Đánh giá biểu hiện gen WT1 trên bệnh nhân bạch cầu cấp dòng tủy trước và sau điều trị tấn công tại Bệnh viện Truyền máu Huyết học thành phố Hồ Chí Minh

Xây dựng quy trình kỹ thuật Real time – PCR định lượng gen WT1 trong bệnh bạch cầu cấp dòng tủy. Áp dụng để đánh giá biểu hiện gen WT1 trên bệnh nhân bạch cầu cấp dòng tủy (BN BCCDT) trước và sau khi điều trị tấn công tại Bệnh viện Truyền máu huyết học thành phố Hồ Chí Minh.
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Đánh giá biểu hiện gen WT1 trên bệnh nhân bạch cầu cấp dòng tủy trước và sau điều trị tấn công tại Bệnh viện Truyền máu Huyết học thành phố Hồ Chí MinhNghiên cứu Y học Y Học TP. Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 23 * Số 3 * 2019 ĐÁNH GIÁ BIỂU HIỆN GEN WT1 TRÊN BỆNH NHÂN BẠCH CẦU CẤP DÒNG TỦY TRƯỚC VÀ SAU ĐIỀU TRỊ TẤN CÔNG TẠI BỆNH VIỆN TRUYỀN MÁU HUYẾT HỌC TP. HỒ CHÍ MINH Phan Thị Thu Lý*, Cao Văn Động**, Nguyễn quốc Dũng**, Phan Cao Thanh Thảo**, Nguyễn Đình Tuyến***, Phan Thị Xinh**,****, Vũ Quang Huy****,*****,******TÓM TẮT Mục tiêu: Xây dựng quy trình kỹ thuật Real time – PCR định lượng gen WT1 trong bệnh bạch cầu cấpdòng tủy. Áp dụng để đánh giá biểu hiện gen WT1 trên bệnh nhân bạch cầu cấp dòng tủy (BN BCCDT) trước vàsau khi điều trị tấn công tại Bệnh viện Truyền máu huyết học thành phố Hồ Chí Minh. Đối tượng và phương pháp: Nghiên cứu được thực hiện trên 20 BN BCCDT tại Bệnh viện Truyền máuHuyết học thành phố Hồ Chí Minh từ tháng 9/2018 đến tháng 5/2019. Sử dụng phương pháp tạo dòng trong T-Vector để xây dựng đường chuẩn các gen WT1 và ABL. Phản ứng Real-time PCR được ứng dụng để định lượngsố bản sao gen WT1 ở bệnh nhân. Kết quả: Xây dựng thành công đường chuẩn gen WT1 và gen ABL1, ứng dụng và thiết lập được điều kiệntối ưu cho phản ứng Real-time PCR định lượng số bản sao gen WT1 với 1 cặp mồi và đoạn dò đặc hiệu. Có 19trong số 20 bệnh nhân biểu hiện quá mức gen WT1 và 01 bệnh nhân không biểu hiện quá mức. Mười hai trongsố 19 bệnh nhân biểu hiện quá mức gen WT1 có đáp ứng ở mức sinh học phân tử sau quá trình điều trị ứng vớigiảm ≥2-log tỉ số biểu hiện WT1/ABL1. Kết luận: Phản ứng Real-time quantitative PCR được tối ưu hóa có thể sử dụng để đánh giá sự thay đổibiểu hiện gen WT1 trước và sau quá trình điều trị tấn công ở BN BCCDT. Từ khóa: bạch cầu cấp dòng tủy, biểu hiện genABSTRACT WILMS TUMOR EXPRESSION EVALUATION IN ACUTE MYELOID LEUKEMIA PATIENT AT PRE- TREATMENT AND POST-TREATMENT IN BLOOD TRANSFUSION AND HEMATOLOGY HOSPITAL HO CHI MINH CITY Phan Thi Thu Ly, Cao Van Dong, Nguyen Quoc Dung, Phan Cao Thanh Thao, Nguyen Dinh Tuyen, Phan Thi Xinh, Vu Quang Huy * Ho Chi Minh City Journal of Medicine * Supplement of Vol. 23 - No 3 - 2019: 214 - 219 Objectives: This study is conducted to implementing technical process of WT1 detection and applicatingtechnical process on WT1 expression evaluation in acute myeloid leukemia patients at pre-treatment and post-treatment. Methods: Twenty patients in Blood Transfusion and Hematology Hospital Ho Chi Minh city, who hadchronic myeloid leukemia, participated in the real-time quantitative PCR to estimating WT1 and ABL1concentration change by designing primers and probes based on WT1 and ABL1 gene sequences and thecalibration curve was established to determine WT1 and ABL1 concentration.*Khoa Xét nghiệm - Trường Cao Đẳng Y tế Quảng Nam**Bệnh viện truyền máu Huyết học Thành phố Hồ Chí Minh***Bệnh viện Sản Nhi tỉnh Quảng Ngãi ****Đại học Y Dược TP. Hồ Chí Minh*****Bệnh viện Đại học Y dược TP. Hồ Chí Minh ******Trung tâm kiểm chuẩn chất lượng Y họcTác giả liên lạc: CN Phan Thị Thu Lý ĐT: 0908471459 Email: phanlyxn@gmail.com214 Hội Nghị Khoa Học Kỹ Thuật BV. Thống Nhất 2019Y Học TP. Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 23 * Số 3 * 2019 Nghiên cứu Y học Results: Standard curve for WT1 and ABL realtime quantitative PCR are meeting quality criteriaion andapllicated on optimal conditions for WT1 and ABL realtime quantitative PCR using specific probes and primers.Twelve of 19 patients, who have WT1 overexpression, meet the molecular biology responses at post-treatmentcorresponding to ≥ 2-log reduction. In which 1 of 20 patients did not overexpress WT1. Conclussions: The real-time quantitative PCR after optimization can be used to evaluate WT1 expression inacute myeloid leukemia patients at pre-treatment and post-treatment. Keywords: acute myeloid leukaemia, gen expressionĐẶT VẤN ĐỀ trong bệnh bạch cầu cấp dòng tủy có thể đại diện cho một dấu ấn độc lập theo dõi MRD. Bệnh bạch cầu cấp dòng tủy (BCCDT) là Với việc định lượng chính xác số bản sao củamột trong những bệnh ung thư phổ biến trên gen, Real-time PCR là một giải pháp có độthế giới, đặc trưng bởi sự tăng sinh các tế bào nhạy cao, chuyên biệt và đáng tin cậy. Do đó,dòng tủy chưa trưởng thành. C ...