thuật di truyền. Trên cơ sở đó, chúng tôi đã tiến hành đề tài: “Nghiên cứu tạodòng và tối ưu điều kiện biểu hiện gen mã hóa nattokinase trongBacillus subtilis BD170 tái tổ hợp” nhằm mục đích cung cấp nguồndược chất tự nhiên cho các ứng dụng trong lĩnh vực y dược học. 1 Chương 1. TỔNG QUAN TÀI LIỆU1.1. GIỚI THIỆU VỀ NATTOKINASE1.1.1. Đặc điểm của nattokinase Nattokinase được mã hóa bởi gen aprN và được sinh tổng hợp ởdạng tiền chất với tín hiệu peptide và trình tự propeptide nằm ở đầutận cùng NH2 trong cấu trúc enzyme.1.1.2. Nguồn sản xuất nattokinase Nattokinase được sản xuất từ các nguồn vi sinh vật khác nhau,chủ yếu từ thực phẩm lên men như Natto của Nhật Bản, Chungkook-jang và Meju của Hàn Quốc, Gembus của Indonesia, Douchi củaTrung Quốc.1.1.3. Ứng dụng của nattokinase - Ứng dụng trong chống đông máu - Các ứng dụng khác1.2. HỆ THỐNG BIỂU HIỆN BACILLUS SUBTILIS1.2.1. Vi khuẩn Bacillus subtilis B. subtilis thuộc giới vi khuẩn, ngành Firmicutes, lớp Bacilli, bộBacillales, họ Bacillaceae, chi Bacillus, loài Bacillus subtilis. B.subtilis là trực khuẩn nhỏ, hai đầu tròn, bắt màu tím Gram (+).1.2.2. Hệ thống vector biểu hiện ở Bacillus Hệ thống vector biểu hiện cho Bacillus, đặc biệt cho B. subtilisđược chia thành hai nhóm chính: Nhóm vector biểu hiện là cácplasmid tồn tại độc lập với hệ gen vật chủ; nhóm vector biểu hiệnmang các trình tự tương đồng với một vị trí đích trên genome của B.subtilis từ đó có thể dung hợp và tồn tại cùng với genome của B.subtilis thông qua cơ chế tái tổ hợp tương đồng.1.3. TINH SẠCH ENZYME BẰNG HỆ 2 PHA NƢỚC Hệ hai pha nước (ATPS) được tạo thành nhờ sự kết hợp giữa haipolymer hoặc giữa polymer với một muối vô cơ. 2 Chương 2 ĐỐI TƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU2.1. ĐỐI TƢỢNG NGHIÊN CỨU Các chủng Bacillus subtilis tự nhiên C10 và N05 do Bộ môn Côngnghệ sinh học, Khoa Sinh học, Trường Đại học Khoa học, Đại họcHuế cung cấp. Giống chuẩn B. subtilis BD170 (ATCC® 33608™) doGS. Seung-Moon Park (Đại học ...