Luân. văn : Xây dựng quy trình biến nạp đoạn DNA vào tế bào vi khuẩn E.coly DH5α part 9

Cân 20 mg IPTG (dạng bột) hoà tan trong 1 ml nước khử ion, sau đó lọc qua màng lọc có kých thước lỗ 0,2μm Dung dịch kháng sinh Ampicillyn 100mg/ml Cân 100mg ampicillyn dạng bột, hoà tan trong 1ml nước khử ion, lọc qua màng lọc có kých thước lỗ 0,45μm. Các loại buffer  PCR buffer 10X Tris-HCl pH 8.4 (NH4)2SO4 MgCl2 DTT NP 40 Tween-20 200mM 166mM 67mM 100mM 0,1% 0,1%
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Luân. văn : Xây dựng quy trình biến nạp đoạn DNA vào tế bào vi khuẩn E.coly DH5α part 9 Cân 20 mg IPTG (dạng bột) hoà tan trong 1 ml nước khử ion, sau đó lọc quamàng lọc có kých thước lỗ 0,2μm Dung dịch kháng sinh Ampicillyn 100mg/ml Cân 100mg ampicillyn dạng bột, hoà tan trong 1ml nước khử ion, lọc qua màng lọccó kých thước lỗ 0,45μm.Các loại buffer  PCR buffer 10X Tris-HCl pH 8.4 200mM (NH4)2SO4 166mM MgCl2 67mM DTT 100mM NP 40 0,1% Tween-20 0,1%  Buffer SuRE 10X pH 8.0(buffer enzym cắt) Tris-HCl 100mM NaCl 1M MgCl2 50mM 2-Mercaptoethanol 10mM  NEBuffer 1X pH 7.9 (buffer của enzym DNA polymerase I large fragment) NaCl 50mM Tris-HCl 10mM MgCl2 10mM DTT 1mM  Lygation buffer 10X Tris-HCl pH 7.6 660mM MgCl2 66mM DTT 100mM 660μM ATP 65Hình 1: Sơ đồ cấu trúc pBluescript II SK (+/-) 66Hình 2 : Sơ đồ cấu trúc pBluescript II KS (+/-) 67 MỤC LỤCNội dung TrangLời cảm ơn ................................................................................................................ iTóm tắt .........................................................................................................................iiMục lục ........................................................................................................................iiiDanh sách các chữ viết tắt ...........................................................................................viiDanh sách các hình ......................................................................................................viiiDanh sách các bảng, biểu đồ và sơ đồ .........................................................................xPHẦN 1. MỞ ĐẦU .........................................................................................................1 1.1 Đặt Vấn Đề ............................................................................................................1 1.2 Mục tiêu của đề tài .................................................................................................2 1.3 Nội dung thực hiện ................................................................................................2 1.3.1 Phần 1 ..............................................................................................................2 1.3.2 Phần 2 ..............................................................................................................2PHẦN 2. TỔNG QUAN TÀI LYỆU ..............................................................................3 2.1 Hiện tượng biến nạp ở vi khuẩn.............................................................................3 2.1.1 Hiện tượng biến nạp ........................................................................................3 2.1.2 Vai trò và ứng dụng của biến nạp gen ............................................................3 2.1.2.1 Vai trò .......................................................................................................3 2.1.2.2 Ứng dụng ..................................................................................................3 2.2 Cơ sở sinh hóa và tế bào học của hiên tượng biến nạp ..........................................4 2.3 Sự biến nạp nhân tạo vào tế bào E.coly .................................................................5 2.3.1 Khái niệm sự biến nạp nhân tạo. .....................................................................5 2.3.2 Sự điều hoà gen của operon Lac ở E.coly .......................................................5 2.3.3 Chuẩn bị tế bào khả nạp ..................................................................................7 2.3.3.1 Phương pháp vật lý ...................................................................................7 2.3.3.2 Phương pháp hoá học ...............................................................................7 2.3.4 Phương pháp chọn lọc thể biến nạp và plasmid tái tổ hợp .............................8 2.3.5 Chiết tách DNA plasmid ...................................................................... ...