Hóa sinh học thực nghiệm: Chương 1 & 2

Hóa sinh học thực nghiệm: Chương 1 & 2 cung cấp cho các bạn những kiến thức về những nguyên tắc và chuẩn bị cơ bản trong các nghiên cứu hóa sinh học; các quy trình thí nghiệm thông thường. Mời các bạn tham khảo tài liệu để nắm bắt nội dung chi tiết.
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Hóa sinh học thực nghiệm: Chương 1 & 2HÓASINHHỌCTHỰCNGHIỆMCHƯƠNG1.NHỮNGNGUYÊNTẮCVÀCHUẨNBỊCƠBẢNTRONGCÁCNGHIÊNCỨUHÓASINHHỌC 1. Nhữngnguyêntắcantoànkhilàmviệcvớicácphòngthínghiệmhóasinhhọc. Cầntuânthủnghiêmngặtcácquyđịnhcủaphòngthínghiệm Mộtsốhóachấtcóđộctínhcao,cóthểgâybỏng,gâymê,gâydịứnghoặccóảnh hưởngnghiêmtrọng,lâudàiđếnsứckhỏeconngườicầnđượcbảoquảnđúngnguyên tắc,sửdụngphươngtiệnbảovệthíchhợpkhitiếpxúc. Khicósựcốlàmđổhóachấtratay,chân,quầnáohayraphòngthínghiệmthìphải dùngcácbiệnphápsơcứuthíchhợpđểnhanhchónghạnchếtáchạivàngaysauđó phảibáochocánbộhướngdẫnhoặcnhữngngườicóchuyênmônhaynghiệpvụđể xửlý. Cáchóachấtphóngxạcónhữngquyđịnhriêngvàkhilàmviệcvớicácchấtphóngxạ phảiđọckỹcácquyđịnhvềantoànphóngxạvàphảiđượchọcqualớpantoànphóng xạdonhữngtổchứccóthẩmquyềnhuấnluyện. Cácloạitếbàomangthểtáitổhợpvànhiềuphếthảicủathínghiệmcầnđượcxửlý vàthảibỏtheonhữngphươngthứcphùhợpđểtránhgâyranhữngtáchạiđếncon ngườivàmôitrường. 2. Bảoquảnvàsửdụnghóachất Bảoquảnvàsửdụnghóachấtđúnglàđiềukiệnđầutiênđảmbảothínghiệmthành côngcủathínghiệm. Bảoquảnvàcấtgiữhóachấttheođúngyêucầucủahãngsảnxuấthaychỉdẫncủa cácsáchtracứu. Cầnsửdụngcáchóachấtđạtđộtinhkhiếtphùhợptheoyêucầuthínghiệm. Khiphahaychuẩnbịhóachấtcầnlưuýnồngđộhòatantốiđacủacácchấtkhácnhau trongnướchoặctrongdungmôihữucơ(ethanol,isopropanol,…..)làrấtkhácnhau. Thờigiansửdụngvàbảoquảnhóachấttùythuộcvàonồngđộcủahóachấthoặc loạihóachất Mộtsốhóachấtphảichuẩnbịởdạngvôtrùng:dùngnồihấphoặcmànglọctùytheo loạihóachất. Hạnchếtốiđalàmnhiễmbẩnhóachấttrước,trongkhisửdụng.phầnlớnvậttưtiêu haodùngchohóasinhhọcvàsinhhọcphântửchỉnêndùngmộtlầnvàởdạngvô trùng.3. Cáchchuẩnbịmộtsốhóachấtvàdungdịchthườngdùng. Mộtsốnồngđộ 3.1Nồngđộphầntrăma. Nồngđộphầntrămtheothểtích(w/v):làsốgamchấttantrong100mldungdịch.VD: pha80mlddNa2CO32,5%b. Nồngđộphầntrămtheokhốilượng(w/w):làsốgamchấttantrong100gdungdịch. VD:pha250mlddNa2CO314%.c. Nồngđộphầntrămtheothểtích(v/v):làsốmlchấtđótrong100mldungdịch.d. Nồngđộmg%cónghĩalàsốmgchấtđótrong100gnguyênliệuhayhỗnhợp.e. Nồngđộ%bãohòalànồngđộ%sovớikhảnănghòatantốiđacủachấtđótrong dungdịch.f. Nồngđộpartpermillion(ppm)làphầnchấtđótrong1triệug. 3.2 NồngđộphântửgamM=mole/L:làsốphântửgamchấttancótrong1lítdung dịchVD:NaOH0,3M,cónghĩalàcó0,3x40=12gNaOhtrong1lítdungdịch. 3.3 NồngđộđươnglượngNlàsốđươnglượnggamchấttancótrong1lítdungdịch a. Vớiacidthìnồngđộđươnglượngđượctínhbằngsốphântửgamchấttanchia chosốionH+thamgiaphảnứngtraođổi.VD:HCl1N,tứclàcó36,5gHCl trong1lítdungdịch;H2SO41N,tứclàcó98g:2=49gH2SO4trong1lítdd. b. Vớibazơthìnồngđộđươnglượngđượctínhbằngsốphântửgamchiachosố nhómhydroxyl(OH)trongphântửchấtđó.VD:NaOH2N,tứclàcó 2x(40:1)=80gNaOHtrong1lítdungdịch;Mg(OH)20,5Ntứclàcó 0,5x(41:2)=10,25gMg(OH)2trong1lítdd. c. VớichấtoxyhóakhửnhưKmnO4trongphảnứngvớiH2O2… Ngoàira,hiệnnayngườitacòndùngnồngđộ“x”vìloạidungdịchnàychứa nhiềuthànhphầnkhácnhau,việcliệtkêđầyđủthànhphần,nồngđộsẽmất thờigiannêncácđệmnàycótênchunghoặctheokýtựsaochodễthựchiện, theodõi.Nồngđộlàmviệclànồngđộ1x.Chuẩnbịnhanhcácdungdịchtừnồngđộcácnồngđộđãbiết. a. Phaloãngnồngđộcủamộtdungdịchranlần:thìtachỉcầnlấyn1thểtíchdungmôi vàchothêm1thểtíchdungdịchcầnphaloãngsẽđượcdungdịchmớicónồngđộnhỏ đinlần.VD:PhaATP200mMthànhATP2,4mM,talấy200:2,4=83,3lần.Talấy n(83,3)1=82,3thểtích(dungmôi,nước)vàbổsung1thểtíchATP200mMvào,lắc đều,tasẽcódungdịchATP2,4mM. b. Phamộtdungdịchcónồngđộphầntrămtươngứngtừmộtdungdịchcónồngđộcao hơn:TacầnphaX%từdungdịchY%cónồngđộcaohơnthìtalấyXmldungdịchY %bổsungthêmnướcđếnYml.Cáchchuẩnbịmộtdungdịchđệm:có2cáchCách1.Phahaithànhphầncủađệm(mộtcótínhacid,mộtcótínhbazo)sauđótrộnchúnglạivớinhautheotỉlệđượcghitrongcácbảng ...