Bài giảng Cập nhật những kĩ thuật mới trong chuyển gen động vật

Bài giảng Cập nhật những kĩ thuật mới trong chuyển gen động vật bao gồm những nội dung về protein tái tổ hợp, liệu pháp gen, động vật chuyển gen, các thành phần chuyển gen, các phương pháp chuyển gen, chiến lược chuyển gen,... Mời các bạn tham khảo.
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Bài giảng Cập nhật những kĩ thuật mới trong chuyển gen động vậtCập nhật những kĩ thuật mới trong chuyển gen động vật Th.s Nguyễn Thái Quỳnh Anh Đại học Khoa Học Tư Nhiên Tp HCM nguyenthaiquynhanh@gmail.comProtein tái tổ hợpHuman growth hormoneHuman insulinGranulocyte colony-stimulating factorFollicle-stimulating hormoneFactor VIIIInsulin-like growth factor 1 Liệu pháp genSCID (Severe CombinedImmunodeficiency) (bubble boy disease)Suy giaûm mieãn dòch do thieáu Adenosine desaminaseTaùch teá baøo T  nuoâi caáy in vitro  chuyeån gene laønh  tieâm caùc teá baøo naøy trôûlaïi maùu cuûa beänh nhaân  heä mieãn dòch taêng cöôøng, nhöng khoâng hoaøn toaøn beànvöõng  laëp laïi sau vaøi thaùng (1990) Động vật chuyển genTạo ra động vật với đặc điểm di truyền mong muốn: - Sản phẩm từ động vật - Tạo ra các động vật kháng bệnh ( kháng thể, vaccine) - “Bioreactor” sản xuất sinh dược phẩm - Mô hình động vật bệnh lý Tái thiết lập chương trìnhInduced pluripotent stem cells (iPS cells hoặc iPSCs)Tế bào gốc vạn năng được tạo ra từ tế bào trưởng thành CAÙC THAØNH PHAÀN CHUYỂN GENEVAÄT LIEÄU DI TRUYEÀN PHÖÔNG PHAÙP CHIEÁN LÖÔÏC CAÀN CHUYEÅN CHUYEÅN GENE CHUYEÅN GENE…1. Gene söûa chöõa hay 1. Vector virus Hai nhoùm chíeán löôïcthay theá chính : 2. Vector khoâng phaûi2. Gene gaây cheát laø virus - Ex vivo  in vivo3. Antisense nucleic 3. Phöông phaùp vaät - In vivoacid lyù : vi tieâm, suùng baén gene Teá baøo nhaän geneVaät lieäu di truyeàn caàn chuyeån: teá baøo chöachuyeån goàm : bieät hoùa nhö doøng teáGene caàn chuyeån + baøo taïo maùu, nguyeânPromoter maïnh + baøo sôïi, nguyeân baøoGene choïn loïc cô,..Lieân keát vôùi plasmidhay vector laø virusTẠO DÒNG PHÂN TỬ Figure 9.2Các phương pháp chuyển genHệ thống chuyển gen không sử dụng virus Phương pháp hóa chất Phương pháp vật lí Phương pháp vi tiêmHệ thống chuyển gen sử dụng virus Adenovirus Lentivirus RetrovirisHEÄ THOÁNG CHUYEÅN KHOÂNG DUØNG VIRUS  Ñoùng goùi beân ngoaøi  Nhaäp baøo  Thoaùt khoûi endosome  Ñi vaøo nhaân  Bieåu hieän LIPOPLEXLipoplex laø caùc tuùi nhoû hình thaønh töø 1 lôùp maøng ñôn lipid tích ñieändöông, ñöôøng kính 50-200 nm. Troän caùc liposome naøy vôùi dung dòchDNA  phöùc hôïp tích ñieän döông bao laáy DNA  phöùc hôïp keát hôïpvôùi beà maët teá baøo tích ñieän aâm vaø ñöôïc ñöa vaøo trongÖu ñieåm : - Tính beàn - Khaû naêng gaén DNA, RNA traàn raát cao, haàu nhö khoâng coù giôùi haïnkích thöôùc ñoaïn gene caàn chuyeån - Coù theå xaâm nhieãm moïi loaïi teá baøo - Khoâng coù tính khaùng nguyeân & caùc hoaït tính sinh hoïc khoâng mongmuoánNhöôïc ñieåm : Khoâng coù tính ñaëc hieäu teá baøo POLYPLEXPolyplex laø 1 phöùc hôïp phaân töûhai chöùc naêng duøng ñeå gaénDNA & chuyeån DNA vaøo teábaøo ñích thoâng qua söï gaén leânthuï theå & söï nhaäp baøo. Moätphaàn cuûa phöùc hôïp laø 1 nhoùmgaén DNA (nhö polylysine tíchñieän döông), phaàn kia laø 1ligand cuûa 1 thuï theå ñaëc hieäunaèm treân teá baøo ñíchÖu ñieåm : khaéc phuïc nhöôïcñieåm cuûa lipoplex vaø caùcvector virusCalcium Phosphate DEAE -Dextran LiposomeĐiện biến nạp Vi Tiêm Vi tiêm với DNA ngoại lai Tế bào chấtPipette giữ NhânSúng bắn genCHIEÁN LÖÔÏC CHUNG ÑEÅ TAÏO VECTOR VIRUS TRONG LIEÄU PHAÙP GENE VECTOR RETROVIRUS Öu ñieåm : (1) Hieäu quaû xaâm nhieãm teá baøo cao (2) Vector khoâng hoaøn chænh  khoâng coù khaû naêng laây lan (3) Gaén xen ñöôïc vaøo boä gene  bieåu hieän beàn vöõng ...