Điện di protein hai chiều trong nghiên cứu sàng lọc thuốc trích từ cây dừa cạn lên tế bào u nguyên bào thần kinh

Bài viết trình bày khảo sát tác động của dịch chiết từ hoa dừa cạn (Catharanthus roseus) lên sự biểu hiện protein trong tế bào phân lập từ khối u UNBTK.
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Điện di protein hai chiều trong nghiên cứu sàng lọc thuốc trích từ cây dừa cạn lên tế bào u nguyên bào thần kinhY Học TP. Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 20 * Số 1 * 2016 Nghiên cứu Y học ĐIỆN DI PROTEIN HAI CHIỀU TRONG NGHIÊN CỨU SÀNG LỌC THUỐC TRÍCH TỪ CÂY DỪA CẠN LÊN TẾ BÀO U NGUYÊN BÀO THẦN KINH Võ Văn Thành Niệm*, Trịnh Thị Thu Thảo**, Trương Đình Khải***, Trịnh Thị Diệu Thường****, Hoe Li Nah*****, Bùi Chí Bảo*TÓM TẮT Giới thiệu: U nguyên bào thần kinh (UNBTK) là một dạng khối u đặc phát triển từ tế bào mào thần kinhcủa hệ thần kinh giao cảm ngoại biên, thường hình thành trong quá trình thai nhi và những năm đầu sau khisinh. Gần đây phương pháp điện di protein hai chiều được áp dung cho sàng lọc thuốc cho thấy hệ protein quantrọng trong con đường tín hiệu ung thư nói chung và UNBTK nói riêng. Những thông tin về biến đổi trong hệthống biểu hiện protein trong tế bào UNBTK trước và sau tác động của thuốc sẽ góp phần phục vụ cho những cơchế mới trong điều trị ung thư. Mục tiêu: Khảo sát tác động của dịch chiết từ hoa dừa cạn (Catharanthus roseus) lên sự biểu hiện proteintrong tế bào phân lập từ khối u UNBTK. Phương pháp: Phân lập và nuôi cấy tế bào từ khối u UNBTK sinh thiết từ bệnh nhân, sau đó tiến hành xửlý với thuốc trích từ cây dừa cạn, ly trích protein từ tế bào đã xử lý thuốc. Hệ thống điện di protein 2 chiều lầnđầu được thiết lập tại phòng thí nghiệm thần kinh, Trung tâm y sinh học phân tử. Protein tổng số được chạy vớihệ thống điện di hai chiều để kiểm tra so sánh hai hệ protein có và không tác động thuốc. Kết quả: Nuôi cấy thành công dòng tế bào UNBTK, đồng nhất từ passage 1 (P1) đến P3. Thành công thiếtlập hệ thống điện di protein 2 chiều với protein tổng số 80 g/ml, chạy được dãy pH từ 3-10. Phân tích hình ảnhkết quả ở pH 3-10 cho thấy giữa hai nhóm đối chứng và nhóm xử lý dịch chiết Catharanthus roseus có sự khácbiệt. Mẫu NB 25 và mẫu NB 49 lần lượt có hơn 50% số protein tăng biểu hiện, 50% protein giảm biểu hiện, xuấthiện 57 và 26 điểm protein mới, mất đi 26 và 9 điểm protein so với mẫu đối chứng. Kết luận: Nghiên cứu đã nuôi cấy, tăng sinh thành công dòng tế UNBTK sinh thiết từ khối u. Bên cạnh đó,thấy được tác động thay đổi biểu hiện hệ thống protein trong tế bào của thuốc trích từ cây dừa cạn bằng phươngpháp điện di hai chiều. Kết quả này giúp hỗ trợ nhiều nghiên cứu cơ chế con đường tín hiệu protein để làm rõ conđường đáp ứng thuốc của ung thư UNBTK. Từ khóa: U nguyên bào thần kinh, điện di hai chiều, cây dừa cạn.ABSTRACT 2-DIMENSIONAL (2-D) ELECTROPHORESIS ASSAY IN INVESTIGATING THE EFFECT OF DRUG EXTRACTED FROM CATHARANTHUS ROSEUS ON NEUROBLASTOMA Vo Van Thanh Niem, Trinh Thi Thu Thao, Truong Đinh Khai, Trinh Thi Dieu Thuong, Hoe Li Nah, Bui Chi Bao * Y Hoc TP. Ho Chi Minh * Supplement of Vol. 20 - No 1 - 2016: 129 - 135 Background: Neuroblastoma (NB), often formed during fetal and early postnatal, are tumors developed fromneural crest of the peripheral sympathetic nervous system, 90% of cases are detected in their early years. Recently,   Trung tâm Y sinh học phân tử, Đại học Y Dược Tp. HCM. Đại học Khoa học tự nhiên Tp. HCM.  Bộ môn Ngoại Nhi Đại học Y Dược Tp Hồ Chí Minh   Khoa Y học cổ truyền Đại học Y Dược Tp Hồ Chí Minh. United Scientific Co., Ltd. Malaysia Tác giả liên lạc: TS. Bùi Chí Bảo. ĐT: 0909708225 Email: bcbao@ump.edu.vnThần kinh 129Nghiên cứu Y học Y Học TP. Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 20 * Số 1 * 2016two-dimensional protein electrophoresis approach showed us important proteins in signaling pathways for cancerscreening, particularly in NB. The information about the alternations in protein expression system in NB cellsbefore and after effects of the drug will provide knowledge for the new cancer treatment. Objectives: Investigate the effects of drug extracted from Catharanthus roseus on protein expression in NBcell line. Methods: Isolation and cell cultures from NB patients’s biopsies. These samples then treated with drugsfrom Catharanthus roseus. Extracted proteins were used for 2D electrophoresis system which was first set up inneuroscience lab, Center for molecular biomedicine. The result was used to comparing two systems with andwithout the impact of drugs. Results: NB cell lines are successfully cultured, consistent from passage 1 (P1) to P3. 2D systems wereestablished with total pro ...