Môi trường nuôi cấy tế bào thực vật

Mặc dù nhu cầu dinh dưỡng của các loại mô nuôi cấy là rất khác nhau nhưng môi trường nuôi cấy mô thực vật đặc trưng chứa các thành phần sau: - Các nguyên tố đa lượng. Bao gồm các loại muối của nitrogen, potassium, calcium, phosphorus, magnesium và sulfur. Đây là sáu nguyên tố chính cần thiết cho sinh trưởng của thực vật bậc cao. - Các nguyên tố vi lượng. Bao gồm các loại muối của sắt, kẽm, mangan, boron, copper, molybdenum và cobalt ở dạng vết. - Các phụ gia hữu cơ. ...
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Môi trường nuôi cấy tế bào thực vậtMôi trường nuôi cấy tế bào thực vật Mặc dù nhu cầu dinh dưỡng của các loại mô nuôi cấy là rấtkhác nhau nhưng môi trường nuôi cấy mô thực vật đặc trưng chứa các thànhphần sau:- Các nguyên tố đa lượng. Bao gồm các loại muối của nitrogen, potassium,calcium, phosphorus, magnesium và sulfur. Đây là sáu nguyên tố chính cầnthiết cho sinh trưởng của thực vật bậc cao.- Các nguyên tố vi lượng. Bao gồm các loại muối của sắt, kẽm, mangan,boron, copper, molybdenum và cobalt ở dạng vết.- Các phụ gia hữu cơ. Một lượng nhỏ các loại vitamin (myo-inositol,thiamine, nicotinic acid, pyridoxine, riboflavin…), các amino acid (thườngcho phép bỏ qua nhưng trong một số trường hợp đặc biệt thì có thể dùng), vàcác phụ gia hữu cơ không xác định khác (malt, dịch chiết nấm men, dịch thủyphân casein, nước dừa…).- Các chất kích thích sinh trưởng thực vật. Thành phần phụ gia quan trọngnhất quyết định kết quả nuôi cấy là các chất điều hòa sinh trưởng. Các auxin(IAA và các dạng tương tự được tổng hợp nhân tạo như 2,4-D, NAA, IBA,NOA…), và các cytokinin (zeatin, 2i-P và các dạng tương tự được tổng hợpnhân tạo như kinetin, BA…) là những nhóm chất kích thích sinh trưởng vàphát sinh hình thái chủ yếu trong nuôi cấy mô và cơ quan của thực vật.- Nguồn carbon. Thường sử dụng sucrose làm nguồn carbon thay cho nguồncarbon được thực vật cố định từ khí quyển bằng quang hợp. Trong đa số cácthí nghiệm nuôi cấy, tế bào thực vật đã mất khả năng quang hợp. Glucosecũng thường được đưa vào môi trường và cho hiệu quả tương đương sucrose,trong khi fructose cho hiệu quả kém hơn.- Các tác nhân làm rắn (tạo gel) môi trường. Thường sử dụng là agar, mộtloại polysaccharide thu được từ một số loài tảo thuộc ngành tảo đỏ(Rhodophyta). Một số hợp chất khác cũng được thử nghiệm thành công nhưalginate, phytagel, methacel và gel-rite.Murasghige và Skoog (1962) đã xây dựng môi trường dinh dưỡng cơ bản(gọi là môi trường MS) thích hợp cho hầu hết các thí nghiệm nuôi cấy tế bàothực vật.Thành phần môi trường nuôi cấy Murashige và Skoog (1962). Thànhphần Nồngđộ Thànhphần Nồngđộ (mg/L) (mg/L)1.Các nguyên tố đa FeSO4.7H2O 27,8lượng Na2EDTA.2H2O 370 37,3MgSO4.7H2O 170KH2PO4 1900KNO3 3.Nguồn carbon 1650NH4NO3 Sucrose 440 30000CaCl2.2H2O2.Các nguyên tố vi 4.Các phụ gia hữu cơlượng -Các vitaminH3BO3 Thiamine.HCl 0,5 Pyridoxine.HClMnSO4.4H2O 6,2 Nicotinicacid 0,5ZnSO4.7H2O myo-inositolNa2MoO4.2H2O 22,3 0,5CuSO4.5H2O 8,6 100CoCl2.6H2O 0,25KI -Các chất khác 0,0250,025 Glycine 20,83