Xác định đột biến gen Kras trên bệnh nhân ung thư đại trực tràng tại Bệnh viện Bạch mai bằng kỹ thuật Stripassay

Mục tiêu nghiên cứu của bài viết nhằm xác định tình trạng đột biến gen KRAS trên bệnh nhân (BN) ung thư đại trực tràng (UTĐTT) tại Trung tâm Y học Hạt nhân và Ung bướu, Bệnh viện Bạch Mai. Mời các bạn cùng tham khảo tài liệu.
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Xác định đột biến gen Kras trên bệnh nhân ung thư đại trực tràng tại Bệnh viện Bạch mai bằng kỹ thuật StripassayT¹p chÝ y - d−îc häc qu©n sù sè 8-2016XÁC ĐỊNH ĐỘT BIẾN GEN KRAS TRÊN BỆNH NHÂN UNG THƯĐẠI TRỰC TRÀNG TẠI BỆNH VIỆN BẠCH MAIBẰNG KỸ THUẬT STRIPASSAYMai Trọng Khoa*; Phạm Cẩm Phương*; Nguyễn Tiến Lung*TÓM TẮTMục tiêu: xác định tình trạng đột biến gen KRAS trên bệnh nhân (BN) ung thư đại trực tràng(UTĐTT) tại Trung tâm Y học Hạt nhân và Ung bướu, Bệnh viện Bạch Mai. Phương pháp: 92mẫu bệnh phẩm (mẫu mô sau phẫu thuật hoặc sinh thiết), chẩn đoán xác định bằng giải phẫubệnh là UTĐTT được xác định đột biến gen KRAS bằng kít KRAS 12/13/61 StripAssay®(ViennaLab). Kết quả: tỷ lệ đột biến gen KRAS là 37,0% (34/92 bệnh phẩm), tập trung chủ yếuở codon 12 (chiếm 65,7% tổng số đột biến). Kết luận: kết quả phân tích đột biến gen KRAS trênBN UTĐTT tại Bệnh viện Bạch Mai tương tự nhiều nghiên cứu khác tại Việt Nam và trên thế giới.* Từ khóa: Ung thư đại trực tràng; Đột biến gen KRAS; KRAS 12/13/61 StripAssay®.The Results of KRAS Mutation Testing in Colorectal Cancer atBachmai HospitalSummaryObjectives: To determine the KRAS mutation status in colorectal cancer at Nuclear Medicineand Oncology Center, Bachmai Hospital Hospital. Methods: 92 formalin-fixed, paraffinembedded specimens (needle biopsy and surgical specimens) of colorectal cancer patientswere tested for KRAS mutations using KRAS 12/13/61 StripAssay® (ViennaLab). Results: 34 of92 specimens had KRAS mutations (37.0%), mutations in codon 12 were most common(65.7%). Conclusion: The results of KRAS mutations determination in colorectal cancer inBachmai Hospital were similar to other studies in Vietnam and over the world.* Key words: Colorectal cancer; KRAS mutation; KRAS 12/13/61 StripAssay®.ĐẶT VẤN ĐỀUng thư đại trực tràng là một trongnhững loại ung thư có tỷ lệ mắc và tửvong cao nhất. Tại Việt Nam, tỷ lệ mắcchuẩn theo tuổi là 10,1/100.000 dân,đứng thứ sáu trong các bệnh ung thư(theo GLOBOCAN 2012). Các phươngpháp điều trị UTĐTT bao gồm phẫu thuật,xạ trị, hóa trị và điều trị đích, trong đó cócác kháng thể đơn dòng kháng thụ thểyếu tố tăng trưởng biểu bì (epidermalgrowth factor receptor - EGFR). Các nghiêncứu đã chứng minh kháng thể đơn dòngkháng EGFR (cetuximab, panitumumab…)có hiệu quả hơn ở BN UTĐTT không cóđột biến KRAS so với BN mang đột biếnKRAS. Vì vậy, xét nghiệm đột biến genKRAS có vai trò quan trọng trong chỉ địnhkháng thể đơn dòng như cetuximab,panitumumab… cho BN UTĐTT [1, 3].* Bệnh viện Bạch MaiNgười phản hồi (Corresponding): Phạm Cẩm Phương (camphuongmd@yahoo.com)Ngày nhận bài: 04/07/2016; Ngày phản biện đánh giá bài báo: 08/09/2016Ngày bài báo được đăng: 19/09/201680T¹p chÝ y - d−îc häc qu©n sù sè 8-2016Hiện nay có nhiều phương pháp phátbiến gen KRAS tại Đơn vị Gen Trị liệu,hiện đột biến gen KRAS được sử dụngTrung tâm Y học Hạt nhân và Ung bướu,như giải trình tự gen, real-time PCR, PCRBệnh viện Bạch Mai.đặc hiệu alen…. Các phương pháp nàykhác nhau về độ nhạy, độ đặc hiệu, sốlượng đột biến có thể phát hiện… [3]. Từtháng 11 - 2014, Đơn vị Gen Trị liệu,Trung tâm Y học Hạt nhân và Ung bướu,Bệnh viện Bạch Mai đã áp dụng xétnghiệm đột biến gen KRAS bằng kỹ thuậtPCR đặc hiệu alen kết hợp lai đầu dòphântửtheokítKRAS12/13/61StripAssay® (ViennaLab, Áo). Bộ kít nàycó khả năng phát hiện hơn 98% các loạiđột biến của gen KRAS, bao gồm 13 độtbiến phổ biến trên các codon 12, 13 và 61với độ nhạy cao (có khả năng xét nghiệmchính xác khi tỷ lệ tế bào đột biến trongmẫu xét nghiệm dưới 1%) [3]. Nghiên cứunày thực hiện nhằm: Đánh giá tỷ lệ độtbiến gen KRAS trên BN UTĐTT tại Bệnh2. Phương pháp nghiên cứu.Nghiên cứu mô tả tiến cứu- Thu thập thông tin về đặc điểm lâmsàng, cận lâm sàng, giai đoạn bệnh củaBN theo một mẫu thu thập thông tin thốngnhất.- Quy trình xét nghiệm: gồm 4 giaiđoạn chính+ Tách ADN từ mô cố định formalin vùi paraffin.+ Khuếch đại đoạn gen quan tâm bằngphản ứng PCR.+ Lai sản phẩm khuếch đại với đầu dòđặc hiệu phân bố trên Teststrip.+ Phân tích kết quả.* Xử lý số liệu: sử dụng phần mềmSPSS 16.0.viện Bạch Mai, giúp bác sỹ lâm sàng cóthể đưa ra phác đồ điều trị phù hợp vớitừng trường hợp cụ thể.ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁPNGHIÊN CỨU1. Đối tượng nghiên cứu.92 BN UTĐTT được chẩn đoán vàđiều trị tại Bệnh viện Bạch Mai từ tháng11 - 2014 đến 5 - 2016. Các mẫu bệnhphẩm (mẫu mô sau phẫu thuật hoặc sinhthiết) được chẩn đoán xác định bằng giảiphẫu bệnh tại Trung tâm Giải phẫu bệnhvà Tế bào học, sau đó xét nghiệm độtKẾT QUẢ NGHIÊN CỨU* Tỷ lệ phát hiện đột biến gen KRAS:34/92 BN (37,0%) UTĐTT phát hiện cóđột biến gen KRAS, không phát hiện độtbiến 58 BN (63%). Đặc biệt, 1 BN mang2 đột biến gen KRAS (codon 12 vàcodon 13).* Vị trí đột biến gen KRAS:Trong tổng số các đột biến được pháthiện ở 34 BN, đột biến trên codon 12chiếm ưu thế với 23 BN (65,7%); codon13: 10 BN (28,6%), chỉ có 2 BN (5,7%) ...