Ứng dụng kỹ thuật Flow Cytometry khảo sát tần suất xuất hiện kháng thể đồng loài kháng hồng cầu ở bệnh nhân truyền máu nhiều lần tại Viện Huyết học - Truyền máu Trung ương

Ứng dụng kỹ thuật flow cytometry khảo sát tần suất xuất hiện kháng thể đồng loài kháng hồng cầu ở bệnh nhân truyền máu nhiều lần tại Viện Huyết học - Truyền máu Trung ương. Mời các bạn cùng tham khảo nội dung chi tiết của tài liệu.
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Ứng dụng kỹ thuật Flow Cytometry khảo sát tần suất xuất hiện kháng thể đồng loài kháng hồng cầu ở bệnh nhân truyền máu nhiều lần tại Viện Huyết học - Truyền máu Trung ươngTẠP CHÍ Y - DƯỢC HỌC QUÂN SỰ SỐ 2-2013ỨNG DỤNG KỸ THUẬT FLOW CYTOMETRY KHẢO SÁTTẦN SUẤT XUẤT HIỆN KHÁNG THỂ ĐỒNG LOÀI KHÁNGHỒNG CẦU Ở BỆNH NHÂN TRUYỀN MÁU NHIỀU LẦNTẠI VIỆN HUYẾT HỌC - TRUYỀN MÁU TRUNG ƢƠNGLê Xuân Hải* và CSTÓM TẮTLần đầu tiên ở Việt Nam chúng tôi đã ứng dụng thành công kỹ thuật phân tích Flow Cytometryđơn màu để phát hiện kháng thể bất thường kháng hồng cầu. Khảo sát 261 bệnh nhân (BN) đượctruyền máu nhiều lần tại Viện Huyết học - Truyền máu Trung ương, chúng tôi thấy tỷ lệ bắt gặpkháng thể đồng loại kháng hồng cầu là 42.15%. 100% BN được truyền máu trên 10 lần có kháng thểbất thường kháng hồng cầu. Tỷ lệ bắt gặp kháng thể đồng loài chống hồng cầu ở BN nữ cao hơnnhiều so với BN nam và tỷ lệ thuận với tuổi và số lần nhận máu.* Từ khóa: Kỹ thuật Flow Cytometry; Kháng thể đồng loài; Truyền máu nhiều lần.APPLYING FLOW CYTOMETRY TO STUDY FREQUENCY OFAPPEARANCE OF ALLOANTIBODY AGAINST RED BLOOD INMULTIPLY TRANSFUSION PATIENTS AT NATIONAL INSTITUTEOF HEMATOLOGY AND BLOOD TRANSFUSIONSummaryIt is the first time in Vietnam, an analysis technique based on flow cytometry has been appliedsuccessfully in dectecting alloantibodies against red blood cell in multiple transfusion patients. Studyon 261 patients with multiple transfusions, we discovered that 42.15% of the objects had developedalloantibodies. Alloantibodies were detected in 100% of patients who have received transfusion morethan 10 times. The incidence of alloantibodies detected in women patients was higher than that inmen and closely related with age and times of transfusion.* Key words: Flow Cytometry technique; Alloantibodies; Multiple transfusions.ĐẶT VẤN ĐỀMáu rất quan trọng và cần thiết cho sựsống, nhờ có truyền máu nhiều người bệnhđã được cứu sống, nhưng truyền máu cũngcó thể gây ra tai biến nghiêm trọng nếu khôngtuân thủ nguyên tắc về an toàn truyềnmáu. Phát hiện nhóm máu hệ ABO, Rh vàcác hệ nhóm máu hồng cầu khác đã giúpviệc truyền máu hiệu quả và an toàn hơn.* Viện Huyết học - Truyền máu Trung ươngChịu trách nhiệm nội dung khoa học: TS. Nguyễn Đặng DũngTS. Phạm Văn Trân19TẠP CHÍ Y - DƯỢC HỌC QUÂN SỰ SỐ 2-2013Tại các nước tiên tiến, an toàn truyền máuđược thực hiện một cách triệt để hòa hợpvề nhóm máu hệ ABO, Rh và một số nhómmáu khác phải thực hiện sàng lọc khángthể bất thường. Tại Việt Nam, thực hiện antoàn truyền máu về miễn dịch còn hạn chế.Chúng ta mới chỉ định nhóm máu hệ ABO,làm phản ứng chéo ở điều kiện nhiệt độphòng thí nghiệm mà chưa có điều kiệnquan tâm nghiên cứu tới các nhóm máukhác ngoài ABO. Do vậy, ở BN được truyềnmáu nhiều lần việc sinh kháng thể bấtthường là khó tránh khỏi. Về bản chất, cáckháng thể gọi là “bất thường” là các khángthể miễn dịch đồng loài (chủ yếu là khángthể lớp IgG) chống lại các kháng nguyên lạcó trên bề mặt hồng cầu, bạch cầu (hệHLA) hoặc tiểu cầu (hệ HPA) của ngườicho. Có rất nhiều cách để phát hiện cáckháng thể này với mức độ chính xác, độnhạy khác nhau. Các kỹ thuật này cũngkhác nhau về độ phức tạp. Hiện nay, pháthiện kháng thể bất thường ở người truyềnmáu nhiều lần mới chỉ chủ yếu tập trungvào kháng thể đồng loài kháng hồng cầu.Phương pháp truyền thống hay sử dụng làphương pháp huyết thanh học dựa trênnguyên tắc phản ứng ngưng kết Coombsgián tiếp. Phương pháp này tuy độ nhạykhông cao, nhưng có ưu điểm là đơn giản,giá rẻ nên dễ ứng dụng triển khai trêndiện rộng. Ngày nay, với sự phổ biến củaphương pháp flow cytometry dựa trênnguyên lý phân tích tự động phản ứng đặchiệu kháng nguyên-kháng thể có đánh dấuhuỳnh quang, các nghiên cứu phát hiệnkháng thể bất thường có thể thực hiện vớiđộ nhạy cao hơn các phương pháp truyềnthống. Flow cytometry được ứng dụng trongxác định các kháng thể đồng loài khángHLA [3], tiểu cầu [4] và hồng cầu [5, 6]. Việcphát hiện kháng thể bất thường ở BN đượctruyền máu nhiều lần rất cần thiết để đảmbảo an toàn truyền máu về mặt miễn dịch,qua đó, có thể chọn đơn vị máu phù hợp,nhằm nâng cao hiệu quả của những lầntruyền máu. Trong nghiên cứu này, chúngtôi ứng dụng kỹ thuật Flow Cytometry để:Phát hiện tỷ lệ mang kháng thể miễn dịchđồng loài kháng hồng cầu ở BN đượctruyền máu nhiều lần (≥ 2 lần).ĐỐI TƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁPNGHIÊN CỨU1. Đối tượng nghiên cứu.261 BN được truyền máu nhiều lần tạiViện Huyết học - Truyền máu Trung ương,trong đó, 175 BN được chẩn đoán thalassaemia,49 BN suy tủy xương, 37 BN xuất huyết giảmtiểu cầu. Các BN này thỏa mãn những tiêuchuẩn sau:- Được chẩn đoán là thalassaemia, suytủy xương hoặc xuất huyết giảm tiểu cầutheo tiêu chuẩn chẩn đoán của Viện Huyếthọc - Truyền máu Trung ương.- Truyền máu nhiều lần (≥ 2 lần).- Lấy mẫu máu cho nghiên cứu sau lầntruyền máu cuối cùng tối thiểu 2 tuần.2. Phương pháp nghiên cứu.* Thiết kế nghiên cứu: lấ ...