Nhân nhanh chồi và tạo cây hoàn chỉnh dòng keo lai (Acacia hybrid) BV32 bằng kỹ thuật nuôi cấy in vitro

Để khắc phục và tiến tới cung cấp với số lượng lớn cùng các đặc tính ưu việt, đồng nhất cho sản xuất. Nghiên cứu này trình bày kết quả nhân giống Keo lai BV32 hoàn chỉnh trong điều kiện in vitro.
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Nhân nhanh chồi và tạo cây hoàn chỉnh dòng keo lai (Acacia hybrid) BV32 bằng kỹ thuật nuôi cấy in vitroCông nghệ sinh học & Giống cây trồng NHÂN NHANH CHỒI VÀ TẠO CÂY HOÀN CHỈNH DÒNG KEO LAI (ACACIA HYBRID) BV32 BẰNG KỸ THUẬT NUÔI CẤY IN VITRO Mai Hải Châu, Nguyễn Thị Mai Phân hiệu Trường Đại học Lâm nghiệp TÓM TẮT Ở Việt Nam việc nhân giống Keo lai BV32 chủ yếu được thực hiện bằng phương pháp giâm cành, tuy nhiên phương pháp này có những nhược điểm. Để khắc phục và tiến tới cung cấp với số lượng lớn cùng các đặc tính ưu việt, đồng nhất cho sản xuất. Nghiên cứu này trình bày kết quả nhân giống Keo lai BV32 hoàn chỉnh trong điều kiện in vitro. Đối với cảm ứng tạo cụm chồi, cây Keo lai BV32 sau khi nuôi cấy 2 tuần trên môi trường MS, đoạn thân cây được cắt thành các mảnh nhỏ có kích thước 1,0 - 1,5 cm cấy lên các công thức môi trường cảm ứng tạo đa chồi (sử dụng môi trường cơ bản MS có bổ sung chất điều hòa sinh trưởng BAP với các nồng độ khác nhau: 0,5 - 3,0 mg/l). Môi trường MS bổ sung 1,5 mg/l BAP cho tỉ lệ mẫu tái sinh chồi cao nhất (95,3%), số chồi trung bình/mẫu cũng cao nhất 8,4 chồi và chiều dài trung bình của chồi đạt 4,5 cm. Đối với cảm ứng tạo rễ và tái sinh cây hoàn chỉnh, các chồi Keo lai BV32 in vitro có lá đạt tiêu chuẩn kích thước (đạt từ 3 - 5 cm) được cắt và cấy chuyển sang môi trường cảm ứng tạo rễ (1/2MS + 8 g/l agar + 30 g/l sucrose) bổ sung IBA, NAA và IAA với các nồng độ khác nhau. Kết quả cho thấy môi trường dinh dưỡng cảm ứng tạo rễ bổ sung 2 mg/l IAA cho tỷ lệ chồi ra rễ 100%, số rễ/chồi đạt cao nhất 2,4 rễ và chiều dài rễ đạt 4,2 cm. Từ khóa: Cảm ứng tạo chồi, cảm ứng tạo rễ, Keo lai BV32, tái sinh cây.1. ĐẶT VẤN ĐỀ trường từ diện tích rừng trồng giống keo lai Cây Keo lai (Acacia hybrid) được tạo ra bởi BV32 để phủ xanh đất trồng, đồi núi trọc, đặcphép lai giữa giống Keo tai tượng (Acacia biệt là ở những vùng khó khăn.mangium) và Keo lá tràm (Acacia Hiện nay, giống Keo lai BV32 được sảnauriculiformis) (Lê Đình Khả, 2003). Đây là xuất chủ yếu bằng phương pháp giâm hom.loài có nhiều đặc điểm hình thái trung gian Tuy nhiên, phương pháp này vẫn còn một sốgiữa bố và mẹ, đồng thời có ưu thế lai rõ rệt về hạn chế như: chất lượng cây giống không cao,mặt sinh trưởng, có hiệu suất bột giấy, độ bền cây giống không đồng đều, khả năng nhiễm vàcơ học và độ trắng của bột giấy cao hơn hẳn so lây nhiễm bệnh cao, tỷ lệ nhân giống thấp…với các loài bố mẹ. Có thời gian sinh trưởng chưa thực sự đáp ứng được yêu cầu của sảnnhanh, thân thẳng, ít cành nhánh, khẳ năng xuất. Để giải quyết được bài toán này, kỹ thuậtchống chịu sâu bệnh tốt, khép tán nhanh, phủ nhân giống bằng phương pháp nuôi cấy mô tếnhanh đất trống đồi núi trọc trong thời gian bào là một lựa chọn nhằm khắc phục những hạnngắn. Ngoài ra, do có khả năng cố định đạm chế của kỹ thuật nhân giống phương pháp giâmnên cải thiện đất khá tốt, năng suất cao đạt 20 - hom, đáp ứng tốt hơn đòi hỏi của sản xuất.40 m3/ha/năm. Chất lượng gỗ của giống BV32 2. PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨUđược đánh giá là rất phù hợp cho sản xuất giấy, 1. Vật liệu nghiên cứuván dăm, ván sợi, ván MDF và làm gỗ xẻ sản Cành chồi Keo lai BV32 bánh tẻ (kíchxuất đồ mộc gia dụng phục vụ tiêu dùng trong thước 10 - 15 cm chứa mắt ngủ) được lấy từnước cũng như xuất khẩu. Vườn Vật liệu thuộc Phân hiệu Trường Đại Với ưu điểm sinh trưởng nhanh, mang lại học Lâm nghiệp, tỉnh Đồng Nai.hiệu quả kinh tế cao, giống BV32 được các 2. Phương pháp nghiên cứuđơn vị sản xuất lâm nghiệp, các hộ dân, các Chồi được cắt bỏ phần lá, rửa sạch sơ bộcông ty… trồng với diện tích lớn. Qua đó, tạo bằng dung dịch nước xà phòng loãng để loạicông ăn việc làm cho người lao động, tăng thu bỏ chất bẩn bám trên bề mặt (dùng chổi rửanhập, đồng thời mang lại hiệu quả về mặt môi nhẹ nhàng). Sau đó rửa sạch mẫu dưới vòi TẠP CHÍ KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ LÂM NGHIỆP SỐ 3 - 2019 3 Công nghệ sinh học & Giống cây trồngnước chảy cho hết xà phòng, tráng lại mẫu (dao động từ 0,5 mg/l đến 2,0 mg/l). Theo dõibằng nước cất (tráng 3 lần). Chồi được rửa tỷ lệ chồi ra rễ, số rễ/chồi, chiều dài rễ, chấtbằng nước cất, lắc mạnh trong 3 phút để tiếp lượng cây.tục loại bỏ các chất bẩn còn bám trên bề mặt Tất cả môi trường nuôi cấy đều được chuẩn(lặp lại 3 lần). Sau đó tiến hành sát khuẩn bề độ đến pH = 5,8 và khử trùng ở nhiệt độmặt quả bằng dung dịch cồn 70% bổ sung 121oC, áp suất 1,5 atm trong thời gian 15 phút.Tween 20 (4 giọt/100 ml dung dịch) trong 1 Nuôi cấy ở nhiệt độ 25  2oC, cường độ ánhphút (lắc nhẹ) rồi rửa sạch bằng nước cất (3 sáng 35 µE/m2/s với thời gian chiếu sáng 16lần). Tiếp theo, khử trùng chồi bằng dung dịch giờ/ngày.Mercury(II) chloride (HgCl2) với nồng độ Bố trí thí nghiệm đơn yếu tố được bố trí0,1% trong các khoảng thời thời gian 8 phút, theo kiểu hoàn toàn ngẫu nhiên (CRD), 3 lầnsau đó rửa lại 5 lần bằng nước cất. Chồi sau lặp lại, mỗi ô cơ sở 30 mẫu cấy. Số liệu thíkhi khử trùng được đặt lên đĩa inox vô trùng, nghiệm được thu thập và xử lý thống kê bằngdùng giấy thấm vô trùng để thấm khô nước phần mềm SAS 9.4.trên bề mặt chồi, sau đó dùng mũi dao cấy cắt 3. KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬNchồi thành các đoạn chồi có chiều dài (2 - 2,5 3.1. Ảnh hưởng của hàm lượng BAP đếncm) chứa ít nhất một mắt ngủ. Các ...