Xây dựng quy trình khảo sát đột biến gen ABCD1 trong bệnh loạn dưỡng chất trắng thượng thận (Adrenoleukodystrophy)

Bệnh loạn dưỡng chất trắng thượng thận (LDCTTT) thuộc nhóm bệnh di truyền thoái hóa thần kinh, với tần suât mắc bệnh trong khoảng 1/20000 đến 1/50000 trẻ. Nguyên nhân bệnh thường do bởi những đột biến trên gen ABCD1, nằm trên nhiễm sắc thể X mã hóa cho protein ALD, một protein vận chuyển trên màng peroxisome.
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Xây dựng quy trình khảo sát đột biến gen ABCD1 trong bệnh loạn dưỡng chất trắng thượng thận (Adrenoleukodystrophy)Nghiên cứu Y học Y Học TP. Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 20 * Số 1 * 2016 XÂY DỰNG QUY TRÌNH KHẢO SÁT ĐỘT BIẾN GEN ABCD1 TRONG BỆNH LOẠN DƯỠNG CHẤT TRẮNG THƯỢNG THẬN (ADRENOLEUKODYSTROPHY) Nguyễn Thế Vinh*, Hoàng Anh Vũ*TÓM TẮT Mở đầu: Bệnh loạn dưỡng chất trắng thượng thận (LDCTTT) thuộc nhóm bệnh di truyền thoái hóa thầnkinh, với tần suât mắc bệnh trong khoảng 1/20000 đến 1/50000 trẻ. Nguyên nhân bệnh thường do bởi những độtbiến trên gen ABCD1, nằm trên nhiễm sắc thể X mã hóa cho protein ALD, một protein vận chuyển trên màngperoxisome. Những đột biến này gây ra sự tích tụ acid béo bão hòa chuỗi rất dài ảnh hưởng đến myelin trong hệthần kinh trung ương, vỏ thượng thận, tế bào Leydig tinh hoàn. Sử dụng công cụ sinh học phân tử trong việcchẩn đoán bệnh LDCTTT đưa ra những đánh giá chính xác, nhanh chóng giúp bệnh nhân nhận được chế độ điềutrị thích hợp, làm chậm quá trình bệnh và kéo dài thời gian sống. Mục tiêu: Xây dựng được quy trình ứng dụng kỹ thuật giải trình tự khảo sát đột biến trên gen ABCD1. Đối tượng và phương pháp: Tiến hành trên một bệnh nhân được chẩn đoán lâm sàng mắc LDCTTT, táchchiết DNA từ máu bệnh nhân và thực hiện kỹ thuật giải trình tự gen, phân tích đột biến gen ABCD1. Kết quả: Thiết kế thành công 5 cặp mồi và quy trình PCR khuếch đại 10 exon gen ABCD1. Phát hiện độtbiến dịch khung p.Q472fsX554. Kết luận: Nghiên cứu đã hoàn thiện quy trình và ứng dụng thành công kỹ thuật giải trình tự trong chẩnđoán đột biến gen ABCD1. Từ khóa: loạn dưỡng chất trắng thượng thận, gen ABCD1, kỹ thuật giải trình tự.ABSTRACTDEVELOP A PROTOCOL FOR SCREENING ABCD1 MUTATIONS IN ADRENOLEUKODYSTROPHY Nguyen The Vinh, Hoang Anh Vu * Y Hoc TP. Ho Chi Minh * Supplement of Vol. 20 - No 1 - 2016: 376 - 380 Background: Adrenoleukodystrophy is a genetic degenerative disorder of nervous system with an incidenceestimated between 1/20000 to 1/50000 children. The cause of disease come from the mutations on ABCD1 genelocated on X chromosome, that encodes for ALD protein which is transporter protein on peroxisome membrane.These mutations lead to the accumulation of very long chain fatty acid that affects the myelin in the centralnervous system, the adrenal cortex and the Leydig cells in the testes. Using biomolecular engineering inadrenoleukodystrophy prognosis gives results correctly and fast, so the patient would be treated appropriately anddisease process could be slowed down. Objective: Develop a sequencing protocol for ABCD1 mutations screening. Method: Sequence and screen for ABCD1 mutations using DNA from blood of OI patients diagnosedclinically. Results: Successfully designed 5 pairs of primer and PCR protocol that amplifies 10 exons of ABCD1.Identified a frameshift mutation p.Q472fsx55. * Trung tâm Y sinh học Phân tử, Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh Tác giả liên lạc: CN.Nguyễn Thế Vinh Điện thoại: 0935827668 Email: vinhnguyen29391@gmail.com376 Chuyên Đề Nội Khoa IY Học TP. Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 20 * Số 1 * 2016 Nghiên cứu Y học Conclusion: Our research has developed and applied successfully a sequencing protocol to identifymutations of ABCD1. Keywords: Adrenoleukodystrophy, ABCD1, sequencing.ĐẶT VẤN ĐỀ béo chuỗi rất dài không bị phân hủy và tích tụ trong cơ thể. Việc tích tụ này gây độc cho tuyến Bệnh loạn dưỡng chất trắng thượng thận thượng thận và myelin bao quanh các dây thần(LDCTTT), tên tiếng anh kinh ở khắp cơ thể. Nhiều nghiên cứu cho rằngAdrenoleukodystrophy, là một nhóm bệnh di sự tích tụ acid béo chuỗi rất dài dẫn đến sự khởitruyền thoái hóa thần kinh được mô tả lần đầu phát đáp ứng viêm ở não, dẫn đến sự phá hủyvào năm 1913 bởi Schilder(1). Tần suất mắc bệnh myelin, gây ra các triệu chứng của LDCTTT(5).LDCTTT trong khoảng 1/20000 đến 1/50000 Đột biến trên ABCD1 thường là những biếntrẻ(16). Bệnh ảnh hưởng đến tính ổn định của đổi nhỏ gây ra đột biến sai nghĩa, vô nghĩa, mấtmyelin trong não và dây thần k ...