Bài giảng Thiết bị xét nghiệm sinh hóa

Bài giảng Thiết bị xét nghiệm sinh hóa trình bày về lịch sử thiết bị xét nghiệm sinh hóa, nguyên lý hoạt động, cấu tạo, quy tình làm việc và các loại máy sinh hóa. Mời bạn đọc cùng tham khảo.
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Bài giảng Thiết bị xét nghiệm sinh hóa THIẾT BỊ XÉT NGHIỆM SINH HÓA I.LỊCH SỬ: - Các thiết bị xét nghiệm sinh hóa là mộtdạng của máy quang phổ chuyên dùng cho ngành y, máy quang phổ được chế tạo từ những năm đầu thế kỷ 19 dựa trên cơ sở định luật hấp thụ Bouger Lambert Beer• - Định luận hấp thụ dược Bouger và Lambert đồng phát minh vào năm 1728, sau đó dược Lambert bổ xung năm 1800, theo đó nồng độ cúa một chất sẽ được tính toán dựa trên mật độ quang ( độ hấp thụ ) của chất đó với ánh sáng có bước sóng cho trướcII.NGUYÊN LÝ HOẠT ĐỘNG:1. Cấu tạo:• Caùc maùy phaân tích Sinh Hoùa ñeàu coù 3 thaønh phaàn chính laø:• Nguoàn saùng• Boä phaän taùn saéc (taïo tia ñôn saéc)• Boä phaän ghi ño quang ñieän• Nguoàn saùng laø caùc ñeøn chieáu saùng coù daûi soùng töông ñoái roäng tuyø theo böôùc soùng cuûa pheùp ño maø ngöôøi ta coù theå söû duïng caùc loaïi nguoàn khaùc nhau. Thí duï ngöôøi ta thöôøng duøng ñeøn halogen cho vuøng khaû kieán, ñeøn thuyû ngaân,v.v… cho vuøng töû ngoaïi.• Boä phaän taùn laø caùc laêng kính hoaëc caùch söû duïng ñeå taïo ra caùc tia coù böôùc soùng khaùc nhau. Ñoái vôùi maùy quang saéc boä phaän naøy thöôøng laø• Boä phaän ghi ño quang ñieän coù khaû naêng bieán aùnh saùng thaønh ñieän vaø khueách taùn leân (neáu caàn) vaø ñöôïc daãn qua ñoàng hoà baèng kim hoaëc hieän soá töø ñoù xaùc ñònh ñöôïc noàng ñoä thoâng qua caùc bieán ñoåi veà cöôøng ñoä (ñöôïc phaûn aûnh baèng caùc bieán ñoåi veà ñieän) döïa treân cô sôû xaùc ñònh söï haáp• 2.Phương pháp phân tích:• Ngöôøi ta coøn duøng phöông phaùp phoå haáp thuï ñeå phaân tích ñònh löôïng, töùc laø xaùc ñònh noàng ñoä caùc chaát.• Ñònh luaät Bouguer – Lambert – Beer khaù chính xaùc ñoái vôùi caùc noàng ñoä thaáp, do ñoù trong tröôøng hôïp dung dòch loaõng ta coù theå öùng duïng toát ñònh luaät ñeå xaùc ñònh noàng ñoä dung dòch.• Nhö ñaõ bieát maät ñoä quang D, tæ leä vôùi noàng ñoä C cuûa dung dòch theo bieåu thöùc: D = ε .I .c• Töø bieåu thöùc naøy ta coù theå tieán haønh ñònh löôïng dung dòch loaõng theo hai phöông phaùp sau:D = ε .I .c • Phöông phaùp ño tröïc tieáp: • Ñaàu tieân ta laäp phoå haáp thuï ñeå tìm max. Töø ñoù xaùc ñònh maät ñoä quang Dmax töông öùng : DM = M C • Vôùi M: giaù trò cuûa öùng vôùi böôùc soùng max • Suy ra: Phöông phaùp ño tröïc tieáp:Ñaàu tieân ta laäp phoå haáp thuï ñeå tìm max. Töø ñoù xaùc ñònh maät ñoä quang Dmax töông öùng• DM = ε Mlc• Vôùi M: giaù trò cuûa öùng vôùi böôùc soùng Dx = max CM ε Μ .• Giaù trò cuûa moãi chaát coù theå vieát ñöôïc baèng caùch tra baûng (giaù trò thì duøng thöôùc vi caáp ñeå ño) nhö vaäy ta tính ñöôïc C.• Phöông phaùp naøy ít ñöôïc duøng thieáu chính xaùc ño caùc chaát loûng phaûi ñöôïc chöùa trong cuvet neân xaûy ra caùc hieän töôïng phaûn xaï vaø haáp thuï treân thanh bình.• Phöông phaùp pha chuaån so saùnh:• Ñaàu tieân ta pha moät dung dòch chuaån cuøng chaát vôùi dung dòch caàn ño theo moät noàng ñoä Co naøo ñoù. Ño maät ñoä quang Do cuûa dung dòch chuaån naøy, ta coù:• Do = Co (1)Phöông phaùp pha chuaån so saùnh:• Ñaàu tieân ta pha moät dung dòch chuaån cuøng chaát vôùi dung dòch caàn ño theo moät noàng ñoä Co naøo ñoù. Ño maät ñoä quang Do cuûa dung dòch chuaån naøy, ta coù:• Do=εlco• Sau ñoù ño maät ñoä quang Dx cuûa dung dòch chöa bieát noàng ñoä noùi treân, goïi Cx laø noàng ñoä dung dòch naøy ta coù:• Dx=εlcx• Ñoái vôùi dung dòch ñaäm ñaëc:• Ñoái vôùi dung dòch ñaäm ñaëc thì ñònh luaät Bouguer – Lambert – Beer khoâng coøn chính xaùc nöõa, luùc ñoù D khoâng coøn tuyeán tính vôùi C nöõa (maëc daàu coá ñònh). Do ñoù ñeå xaùc ñònh noàng ñoä caùc dung dòch ñaäm ñaëc ta duøng caùc phöông phaùp sau:• Phöông phaùp pha loaõng:• Ta pha loaõng coù tính toaùn dung dòch naøy cho ñeán khi naøo noàng ñoä giaûm xuoáng vaøo trong khoaûng tuyeán tính cuûa haøm . Sau ñoù thöïc hieän pheùp ño gioáng nhö ñoái vôùi dung dòch pha loaõng sau khi xaùc ñònh ñöôïc noàng ñoä pha loaõng naøy ta tính toaùn ngöôïc laïi ñeå suy ra noàng ñoä ban ñaàu• Phöông phaùp laäp ñöôøng chuaån:• Ta pha dung dòch cuøng chaát vôùi dung dòch caàn ño thaønh nhieàu noàng ñoä chuaån ñaõ bieát töø thaáp ñeán cao: Co, C1, C2,…..Cn sao cho öôùc löôïng noàng ñoä Cx cuûa dung dòch chöa bieát naèm trong khoaûng caùc noàng ñoä naøy (töùc laø nhaém chöøng sao cho Co>C x). D .DnDxD3D2D1O Cx Cx C1 C2 C3 Cn C D .DnDxD3D2D1O Cx C1 C2 C3 Cn C• ...