Phân lập, định danh và nghiên cứu đặc điểm sinh học một số chủng vi sinh vật có khả năng phân hủy dầu mỏ trong mẫu đất, bùn nhiễm xăng dầu tại Quân khu 7

Từ 3 mẫu đất bùn nhiễm dầu, đã tuyển chọn và phân lập được 3 chủng vi khuẩn và 3 chủng nấm men có khả năng phân hủy dầu. Tổ hợp vi sinh vật có khả năng phân hủy 93% hàm lượng dầu bổ sung sau 9 ngày thử nghiệm. Kết quả nghiên cứu cho thấy, nhiệt độ tối ưu cho vi khuẩn và nấm men là khoảng 300 C, pH tối ưu là khoảng trung tính, các chủng vi sinh vật phát triển ở nồng độ muối loãng 0,1%. Bằng phương pháp sinh học phân tử đã định danh được 6 chủng vi sinh vật trong tổ hợp, bao gồm: chủng VKbt1 thuộc về loài Chryseobacterium defluvii; chủng VKbt2 thuộc về loài Chryseobacterium gleum; chủng VKbx thuộc chi Pseudomonas sp.; chủng NMbt1 thuộc về loài Pichia jadinii; chủng NMbt2 thuộc về loài Candida tropicalis; chủng NMbx thuộc về loài Candida tropicalis.
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Phân lập, định danh và nghiên cứu đặc điểm sinh học một số chủng vi sinh vật có khả năng phân hủy dầu mỏ trong mẫu đất, bùn nhiễm xăng dầu tại Quân khu 7Khoa học Tự nhiên Phân lập, định danh và nghiên cứu đặc điểm sinh học một số chủng vi sinh vật có khả năng phân hủy dầu mỏ trong mẫu đất, bùn nhiễm xăng dầu tại Quân khu 7 Đinh Thị Vân*, Ngô Cao Cường Trung tâm Nhiệt đới Việt - Nga, Chi nhánh phía Nam Ngày nhận bài 5/7/2018; ngày chuyển phản biện 10/7/2018; ngày nhận phản biện 20/9/2018; ngày chấp nhận đăng 25/9/2018Tóm tắt:Từ 3 mẫu đất bùn nhiễm dầu, đã tuyển chọn và phân lập được 3 chủng vi khuẩn và 3 chủng nấm men có khả năngphân hủy dầu. Tổ hợp vi sinh vật có khả năng phân hủy 93% hàm lượng dầu bổ sung sau 9 ngày thử nghiệm. Kếtquả nghiên cứu cho thấy, nhiệt độ tối ưu cho vi khuẩn và nấm men là khoảng 300C, pH tối ưu là khoảng trung tính,các chủng vi sinh vật phát triển ở nồng độ muối loãng 0,1%. Bằng phương pháp sinh học phân tử đã định danh được6 chủng vi sinh vật trong tổ hợp, bao gồm: chủng VKbt1 thuộc về loài Chryseobacterium defluvii; chủng VKbt2 thuộcvề loài Chryseobacterium gleum; chủng VKbx thuộc chi Pseudomonas sp.; chủng NMbt1 thuộc về loài Pichia jadinii;chủng NMbt2 thuộc về loài Candida tropicalis; chủng NMbx thuộc về loài Candida tropicalis.Từ khóa: định danh, phân hủy dầu, vi sinh vật.Chỉ số phân loại: 1.6Mở đầu Các mẫu đất và bùn được thu thập từ hệ thống xả thải tại Xưởng sửa chữa động cơ và cầu rửa xe của đơn vị. Dầu mỏ từ lâu đã là nguồn năng lượng cần thiết, khôngthể thiếu đối với nhiều quốc gia trên thế giới [1]. Trong quá Phương pháp nghiên cứutrình sử dụng dầu mỏ, có một lượng dầu phát tán vào môi Các mẫu nghiên cứu được bảo quản lạnh ở 40C, chuyểntrường, nếu không được xử lý sẽ gây ô nhiễm. Các hoạt về phòng thí nghiệm và tiến hành nuôi cấy trong môi trườngđộng như rửa xe, xúc rửa bể chứa nhiên liệu, xưởng sửa khoáng GOST 9023-74 có bổ sung 5% dầu thô pha trong DOchữa động cơ… có thể là nguồn phát thải dầu mỡ và gây ô (tỷ lệ 5:95). Các chủng phân lập được nuôi cấy trên máy lắcnhiễm môi trường. 250 vòng/phút ở nhiệt độ 28±20C. Sau 7 ngày nuôi cấy, hút Nhiều công nghệ đã được áp dụng để xử lý ô nhiễm dầu 10 ml dịch nuôi cấy lần 1 chuyển sang bình tam giác chứamỏ như tuyển nổi, lắng lọc, chưng cất, xử lý vi sinh, mỗi môi trường khoáng có thành phần tương tự, tiếp tục nuôicông nghệ có những ưu điểm và hạn chế riêng [2, 3]. Trong cấy ở điều kiện tương tự. Quá trình cấy truyền thực hiện 3đó, xử lý dầu mỏ trong nước bằng công nghệ vi sinh được lần. Lấy mẫu nuôi cấy lần 3 phân lập trên môi trường MPAcho là giải pháp bền vững do đảm bảo tính thân thiện môi thạch đĩa [thành phần (g/l): cao thịt - 3, pepton - 5, NaCl -trường. Tuy nhiên, để đạt hiệu quả tối ưu về mặt kinh tế, 0,5, agar - 15, pH 6,8-7,5)] và cấy gạt trên môi trường đặcnhóm tác giả đã áp dụng công nghệ phân tách dầu bằng cơ trưng cho nấm men và vi khuẩn [4]. Các chủng vi sinh vậthọc, kết hợp sử dụng các chủng vi sinh vật bản địa để phân đã phân lập được giữ trong môi trường MPA thạch nghiênghủy lượng dầu trong nước thải. Việc tuyển chọn tập hợp vi để sử dụng cho các thí nghiệm tiếp theo.sinh vật có khả năng phân hủy dầu được tiến hành với các Hình thái khuẩn lạc của chủng vi sinh vật được quan sátmẫu đất, bùn nhiễm xăng dầu tại một số địa điểm có các trên môi trường khoáng GOST 9023-74 bổ sung 1% thạch.hoạt động sửa chữa động cơ và rửa xe tại Quân khu 7. Hình thái tế bào của chủng vi sinh vật được quan sát dưới kính hiển vi quang học độ phóng đại 400 lần và 1.000 lần.Vật liệu và phương pháp nghiên cứu Phân loại vi khuẩn, nấm men dựa trên so sánh trình tự Vật liệu nghiên cứu gene 16S rRNA và ITS. DNA tổng số của vi khuẩn và nấm Trên cơ sở khảo sát một số đơn vị phát thải dầu mỡ, men được tách bằng kít của Zymo Research (USA). Đoạnchúng tôi lựa chọn hai đơn vị đại diện thuộc Quân khu 7 là gen 16S rDNA được khuếch đại với cặp mồi 27F và 1492R;Trung đoàn vận tải và Xưởng sửa chữa động cơ để thu mẫu. trình tự ITS được khuếch đại với cặp mồi ITS1 và ITS4.Tác giả liên hệ:Email: dinhthivan2004@gmail.com∗ ...