Xác định thời gian khai thác huyết thanh ngựa chửa thích hợp nhờ phương pháp định lượng Hormone Eia

Đề tài tiến hành định lượng hàm lượng progesterone trong máu ngựa cái ở các ngày 7, 14, 21sau phối giống và và ngựa cái ở các ngày mang thai thứ 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 110, 120. Hàm lưng progesterone ở ngựa sau phối giống tăng và đạt giá trị cao ở 7 ngày sau phối giống (2,64  0,17ng/ml ở nhóm II đến 2,70  0,26 ng/ml ở nhóm I) và tăng nhưng không đáng kể cho tới ngày thứ 14 sau phối giống (2,66  0,29 ng/ml ở nhóm II và 2,73  0,24 ng/ml ở nhóm I).
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Xác định thời gian khai thác huyết thanh ngựa chửa thích hợp nhờ phương pháp định lượng Hormone EiaNguyễn Mạnh HàTạp chí KHOA HỌC & CÔNG NGHỆ62(13): 106 - 110XÁC ĐỊNH THỜI GIAN KHAI THÁC HUYẾT THANH NGỰA CHỬATHÍCH HỢP NHỜ PHƢƠNG PHÁP ĐỊNH LƢỢNG HORMONE EIANguyễn Mạnh HàTrường Đại học Nông Lâm – ĐH Thái NguyênTÓM TẮTĐề tài tiến hành định lượng hàm lượng progesterone trong máu ngựa cái ở các ngày 7, 14, 21sauphối giống và và ngựa cái ở các ngày mang thai thứ 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 110, 120.Hàm lượng progesterone ở ngựa sau phối giống tăng và đạt giá trị cao ở 7 ngày sau phối giống(2,64  0,17ng/ml ở nhóm II đến 2,70  0,26 ng/ml ở nhóm I) và tăng nhưng không đáng kể chotới ngày thứ 14 sau phối giống (2,66  0,29 ng/ml ở nhóm II và 2,73  0,24 ng/ml ở nhóm I). Hàmlượng progesterone đạt giá trị 4,05  0,23ng/ml ở ngày chửa thứ 40, tăng nhanh đến ngày chửathứ 60 đạt giá trị 7,11  0,32ng/ml. Hàm lượng progesterone tiếp tục tăng nhưng không đáng kểcho tới ngày chửa thứ 90, (7,42  0,19ng/ml) sau đó giảm dần và đạt giá trị 4,28  0,16ng/ml ở ngàychửa thứ 120.Từ khóa: Nồng độ, progesterone, ngựa cái, huyết thanh, phốiMỞ ĐẦUKích dục tố huyết thanh ngựa chửa (PregnantMare Serum Gonadotropin viết tắt là PMSG)là chế phẩm sinh học được chiết xuất từ huyếtthanh ngựa trong thời gian ngựa mang thai.Trong chăn nuôi, PMSG được sử dụng chủyếu để kích thích nhằm nâng cao khả năngsinh sản đối với gia súc cái.Để sản xuất PMSG, một trong những yêu cầuđầu tiên là phải khai thác được huyết thanhngựa chửa có hoạt tính hormone cao, nghĩa làphải xác định được hoạt tính hormone cótrong huyết thanh và thời gian khai thác phùhợp. Phương pháp xác định mức độ hoạt tínhhormone có trong huyết thanh ngựa chửa hiệnnay được sử dụng một cách phổ biến là thửphản ứng và kiểm tra mức độ sưng tử cungcủa chuột nhắt trắng. Phương pháp này chođộ chính xác tương đối cao nhưng mất nhiềuthời gian, kinh phí và mức độ chính xác phụthuộc nhiều vào kinh nghiệm của người làmthí nghiệm.Để khắc phục những hạn chế của phươngpháp sinh học đồng thời có thêm cơ sở khoahọc giúp cho việc xác định thời gian hormonetrong huyết thanh ngựa chửa có hoạt tính cao,đề tài tiến hành định lượng progesterone cótrong huyết thanh ngựa sau phối giống vàngựa chửa bằng kỹ thuật EIA-Progesterone.Nguyên tắc của phương pháp định lượngđược tiến hành trong đề tài này là xác địnhgián tiếp mức hoạt tính của PMSG có tronghuyết thanh ngựa sau phối giống và trong thờigian mang thai.Trên cơ sở sự biến đổi về nồng độ củahormone progesterone ở ngựa sau phối giốngvà ngựa chửa là cơ sở xác định thời điểm khaithác huyết thanh phù hợp để sản xuất PMSG.VẬT LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁPNGHIÊN CỨUVật liệu nghiên cứu- Huyết thanh ngựa cái ở các ngày thứ 7, 14và 21 sau phối giống: 12 con chia thành 2nhóm: nhóm I có 9 con, nhóm II có 3 con.- Huyết thanh ngựa chửa ở các ngày 40, 50,60, 70, 80, 90, 100 và 110 (8 con).- Các hóa chất phục vụ kỹ thuật định lượngEIA-ProgesteronePhương pháp nghiên cứu- Phương pháp lấy mẫu huyết thanh: Huyếtthanh được lấy từ máu ở tĩnh mạch cổ củangựa. Máu được lấy vào buổi sáng sớm, mỗilần lấy khoảng 10ml/mẫu/con. Sau khi lấyđược máu, để ống nghiệm nằm im, hơinghiêng theo phương thẳng đứng, đợi chophần máu đông chìm xuống dưới, phần huyếtthanh màu vàng nổi lên trên thì chắt huyếtthanh ra một ống nghiệm khác. Huyết thanhlấy được đem phân tích ngay, nếu chưa phânTel: 0912 004 814, E.mail: anhnguyenha@yahoo.comSố hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên106http://www.Lrc-tnu.edu.vnNguyễn Mạnh HàTạp chí KHOA HỌC & CÔNG NGHỆtích ngay được thì phải bảo quản ở nhiệt độlạnh sâu –200C.- Phương pháp định lượng hormone: Sửdụng phương pháp định lượng miễn dịchenzym ELISA với kỹ thuật EIA-Progesterone[2] phân tích hàm lượng progesterone trongmáu ngựa.Nồng độ progesteron được đánh giá theo đơnvị quốc tế ng/ml, theo chương trình phầnmềm đã được cài đặt sẵn trong máy tính.Các chỉ tiêu nghiên cứu:+. Hàm lượng progesterone trong huyết thanhngựa ở các ngày 7, 14, 21 sau phối giống(ng/ml)+. Hàm lượng progesterone trong huyết thanhngựa ở các ngày chửa 40, 50, 60, 70, 80, 90,100, 110, 120 (ng/ml)- Phương pháp xử lý số liệu: Số liệu thu đượcsử lý trên máy vi tính theo phương phápthống kê sinh vật học của Nguyễn Văn Thiệnvà cs (2002) [1] và trên phần mềm máy tính.KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬNHàm lượng progesterone ở ngựa sau phốigiốngPhân tích hàm lượng progesterone của 12ngựa sau phối giống chúng tôi thu được kếtquả ở bảng 1 và đồ thị hình 1.Kết quả ở bảng 1 và đồ thị hình 1 cho thấy:- Hàm lượng progesterone ở ngựa sau phốigiống tăng và đạt giá trị cao ở 7 ngày sau phốigiống (2,64  0,17ng/ml ở nhóm II đến 2,70 0,26 ng/ml ở nhóm I). Như vậy ở tất cả ngựatheo dõi trong thí nghiệm đều đã có hoạt độngcủa thể vàng sau rụng trứng.- Hàm lượng progesterone trong máu tăngnhưng không đáng kể ở ngựa cho tới ngày thứ62(13): 106 - 11014 sau p ...