Luận văn : XÁC ĐỊNH GIỚI TÍNH BẰNG KỸ THUẬT MULTIPLEX PCR TRÊN BA GIỐNG BÒ part 1

Xác định giới tính phôi động vật có thể mang lại hiệu quả trong chăn nuôi, nhất là đối với động vật cao sản như bò sữa. Nhờ xác định giới tính, ta có thể quyết định nuôi động vật có giới tính mong muốn để giảm chi phí chăn nuôi, và góp phần phục hồi một số loài động vật quí hiếm nhưng gặp khó khăn trong vấn đề sinh sản và đang có nguy cơ tiệt chủng. Chính vì thế, các nhà khoa học luôn tìm cách xác định giới tính....
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Luận văn : XÁC ĐỊNH GIỚI TÍNH BẰNG KỸ THUẬT MULTIPLEX PCR TRÊN BA GIỐNG BÒ part 1 1 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM TP.HCM BỘ MÔN CÔNG NGHỆ SINH HỌC ***000*** KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP XÁC ĐỊNH GIỚI TÍNH BẰNG KỸ THUẬT MULTIPLEX PCR TRÊN BA GIỐNG B Ò NGÀNH: CÔNG NGHỆ SINH HỌC NIÊN KHÓA: 2001 - 2005 SINH VIÊN THỰC HIỆN: NGUYỄN VĂN ÚT Thành phố Hồ Chí Minh Tháng 9/2005 2 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM TP.HCM BỘ MÔN CÔNG NGHỆ SINH HỌC ***000*** XÁC ĐỊNH GIỚI TÍNH BẰNG KỸ THUẬT MULTIPLEX PCR TRÊN BA GIỐNG B Ò Giáo viên hướng dẫn: Sinh viên thực hiện: PGS.TS. TRẦN THỊ DÂN NGUYỄN VĂN ÚT BSTY. QUÁCH TUYẾT ANH Thành phố Hồ Chí Minh Tháng 9/2005 3 LỜ I C Ả M TẠ Con xin thành kính ghi ơn ba má, hai người suốt đời trăn trở, dốc hết công lao cho con được ngày hôm nay. Em xin ghi khắc ơn sâu của các anh chị, những người luôn dành mọi điều kiện tốt đẹp cho em ăn học nên người. Em xin chân thành gửi lời cảm ơn đến: * Ban giám hiệu trường Đại Học Nông Lâm TP . Hồ Chí Minh, ban chủ nhiệm Bộ Môn Công Nghệ Sinh Học cùng Quý thầy cô đã tạo điều kiện tốt đẹp cũng như truyền đạt kiến thức cho em trong suốt quá trình h ọc tập tại trường. * Ban giám đốc cùng tập thể cán bộ nhân viên Trung Tâm Phân Tích Thí Nghiệm trư ờng Đại Học Nông Lâm TP. Hồ Chí Minh đ ã tạo điều kiện thuận lợi và tận tình giúp đỡ em trong suốt quá trình thực tập tốt nghiệp. * Tập thể cán bộ thú y và các cô chú tại lò mổ tập trung huyện Dĩ An - Bình Dương đã giúp đ ỡ em trong suốt quá trình lấy mẫu. Em xin trân trọng biết ơn cô Trần Thị Dân và Thầy Nguyễn Ngọc Tuân đ ã h ết lòng hư ớng dẫn và truyền đạt những kinh nghiệm quí báu cho em trong suốt quá trình thực tập tốt nghiệp. Em xin gửi lời cảm ơn sâu sắc đ ến cô Quách Tuyết Anh và th ầy Lê Hữu Ngọc đã ch ỉ dẫn cho em từng thao tác và hướng đi trong quá trình th ực tập. Em xin chân thành cảm ơn: * Ch ị Oanh, chị Trang, anh Điểm, chị Hưng cùng các anh chị tại Trung Tâm Phân Tích Thí Nghiệm đ ã giúp đỡ, động viên, chỉ dẫn tận tình trong lúc em tiến hành đề tài. * Tập thể lớp Công Nghệ Sinh Học K27 đã chia sẻ những khó khăn vất vả, vui buồn trong quá trình học tập cũng nh ư hết lòng hỗ trợ tôi trong thời gian thực tập. 4 TÓM TẮT KHÓA LUẬN Nguyễn Văn Út, Đại Học Nông Lâm TP. Hồ Chí Minh, tháng 9/2005, “XÁC ĐỊNH GIỚI TÍNH BẰNG KỸ THUẬT MULTIPLEX PCR TRÊN BA GIỐNG BÒ”. Hướng dẫn khoa học : 1 . PGS. TS. Trần Thị Dân 2 . BSTY. Quách Tuyết Anh Đề tài được tiến hành từ ngày 14-02-2005 đ ến ngày 06-07-2005 tại Trung Tâm Phân Tích Thí Nghiệm Trường Đại Học Nông Lâm TP. Hồ Chí Minh. Đối tượng được nghiên cứu trong đề tài là ba giống bò ta Vàng, lai Sind và sữa Hà Lan. Đây là những giống bò được nuôi phổ biến nhất ở Việt Nam và mang lại nguồn lợi lớn cho ngành chăn nuôi. Do đó chúng tôi sử dụng phương pháp multiplex PCR để xác định giới tính của chúng nhằm ứng dụng ph ương pháp này trong xác định giới tính của phôi ở các giống b ò sau này. Kết quả đạt được như sau: 1. Ly trích được 54 mẫu DNA từ cơ vân và 10 mẫu DNA từ lông đuôi của ba giống bò. Trong đó, DNA từ cơ (tỷ số OD trung b ình 1,76 ) tinh sạch và có hàm lượng cao hơn DNA từ lông (1,49), thấp nhất từ n gọn lông (1,22). 2. Trong hai chu trình nhiệt của phản ứng PCR đư ợc thử nghiệm, chu trình nhiệt I cho hiệu quả xác định giới tính kém hơn chu trình nhiệt II (0% so với 100%) khi tiến hành trên giống ta Vàng. Chu trình nhiệt I có thời gian ngắn hơn chu trình nhiệt II 3. Taq polymerase có nguồn gốc từ hãng ABgene và Bio -rad cho hiệu quả xác định giới tính cao hơn Taq có nguồn gốc từ h ãng Promega (100% so với 0 %) khi thí nghiệm trên giống ta Vàng. 4. Qui trình PCR với chu trình nhiệt I và Taq ABgene 1,5 UI có thể xác định giới tính trên ba giống ta Vàng, lai Sind và sữa Hà Lan với tỷ lệ thành công 100%. 5. 11 m ẫu DNA cơ làm khô theo m ức độ I cho hiệu quả PCR cao hơn 11 mẫu DNA cơ làm khô theo mức độ II (100% so với 20%). 6. Tỷ lệ thành công trong xác định giới tính bằng PCR trên 10 mẫu DNA lông thấp hơn rất nhiều so với tỷ lệ thành công trên 32 mẫu DNA cơ (20% so với 100%). 5 MỤC LỤC NỘI DUNG TRANG Bìa ................................................................................................................................ i Trang tựa ..................................................................................................................... ii Lời cảm tạ................................................................................................................... iii Tóm tắt khóa luận ....................................................................................................... iv Mục lục ................................................................ ................................ ....................... v Danh sách các chữ viết tắt.......... ...