Mức độ kháng kháng sinh và gene quy định sản sinh men β-lactamaza (ESBL) của các chủng E. Coli sản sinh ESBL phân lập từ cơ sở giết mổ lợn trên đại bàn Hà Nội

Qua nghiên cứu xác định tính mẫn cảm kháng sinh của 33 chủng vi khuẩn E.coli sản sinh men β–lactamaza phổ rộng (ESBL- Extended-Spectrum β-lactamases) phân lập từ các cơ sơ giết mổ lợn trên địa bàn TP. Hà Nôi, kết quả cho thấy: 100% các chủng đã kháng với các kháng sinh ampicillin, kanamycin, gentamycin và tetracyclin nhưng mẫn cảm với amoxicillin/clavulanic acid và cefepim.
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Mức độ kháng kháng sinh và gene quy định sản sinh men β-lactamaza (ESBL) của các chủng E. Coli sản sinh ESBL phân lập từ cơ sở giết mổ lợn trên đại bàn Hà NộiKHOA HỌC KỸ THUẬT THÚ Y TẬP XXIV SỐ 3 - 2017MÖÙC ÑOÄ KHAÙNG KHAÙNG SINH VAØ GENE QUY ÑÒNH SAÛN SINH MENβ-LACTAMAZA (ESBL) CUÛA CAÙC CHUÛNG E. COLI SAÛN SINH ESBLPHAÂN LAÄP ÑÖÔÏC TÖØ CÔ SÔÛ GIEÁT MOÅ LÔÏN TREÂN ÑÒA BAØN HAØ NOÄITrương Thị Quý Dương, Phạm Thị Ngọc, Ngô Chung Thủy,Đặng Thị Thanh Sơn, Trần Thị Nhật, Trương Thị Hương Giang.Viện Thú y Quốc giaTÓM TẮTQua nghiên cứu xác định tính mẫn cảm kháng sinh của 33 chủng vi khuẩn E.coli sản sinh menβ–lactamaza phổ rộng (ESBL- Extended-Spectrum β-lactamases) phân lập từ các cơ sơ giết mổ lợntrên địa bàn TP. Hà Nôi, kết quả cho thấy: 100% các chủng đã kháng với các kháng sinh ampicillin,kanamycin, gentamycin và tetracyclin nhưng mẫn cảm với amoxicillin/clavulanic acid và cefepim.Xác định gene quy định khả năng sản sinh ESBL của các chủng E.coli sinh ESBL phân lập được,kết quả cho thấy: 100% chủng mang gene CTX-M, 48,5% (16/33) chủng mang gene TEM, chỉ 6,1%(2/33) chủng mang gene SHV.Từ khóa: kháng kháng sinh, E. coli, ESBL, gene TEM, SHV, CTX-M, cơ sở giết mổ lợn, TP. Hà NộiAntibiotic resistance and gene producing β–lactamaza of ESBL producingE.coli isolated from pig slaughterhouses in Ha Noi CityTruong Thi Quy Duong, Pham Thi Ngoc, Ngo Chung Thuy,Dang Thi Thanh Son, Tran Thi Nhat, Truong Thi Huong GiangSUMMARYThe studied results on antibiotic susceptibility of 33 Extended-Spectrum β-lactamases(ESBL) producing E.coli strains isolated from the pig slaughterhouses in Ha Noi City showedthat 100% of the isolated E.coli strains resisted to ampicilline, kanamycine, gentamycine andtetracycline, all of them were susceptible with amoxicillin/clavulanic acid and cefepim.The result of detecting genes encoding TEM, SHV and CTX-M ESBL by using PCR techniqueshowed that the most bla genes responsible to ESBL activity belonged to the CTX-M gene(100% tested isolates) and TEM gene (16/33 tested isolates, 48.5%), only 6.2% (2/33 testedisolates) were encoded by SHV gene.Keywolds: antibiotic resistance, E. coli, ESBL, TEM, SHV, CTX-M gene, pig slaughterhouses,Hanoi CityI. ĐẶT VẤN ĐỀTrong những năm gần đây, hiện tượng khángkháng sinh của vi khuẩn Gram âm, đặc biệt là họvi khuẩn Enterobacteriaceae, mà phổ biến hơncả là vi khuẩn E. coli đã được cảnh báo (Pitoutvà Laupland, 2008). Vi khuẩn thuộc họ này cókhả năng sản sinh ra các men β - lactamase phổrộng ( ESBL) có khả năng ly giải các kháng sinhthuộc nhóm penicillin, cephaslosphorine thế hệmột, hai và ba (Paterson, 2006), là các nhóm thuốcthường được dùng điều trị bệnh tiêu chảy ở ngườivà vật nuôi. Điều này gây ra khó khăn không nhỏtrong việc điều trị các bệnh nhiễm khuẩn do cácvi khuẩn này. Xác định được khả năng mẫn cảmkháng sinh của các chủng vi khuẩn E.coli sảnsinh men β - lactamaza phổ rộng là quan trọng31KHOA HỌC KỸ THUẬT THÚ Y TẬP XXIV SỐ 3 - 2017và cần thiết để lựa chọn thuốc điều trị hiệu quảbệnh do chúng gây nên.Tuy nhiên, thông tin về các gene quy địnhkhả năng mẫn cảm của vi khuẩn E. coli vớithuốc kháng sinh sử dụng trong thú y, đặc biệtlà các nghiên cứu sinh học phân tử về vi khuẩnE. coli sản sinh men β - lactamaza phổ rộng cònrất hạn chế.Xuất phát từ thực tế đó và dựa trên các nghiêncứu đã được tiến hành, chúng tôi trình bày kếtquả xác định tính kháng kháng sinh và gene quyđịnh sản sinh men β - lactamaza phổ rộng củacác chủng E.coli phân lập được tại một số cơ sởgiết mổ tại Hà Nội.II. NỘI DUNG, VẬT LIỆU VÀPHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨUlập được.2.2. Vật liệu- 33 chủng vi khuẩn E.coli phân lập được từmột số cơ sở giết mổ lợn trên địa bàn Hà Nộiđược xác định là có khả năng sản sinh ESBLbằng phương pháp khoanh giấy kết hợp- Các dụng cụ, hóa chất, môi trường dùng đểxác định tính mẫn cảm kháng sinh, tiến hànhphản ứng PCR- Trang thiết bị, máy móc phòng thí nghiệmvi sinh vật.Thời gian nghiên cứu: 2016.2.3. Phương pháp nghiên cứu- Xác định tính mẫn cảm kháng sinh của vikhuẩn:2.1. Nội dung- Xác định tính kháng kháng sinh của cácchủng E.coli sản sinh ESBL phân lập được tạimột số cơ sở giết mổ (CSGM) trên địa bàn HàNội- Xác định gene quy định khả năng sản sinhESBL của các chủng E.coli sản sinh ESBL phânTheo phương pháp khuếch tán trên thạch củaKirby - Bauer.- Phát hiện gene mã hóa sản sinh ESBL bằngkỹ thuật PCR.Chiết tách DNA của vi khuẩn E. coli theophương pháp Tichy.Bảng 1. Thành phần phản ứng PCRThành phầnHãng sản xuấtMiliQ waterInhouseNồng độD NTP.sInvitrogene1 mMBuffer (Super taq buffer với 15 mM MgCl2)SphaeroQ10XMồi xuôiSigma10 pmol/µlMồi ngượcSigma10 pmol/µlEnzym super taqSphaeroQU/ µlSố lượng/1 mẫu thử (µl)38 µl + 2 µl DNA (+/- 100ng/ µl)TổngChu trình nhiệt phản ứng PCR95 C10 phút95oC1 phút59oC30 giây72oC1 phút72oC10 phúto3235 chu kỳKHOA HỌC KỸ THUẬT THÚ Y TẬ ...