Khảo sát tác động của cao chiết gừng lên sự tăng sinh của tế bào ung thư biểu mô gan HepG2 ở điều kiện nuôi cấy 3D

Nghiên cứu tiến hành khảo sát tác động của cao chiết gừng được chiết xuất bằng ba phương pháp: ngâm dầm (G1), Soxhlet (G3) và siêu âm (G5) lên tế bào ung thư gan HepG2 nuôi cấy dạng 3D. Sự tác động của cao chiết gừng trên tế bào HepG2 được đánh giá bằng các phương pháp đánh giá hình thái spheroid, xác định đường cong tăng trưởng, xác định tỷ lệ tế bào chết.
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Khảo sát tác động của cao chiết gừng lên sự tăng sinh của tế bào ung thư biểu mô gan HepG2 ở điều kiện nuôi cấy 3D Giải thưởng Sinh viên nghiên cứu khoa học Euréka lần 20 năm 2018 Kỷ yếu khoa học KHẢO SÁT TÁC ĐỘNG CỦA CAO CHIẾT GỪNG LÊN SỰ TĂNG SINH CỦA TẾ BÀO UNG THƯ BIỂU MÔ GAN HEPG2 Ở ĐIỀU KIỆN NUÔI CẤY 3D Đinh Thị Thùy Dương* Trường Đại học Khoa học Tự nhiên – Đại học Quốc gia TP. Hồ Chí Minh *Tác giả liên lạc: dinhduong0508@gmai.com TÓM TẮT Nghiên cứu tiến hành khảo sát tác động của cao chiết gừng được chiết xuất bằng ba phương pháp: ngâm dầm (G1), Soxhlet (G3) và siêu âm (G5) lên tế bào ung thư gan HepG2 nuôi cấy dạng 3D. Sự tác động của cao chiết gừng trên tế bào HepG2 được đánh giá bằng các phương pháp đánh giá hình thái spheroid, xác định đường cong tăng trưởng, xác định tỷ lệ tế bào chết. Cao chiết có hoạt tính mạnh nhất được đánh giá khả năng gây ra sự chết theo chu trình của tế bào bằng phương pháp chạy Flow cytometry. Kết quả cho thấy cao chiết G3 có hoạt tính mạnh nhất trên tế bào HepG2 (giá trị IC50 của G3 là 299,3±8,358 µg/ml so với G1=341±3,93 µg/ml và G5=487,3±39,97 µg/ml). Đặc biệt, cao chiết G3 gây độc tế bào mạnh thông qua quá trình kích hoạt apoptosis. Từ khóa: Cao chiết gừng, ngâm dầm, Soxhlet, siêu âm, ung thư gan, HepG2, apoptosis. STUDYING THE EFFECT OF GINGER EXTRACT ON HUMAN LIVER CANCER CELL LINE HEPG2 IN 3D CULTURE SYSTEM Dinh Thi Thuy Duong* University of Science – VNU Ho Chi Minh City *Corresponding Author: dinhduong0508@gmai.com ABSTRACT This study aims to test the effect of ginger extract on human liver cancer cell line HepG2 in 3D culture system. Ginger extract is purified by three different methods including maceration (G1), Soxhlet (G3) and sonication (G5). The effect of ginger extract on HepG2 cell line is tested by three different ways including evaluation of spheroid morphology, determination of the growth curve and cell death rate. The results show that G3 has highest extraction efficiency and is the most effective inhibitor on HepG2. IC50 value of G3 is lowest with 299,3± 8,358 µg/ml (in comparison to 341,7±9,395 µg/ml of G1 and 487,3±39,97 µg/ml of G5). Especially, we demonstrated that the effect of G3 is through inhibition of cellular growth via apoptosis pathway. Keywords: Ginger extract, maceration, Soxhlet, sonication, liver cancer, HepG2, apoptosis. TỔNG QUAN trong vùng có tỷ lệ ung thư gan cao, Bệnh ung thư nói chung và ung thư gan ước tính trung bình mỗi năm cả nước nói riêng là những vấn đề ngày càng có trên 10.000 ca ung thư gan mới được quan tâm ở hầu hết các quốc gia được phát hiện. Trong những năm gần trên thế giới. Việt Nam là quốc gia nằm đây, tỷ lệ bệnh nhân mắc bệnh ung thư 96 Giải thưởng Sinh viên nghiên cứu khoa học Euréka lần 20 năm 2018 Kỷ yếu khoa học gan ngày càng tăng và có xu hướng trẻ sạch, xay nhỏ. hóa. Mặc dù có rất nhiều thuốc cũng Phương pháp nghiên cứu như liệu pháp điều trị đã được phát Phương pháp ngâm dầm triển, song hiệu quả điều trị còn rất giới Ngâm 100g gừng tươi băm nhỏ trong hạn cùng với hiện tượng kháng thuốc, 500ml ethanol, dung môi sẽ ngấm dần di căn và tái phát khối u. Do đó nghiên vào gừng và hòa tan các chất tan trong cứu sàng lọc các thuốc mới có nguồn ethanol. Sau 72 giờ, tiến hành lọc thu gốc thiên nhiên là hết sức cần thiết dịch chiết. trong giai đoạn hiện nay. Gừng Phương pháp Soxhlet (Zingiber officinale Roscoe) là loại cây Chiết xuất 20g gừng tươi băm nhỏ với thảo dược được trồng phổ biến tại Việt 100ml ethanol trong hệ thống Soxhlet. Nam, được chứng minh là có chứa Phương pháp siêu âm nhiều chất chống oxy hóa, chống viêm, quá trình chiết xuất được hỗ trợ bởi kháng khuẩn và đặc biệt có tác dụng máy siêu âm với 100g gừng tươi và chống ung thư. 500ml ethanol. Quá trình siêu âm được Trong khi đó, việc sàng lọc thuốc hiện tiến hành ở nhiệt độ 15oC trong thời nay hầu như đang dùng mô hình tế bào gian 30 phút. Kết thúc quá trình siêu nuôi cấy lớp đơn (Two dimensional - âm tiến hành lọc thu dịch chiết (dịch 2D). Việc nuôi cấy lớp đơn làm thay chiết thu được từ các phương pháp đổi nhiều đặc tính cơ bản của tế bào, ngâm dầm, Soxhlet, siêu âm được tiến cũng như thể hiện chưa chính xác các hành đông khô để loại bỏ dung môi). đặc điểm của tế bào ung thư trong khối Phương pháp xác định đường cong u, do đó thuốc được sàng lọc và tạo ra tăng trưởn ...