Luận văn : XÁC ĐỊNH GEN GÂY ĐỘC VÀ TÍNH ĐA DẠNG DI TRUYỀN CỦA NẤM Metarrhizium anisopliae KÝ SINH TRÊN CÔN TRÙNG part 2

Mục đích đề tài nhằm xác định đoạn gen gây độc Pr1 của những dòng nấmMetarrhizium anisopliae ở cấp độ phân tử giúp chọn lọc đúng những dòng nấmMetarrhizium anisopliae có tính độc đảm bảo hoạt tính diệt côn trùng lâu dài và hiệuquả. Ngoài ra còn cung cấp những thông tin về tính đa dạng của gen Pr1 nhằm giúpcho việc phát hiện gen Pr1 được dễ dàng hơn.
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Luận văn : XÁC ĐỊNH GEN GÂY ĐỘC VÀ TÍNH ĐA DẠNG DI TRUYỀN CỦA NẤM Metarrhizium anisopliae KÝ SINH TRÊN CÔN TRÙNG part 2 DANH SÁCH CÁC CHỮ VIẾT TẮTBXĐTG1 : Bọ xít đen Tiền Giang 1BXĐTV7 : Bọ xít đen Trà Vinh 7BXĐLA3 : Bọ xít đen Long An 3BXĐLA8 : Bọ xít đen Long An 8 : Rầy bông cúc Quận 9 15RBCQ915 : Rầy bông cúc Quận 2RBCQ2 : Bọ dừa Quận 9 6BDQ96 : Bọ dừa Trà Vinh 1BDTV1 : Bọ dừa Tây Ninh 4BDTN4 : Bọ dừa Long An 8BDLA8 : Sâu cuốn lá lúa Long An 1SCLLLA1 : Rầy nâu Bến Tre 1.5RNBT1.5ng : nano gramnm : nano mol g : micro gram m : micro mol : micro mol/lít M : micro lít lTE : tris EDTA : deoxyribonucleotide – 5 – trphosphatedNTPTAE : tris acetic EDTAUI : unit internationalbp : base pairKb : kilo base : Czapek – DoxCZASDS : Sodium dodecyl sulphatePGA : Potato glucose agarIPM : Intergrated pest managementSDA : Soduim dedocyl sulphateRFLP : Restriction Fragment Lengh PolymorphismRAPD : Random Amlification of Polymorphic DNATm : melting temperature : cộng tác viênctvPCR : Polymerase Chains Reaction ix DANH SÁCH CÁC BẢNGBẢNG TRANGBảng 2.1: Enzyme của một số loài nấm diệt sâu ................................................. 14Bảng 2.2: Hoạt tính phân hủy chitin và protein của một số nấm diệt sâu ........... 15Bảng 2.3: Sự liên quan giữa hoạt tính enzyme với độc tính diệt sâu .................. 16Bảng 4.1: Nguồn nấm Metarrhizium anisopliae được thu thập ở một số địa phương dùng trong thí nghiệm ........................................................... 41Bảng 4.2: Các nguồn nấm Metarrhizium trên genbank được dùng để so sánh. .. 48Bảng 4.3: So sánh trình tự nucleotid đoạn gen Pr1 của hai mẫu BXĐTG1, BXĐTV7 với các trình tự trên genbank. ............................................ 49 x DANH SÁCH CÁC HÌNHHÌNH TRANGHình 2.1: Nấm Metarrhizium anisopliae ký sinh trên những côn trùng khác nhau ....................................................................................................... 9Hình 2.2: Chế phẩm nấm Metarrhizium anisopliae trên thị trường: metanat – CE ...................................................................................... 10Hình 2.3: Chu kỳ xâm nhập của nấm ký sinh trên côn trùng, Metarrhizium anisopiae ............................................................................................. 11Hình 2.4: Sự xâm nhập của nấm trên lớp vỏ thân sâu rốm ở mức vi mô ............ 12Hình 2.5: Mối bị nấm Metarrhizium anisopliae ký sinh được chụp dưới kính lúp sôi nổi ở độ phóng đại 40 lần .............................................................. 12Hình 3.1: Chu kỳ nhiệt của phản ứng PCR ......................................................... 36Hình 4.1: Nấm Metarrhizium anisopliae ký sinh trên rầy nâu............................ 42Hình 4.2: Nấm Metarrhizium anisopliae ký sinh trên bọ dừa ............................ 42Hình 4.3: Nấm Metarrhizium anisopliae ký sinh trên sâu cuốn lá lúa ............... 42Hình 4.4: Nấm Metarrhizium anisopliae ký sinh trên bọ xít đen ....................... 42Hình 4.5: Sự nảy mầm của bào tử nấm Metarrhizium anisopliae dưới kính hiển vi ở độ phóng đại 400 lần ........................................................... 42Hình 4.6: Khuẩn lạc nấm Metarrhizium anisopliae sau khi tách đơn bào tử...... 43Hình 4.7: Kết quả ly trích DNA của các nguồn nấm Metarrhizium anisopliae.. 44Hình 4.8: DNA của các nguồn nấm Metarrhizium anisopliae sau khi được xử lý với RNAse .......................................................................................... 44Hình 4.9: Kết quả phát hiện gen Pr1 của các nguồn nấm qua PCR ................... 48Hình 4.10: Hình cây phát sinh loài ...................................................................... 53 xi CHƢƠNG 1: MỞ ĐẦU 1.1. Đặt vấn đề Tình hình dân số ngày càng gia tăng, nhu cầu của con người sử dụng lươngthực ngày càng cao cả về số lượng và chất lượng. Do đó, mục tiêu đặt ra là sản xuấtnông nghiệp phải đạt năng suất cao và ổ định. Để ...