Xây dựng quy trình chiết xuất SAC từ tỏi đen

Nội dung bài viết trình bày về việc nghiên cứu xây dựng quy trình chiết xuất cao tỏi đen bằng phương pháp chiết siêu ở âm tần số 60 MHz, với dung môi là nước (tỷ lệ dược liệu/dung môi 1:10); chiết 02 lần trong thời gian 60 phút ở nhiệt độ 600C, cô cao ở nhiệt độ 600C dưới áp suất giảm. Hiệu suất chiết SAC đạt 87,36%.
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Xây dựng quy trình chiết xuất SAC từ tỏi đenTẠP CHÍ Y - DƢỢC HỌC QUÂN SỰ SỐ 1-2014XÂY DỰNG QUY TRÌNH CHIẾT XUẤT SAC TỪ TỎI ĐENVũ Đình Tiến*; Vũ Bình Dương*; Nguyễn Trọng Điệp*Nguyễn Văn Bạch*; Phan Đình Châu**TÓM TẮTNghiên cứu đã xây dựng được quy trình chiết xuất cao tỏi đen bằng phương pháp chiết siêu ởâm tần số 60 MHz, với dung môi là nước (tỷ lệ dược liệu/dung môi 1:10); chiết 02 lần trong thời gian60 phút ở nhiệt độ 600C, cô cao ở nhiệt độ 600C dưới áp suất giảm. Hiệu suất chiết SAC đạt 87,36%.* Từ khóa: Tỏi đen; Chiết xuất, SAC.PROCESS OF EXTRACTION OF SAC FROM BLACK GARLICSUMMARYUltrasound method for extraction of SAC from black garlic was established. Conditions ofultrasound extraction: frequency at 60 MHz, using water as the extraction solvent with ratio of 1:10(herbal/solvent); 02 times of extration, 60 min per time, temperature at 60 0C, remove solvent at 600Cher high temperature under low pressure. Efficiency of SAC extraction reached 87.36%.* Key words: Black garlic; Extraction; SAC.ĐẶT VẤN ĐỀTỏi đã được sử dụng phổ biến trên thếgiới cũng như ở Việt Nam để làm gia vịtrong thực phẩm. Ngoài ra, tỏi còn có tácdụng quí như: tăng cường miễn dịch, ứcchế tế bào ung thư, phòng chống cúm,giảm mỡ máu... [1]. Tỏi khi được lên mentrong điều kiện thích hợp sẽ tạo thành tỏiđen. Sản phẩm tỏi đen có vị ngọt, khôngcay, không mùi hôi [8]. Tỏi đen có một sốhoạt chất tương tự tỏi thường nhưng hàmlượng cao hơn: flavonoid, polyphenol, SAC...cao hơn [2, 4]. Tỏi đen có tác dụng có tácdụng chống oxy hóa, phòng chống ung thư,kích thích miễn dịch tốt hơn so với tỏithường... [7, 9]. Trong những năm gần đây,Học viện Quân y đã nghiên cứu thành côngquy trình lên men tỏi thường ở Việt Namthành tỏi đen. Để bào chế sản phẩm thuốc,thực phẩm chức năng từ tỏi đen có hiệuquả cao cần phải xây dựng được quy trìnhchiết xuất, điều chế cao tỏi đen với hàmlượng hoạt chất cao. Xuất phát từ yêu cầuthực tế chúng tôi tiến hành nghiên cứu xâydựng chiết xuất SAC từ tỏi đen.NGUYÊN LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁPNGHIÊN CỨU1. Nguyên vật liệu nghiên cứu.* Nguyên liệu:Tỏi đen do Trung tâm Nghiên cứu ngdông Sản xuất thuốc, Học viện Quân y cung cấp.* Học viện Quân y** Viện Dinh DưỡngNgười phản hồi (Corresponding): Nguyễn Trọng Điệp (nguyentrongdiep_qy@yahoo.com.vn)Ngày nhận bài: 14/10/2013; Ngày phản biện đánh giá bài báo: 18/12/2013Ngày bài báo được đăng: 19/12/201357TẠP CHÍ Y - DƢỢC HỌC QUÂN SỰ SỐ 1-2014* Hoá chất:- S-allyl -L- cystein chuẩn (Sigma).- MeOH, ACN đạt tiêu chuẩn HPLC(Merck).- Hoá chất: EtOH đạt tiêu chuẩn tinhkhiết phân tích. Lactose đạt tiêu chuẩnDĐVN IV.chiết xuất; nhiệt độ chiết xuất và thời gianchiết xuất.- Chỉ tiêu đánh giá: lượng S-allyl-L-cystein(SAC) chiết được.* Định lượng SAC bằng HPLC:- Xử lý mẫu: cân chính xác 1,2 g bột caokhô tỏi đen, thêm 15 ml nước cất, lắc siêu* Dụng cụ - thiết bị:âm trong 30 phút, ly tâm với tốc độ 3.500- Cân phân tích Sartorius (độ chính xácvòng/phút trong 5 phút. Gạn lấy dịch ly tâm.0,1 mg).- Máy ly tâm lạnh Universal 320 (Hettich,Đức).- Hệ thống cất quay chân không Ellye(Nhật).- Máy chiết dưới tác động của siêu âmSM30- CEP (Hàn Quốc).- Thiết bị chiết xuất cô đặc 200 lít (TrungQuốc).- Thiết bị phun sấy LPG5 (High speedcentrifugal spraying dryer) (Trung Quốc).- Hệ thống sắc ký lỏng hiệu năng caoWaters - 2695D (Mỹ).Bã được tiếp tục chiết như trên thêm 2 lầnnữa. Tập trung các dịch vào bình định mức50 ml, thêm nước cất vừa đủ đến vạch, lắcđều. Lọc qua màng 0,45 µm được dungdịch tiêm sắc ký [3].- Điều kiện sắc ký: cột Luna PhenomenexC18 (5 m, 250 mm x 4,6 mm). Pha động:methanol - axít đệm phosphat 0,02 M pH = 3(12:88). Đệm phosphat 0,02 M pH = 3:dungdịch kali dihyrophosphat 0,02 M - triethylamin(100:0,3), điều chỉnh đến pH = 3,0  0,2 bằngaxít phosphoric đặc. Detector UV:205 nm.- Một số dụng cụ, thiết bị nghiên cứukhác,...Tốc độ dòng: 0,7 ml/phút. Thể tích tiêm: 20 l.Nghiên cứu được thực hiện tại Trungtâm Đào tạo - Nghiên cứu Dược và Trungtâm Nghiên cứu Ứng dụng Sản xuất thuốc,Học viện Quân y.KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀBÀN LUẬN1. Kết quả khảo sát lựa chọn phươngpháp chiết xuất.2. Phương pháp nghiên cứu.Tiến hành chiết xuất với dung môi là nước* Xây dựng quy trình chiết xuất:theo phương pháp chiết nóng và chiết dưới- Khảo sát lựa chọn phương pháp chiếtxuất: chiết nóng và chiết siêu âm gia nhiệt.- Khảo sát các yếu tố ảnh hưởng: loạitác động của siêu âm gia nhiệt trên 03 mẻnguyên liệu theo phương pháp chiết siêuâm.dung môi và tỷ lệ dung môi/dược liệu; số lần59TẠP CHÍ Y - DƢỢC HỌC QUÂN SỰ SỐ 1-2014Bảng 1: Kết quả chiết xuất tỏi đen bằng phương pháp chiết nóng và chiết siêu âm (n = 3).PHƢƠNG PHÁPCHIẾTTỶ LỆ DUNGMÔI/DƢỢCLIỆU (l/kg)Chiết nóng với nướcChiết siêu âm vớinướcNHIỆT ĐỘCHIẾTTHỜI GIANCHIẾT (giê)010/160 C010/1KHỐI LƢỢNG SAC(mg)/DỊCH CHIẾTHIỆU SUẤTCHIẾT(%)1123,50 ± 9,1447,52141,96 ± 11,64 ...