DNA barcoding và nhân nhanh In vitro Dendrobium transparens Wall.ex Lindl

Trong bài viết này, mẫu lan thuộc chi Dendrobium đã được nhận dạng bước đầu ở mức loài dựa trên 4 chỉ thị phân tử (gồm gen nhân và gen lục lạp). Đồng thời, xây dựng quy trình hoàn chỉnh để nhân nhanh in vitro loài này.
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
DNA barcoding và nhân nhanh In vitro Dendrobium transparens Wall.ex LindlTạpchíKhoahọcĐHQGHN:KhoahọcTựnhiênvàCôngnghệ,Tâp33 ̣ ,Số2(2017)3745 DNAbarcodingvànhânnhanhInvitroDendrobium transparensWall.exLindl LaViệtHồng1,*,NguyễnNguyệtQuỳnh1,ĐàoVănKiên1,2,ChuHoàngHà2 1 TrườngĐạihọcSưphạmHàNội2,32NguyễnVănLinh,PhúcYên,VĩnhPhúc,ViệtNam 2 ViệnCôngnghệSinhhọc,ViệnHànlâmKhoahọcvàCôngnghệViệtNam, 18HoàngQuốcViệt,HàNội,ViệtNam Nhậnngày05tháng4năm2017 Chỉnhsửangày30tháng5năm2017;Chấpnhậnđăngngày25tháng6năm2017 Tómtắt:ChiLanHoàngthảo(Dendrobium)làmộtchilớncủahọPhonglan. Trongnghiêncứu này,nguồnmẫuDendrobiumđượcphânloạibằngphươngphápDNAbarcodingthôngqua4 chỉ thị phântử gồmrbcL,matK,trnLvàITS.Sauđó,quytrìnhnhângiốnginvitroloàinàyđã đượcxâydựng.Kếtquả nghiêncứuchothấy,mẫunghiêncứulà Dendrobiumtransparens Wall.exLindl.MôitrườngnuôicấyMS+30g/lsaccharose+8g/lagarcóbổ sungkinetin0,3 hoặc0,5mg/llàthíchhợpđể nhânnhanhprotocorm.MôitrườngMS+30g/lsaccharose+8g/l agarcóbổ sung10%nướcdừalàthíchhợpnhấtđể phátsinhchồiinvitrotừ protocorm.Môi trườngMS+30g/lsaccharose+8g/lagarcóbổ sung0,5mg/lkinetinlàthíchhợpnhấtđể nhân nhanhchồiinvitrovớihệsốnhân6,33.MôitrườngMS+30g/lsaccharose+8g/lagarcóbổsung 0,3mg/lIAAlàmôitrườngtạorễtốtnhất(sốrễ/chồi4,80;chiềudàirễ:2,07cm).Cây invitro hoànchỉnhđượcrènluyệntrêngiáthểxơdừa,sau4tuầntheodõi,câyđãhìnhthànhrễmớivà chồi mới, tỷ lệ sống đạt85%. Từkhoá:DNAbarcoding,Dendrobiumtransparens,invitro,nhânnhanh,táisinh.1.Mởđầu số lượngloàitrongchilớn,chúngcónhiều đặcđiểmcơquansinhdưỡngtươngđồnghay Chi Dendrobium thuộc họ Phong lan chồnglấn.Hiệnnay,côngcụphântửdựatrên(Orchidaceae), chi này có khoảng 12001500 trìnhtự DNA của cácphânđoạngenchuẩnloài phân bố rộng khắp ở Châu Á, Bắc haycòngọilàDNAbarcodingđượcsử dụngAustralia và New Zealand. Khá nhiều loài phổbiếnđểphânloạisinhvậtởmứcđộ loàithuộcchinàysinhtrưởngnhanh,dễ dàngtái [3].Dovậyviệcứngdụngcôngnghệnàyvàosinh thế hệ mới, hoa đẹp, thường ra hoa việcnhậndạngloàivànuôitrồng,nhângiốngquanhnăm[1].Ngoàigiátrị kinhtế,mộtsố cácloàitrongchiDendrobiumlàviệclàmcấploài lan thuộc chi Dendrobium còn là thành thiết.phầncủacácbàithuốctruyềnthống ởTrung Trongnghiêncứunày,mẫulanthuộcchiQuốcvà ẤnĐộ [2].Việcphânloạicácloài Dendrobium đãđượcnhậndạngbướcđầu ởtrongchiDendrobiumthườngrấtkhókhăndo mứcloàidựatrên4chỉ thị phântử (gồmgen Tácgiảliênhệ.ĐT:84973376668. nhânvàgenlụclạp).Đồngthời,xâydựngquy Email:laviethong@hpu2.edu.vn trìnhhoànchỉnhđểnhânnhanhinvitroloàinày.https://doi.org/10.25073/25881140/vnunst.4483 3738 L.V.Hồngvànnk./TạpchíKhoahọcĐHQGHN:KhoahọcTựnhiênvàCôngnghệ,Tâp̣ 33,Số2(2017)37452.Vậtliệuvàphươngpháp Câyphảhệđượcxâydựngtừcáctrìnhtự đượcgiảitrìnhtự kếthợpvớitậphợptrìnhVậtliệu tựcósẵncủacácloàiDendrobiumtừXianget al.(2016)[8],[9].Bộdữliệukếthợpcủabốn Mẫuquả lan(thuộcchilanHoàngthảo gen được phân tích với hai phương phápDendrobiumsp.),đượccungcấptheođơnđặt maximum likelihood (ML) và BayesianhàngcủaCôngtyTNHHvậttư vàgiốnghoa Inference(BI).PhântíchMLđượcthựchiệnXuânTrường(MêLinh,HàNội). trênRAxML8.1.11theoStamatakis(2006)vớiPhươngpháp ...