Bảo quản tinh trùng người bằng Nito lỏng trong môi trường Glycerol, Geyc và Sperm Freeze

Bảo quản đông lạnh tế bào và mô là mộtnhánh của ngành sinh học nhiệt độ thấp, vớimục đích làm ngừng và bảo tồn được đời sốngtế bào trong suốt quá trình lưu giữ kéo dài trongtình trạng đóng băng ở nhiệt độ thấp. Nguyênlý cơ bản của bảo quản lạnh sâu là kiểm soátđược chuyển động của các phân tử trong cáctế bào và mô. Quá trình sống luôn đòi hỏinhững biến đổi sinh học, có liên quan đến sựchuyển động của các phân tử trong môi trườngnước. Khi nước ở trong và quanh tế bào chuyểnthành dạng nước...
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Bảo quản tinh trùng người bằng Nito lỏng trong môi trường Glycerol, Geyc và Sperm FreezeTCNCYH-2003 B¶o qu¶n tinh trïng ng−êi b»ng nit¬ láng trong m«i tr−êng glycerol, GEYC vµ Sperm freeze TrÞnh Sinh Tiªn, TrÞnh B×nh NguyÔn Ngäc Hïng vµ NguyÔn ThÞ B×nh §¹i häc Y Hµ Néi Sö dông ba lo¹i m«i tr−êng glycerol, GEYC vµ Sperm freeze ®Ó b¶o qu¶n tinh trïng ng−êi trongnit¬ láng (-1960C) cho kÕt qu¶: ChÊt l−îng tinh trïng sau b¶o qu¶n b»ng m«i tr−êng GEYC t−¬ng®−¬ng víi m«i tr−êng Sperm freeze vµ cao h¬n cã ý nghÜa thèng kª so víi b¶o qu¶n ë m«i tr−êngglycerol ®¬n thuÇn (p < 0,01); B¶o qu¶n tinh trïng ng−êi b»ng l¹nh s©u dïng m«i tr−êng GEYC vµSperm freeze cã hiÖu qu¶ víi CSF ≥ 50%. (Tõ viÕt t¾t: GEYC: Glycerol – egg yolk – citrat; CSF: Cryosurvival factor; TT: Tinh trïng) I. §Æt vÊn ®Ò tr−êng nµo phï hîp? §Ó gãp phÇn tr¶ lêi c©u hái nµy, chóng t«i tiÕn hµnh “Nghiªn cøu ¸p B¶o qu¶n ®«ng l¹nh tÕ bµo vµ m« lµ mét dông quy tr×nh b¶o qu¶n tinh trïng ng−êi b»ngnh¸nh cña ngµnh sinh häc nhiÖt ®é thÊp, víi l¹nh s©u trong m«i tr−êng glycerol, GEYC vµmôc ®Ých lµm ngõng vµ b¶o tån ®−îc ®êi sèng Sperm freeze” víi môc tiªu:tÕ bµo trong suèt qu¸ tr×nh l−u gi÷ kÐo dµi trongt×nh tr¹ng ®ãng b¨ng ë nhiÖt ®é thÊp. Nguyªn §¸nh gi¸ hiÖu qu¶ m«i tr−êng glycerol,lý c¬ b¶n cña b¶o qu¶n l¹nh s©u lµ kiÓm so¸t GEYC vµ Sperm freeze trong b¶o qu¶n tinh®−îc chuyÓn ®éng cña c¸c ph©n tö trong c¸c trïng ng−êi b»ng nit¬ láng (-1960C).tÕ bµo vµ m«. Qu¸ tr×nh sèng lu«n ®ßi hái II. ®èi t−îng vµ ph−¬ng ph¸pnh÷ng biÕn ®æi sinh häc, cã liªn quan ®Õn sù nghiªn cøuchuyÓn ®éng cña c¸c ph©n tö trong m«i tr−êng 1. §èi t−îng nghiªn cøu.n−íc. Khi n−íc ë trong vµ quanh tÕ bµo chuyÓn - 30 mÉu tinh dÞch cã tinh dÞch ®å b×nh th−êngthµnh d¹ng n−íc ®¸ ®ñ ®Ó ng¨n c¶n sù chuyÓn ®−îc xÐt nghiÖm vµ b¶o qu¶n t¹i phßng b¶o®éng cña c¸c ph©n tö, vµ sau ®ã nÕu ®−îc lµm qu¶n M« - Ph«i, Tr−êng §¹i häc Y Hµ Néi trongÊm l¹i, c¸c hÖ thèng sinh häc cña tÕ bµo kh«ng thêi gian tõ th¸ng 5 ®Õn th¸ng 8 n¨m 2002.bÞ tæn th−¬ng, ng−êi ta nãi qu¸ tr×nh b¶o qu¶nthµnh c«ng [5]. ChÊt l−îng tÕ bµo vµ m« ®−îc - Tiªu chuÈn chän ®èi t−îng nghiªn cøu:b¶o qu¶n phô thuéc vµo nhiÒu yÕu tè kh¸c Nam giíi trong ®é tuæi sinh s¶n, kh«ng xuÊtnhau nh−: quy tr×nh b¶o qu¶n, nhiÖt ®é b¶o tinh tõ 3 ®Õn 5 ngµy tr−íc ngµy lÊy tinh dÞch,qu¶n, m«i tr−êng b¶o qu¶n vµ quy tr×nh lµm tan kh«ng sèt, kh«ng dïng thuèc, kh«ng uèng r−îub¨ng... Theo thêi gian, trªn thÕ giíi nhiÒu lo¹i t¹i thêi ®iÓm lÊy mÉu.m«i tr−êng ®· ®−îc dïng ®Ó b¶o qu¶n l¹nh s©u 2. Ph−¬ng ph¸p nghiªn cøutinh trïng ng−êi. Tuy nhiªn, nh÷ng c«ng bè vÒ ¸p dông nghiªn cøu can thiÖp. So s¸nhhiÖu qu¶ cña mçi lo¹i m«i tr−êng b¶o qu¶n tinh hiÖu qu¶ b¶o qu¶n cña 3 lo¹i m«i tr−êng ë c¸ctrïng rÊt kh¸c nhau. thêi ®iÓm 1, 2, 30 vµ 90 ngµy sau b¶o qu¶n, ë n−íc ta, b¶o qu¶n l¹nh s©u tinh trïng theo c¸c chØ sè tinh trïng sèng di ®éng tiÕn tíing−êi ®Ó phôc vô nhu cÇu ch¨m sãc søc khoÎ nhanh sau b¶o qu¶n (CSF1), chØ sè tinh trïngsinh s¶n lµ vÊn ®Ò míi mÎ vµ cÇn thiÕt. C©u sèng di ®éng tiÕn tíi nhanh vµ chËm sau b¶ohái ®Æt ra lµ: trong sè c¸c m«i tr−êng, m«i qu¶n (CSF2), vµ chØ sè tinh trïng sèng sau b¶o- §Ò tµi ®−îc thùc hiÖn t¹i Lab b¶o qu¶n M« - Ph«i §¹i häc Y Hµ Néi. 3TCNCYH-2003qu¶n (CSF3). §Ó lµm râ −u ®iÓm cña m«i tr−êng b¶o qu¶n 2.1. ChuÈn bÞ vµ chän mÉu tinh dÞch. theo môc tiªu ®· ®Ò ra, mét quy tr×nh chung ®· ®−îc thùc hiÖn ë tÊt c¶ c¸c mÉu nghiªn cøu. Tinh dÞch ®−îc lÊy trong mét phßng riªng,n»m c¹nh phßng xÐt nghiÖm, b»ng c¸ch tù kÝch - Chia mçi mÉu tinh dÞch thµnh ba phÇnthÝch vµ cho xuÊt tinh th¼ng vµo mét cèc thuû b»ng nhau, cho vµo 3 cèc thuû tinh ®· ghitinh cã chia v¹ch, miÖng réng, ®· ghi s½n tªn nh·n: tªn bÖnh nh©n, m«i tr−êng pha. MçibÖnh nh©n vµ ngµy giê lÊy mÉu. Cèc ®ùng tinh phÇn sö dông mét lo¹i m«i tr−êng, nhá tõngdÞch ®−îc ®Æt trong tñ Êm 370C; sau thêi gian giät m«i tr−êng l¾c ®Òu, theo tØ lÖ glycerol 230 phót, lÊy ra ®Ó ®¸nh gi¸ c¸c chØ sè t¹i phßng giät/1ml tinh dÞch [5], m«i tr−êng GEYCxÐt nghiÖm cã nhiÖt ®é æn ®Þnh tõ 20 – 240C. 1ml/1ml tinh dÞch [1], Sperm freeze 0.7ml/1mlNh÷ng mÉu tinh dÞch trong giíi h¹n b×nh tinh dÞch. Sau khi cho m«i tr−êng, ®Ó mÉu ëth−êng ®−îc tiÕn hµnh b¶o qu¶n ®«ng l¹nh. nhiÖt ®é phßng thÝ nghiÖm 15 phót. 2.2. Quy tr×nh b¶o qu¶n tinh trïng b»ng - N¹p mçi mÉu ®· chuÈn bÞ ®Ó b¶o qu¶nnit¬ láng (- 1960C). trong 4 cäng r¹ (straw) b»ng m¸y hót cÇm tay. Cäng r¹ 0,25 ml, dµi 13 cm, mét ®Çu ®−îc nót 2.2.1. M«i tr−êng b¶o qu¶n. bëi bét dÝnh. ...