Ứng dụng kỹ thuật RT-PCR để chọn mẫu dịch não tuỷ cho phân lập virut do muỗi truyền từ bệnh nhân có hội chứng não cấp ở miền Bắc Việt Nam

Trong những năm gần đây , có rất nhiều truyền của những virut đã biết [8, 9, 10]. căn nguyên virut gây HCNC mới được phát Trong thực tế vật liệu di truyền của nhiều virut hiện, hoặc mới thấy xuất hiện ở những vùng nh- là một túi cóp nhặt (grap-bags), nó có trước đây chưa có sự lưu hành của những được một số gen từ vật chủ của nó cũng như virut này ví dụ như virut Hendra, virut viêm có được một số gen từ những virut khác. Do não Nhật bản (VNNB) ở Australia,...
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Ứng dụng kỹ thuật RT-PCR để chọn mẫu dịch não tuỷ cho phân lập virut do muỗi truyền từ bệnh nhân có hội chứng não cấp ở miền Bắc Việt Nam TCNCYH 30 (4) - 2004 øng dông kü thuËt RT-PCR ®Ó chän mÉu dÞch n·o tuû cho ph©n lËp virut do muçi truyÒn tõ bÖnh nh©n cã héi chøng n·o cÊp ë miÒn b¾c viÖt nam Phan ThÞ Ngµ, Mary B. Crabtree* ViÖn VÖ sinh dÞch tÔ trung -¬ng (VSDTT¦), Hµ Néi *Trung t©m kiÓm so¸t bÖnh tËt, Fort Collins, Colorado B»ng kü thuËt RT-PCR, sö dông måi ®ét biÕn cña 3 nhãm virut ®Ó chän mÉu dÞch n·o tuû (DNT) ph©nlËp virut g©y héi chøng n·o cÊp (HCNC) do muçi truyÒn. XÐt nghiÖm 53 mÉu DNT cña bÖnh nh©n HCNCb»ng kü thuËt RT-PCR, x¸c ®Þnh cã 16 tr-êng hîp d-¬ng tÝnh víi tØ lÖ nh- sau: 8/53 (15,09 %) mÉu d-¬ngtÝnh víi måi cña nhãm virut do muçi truyÒn, 7/53 (12,96 %) mÉu d-¬ng tÝnh víi måi cña nhãm virut tiÒmtµng, 1/53 (1,88 %) mÉu d-¬ng tÝnh víi måi cña nhãm virut l©y truyÒn qua ®-êng tiªu ho¸. KÕt qu¶ d-¬ngtÝnh b»ng kü thuËt RT-PCR kh«ng thÓ thay thÕ kÕt qu¶ ph©n lËp, nh-ng nã ®Þnh h-íng cho viÖc chän mÉuthÝch hîp ®Ó ph©n lËp virut. Sö dông tÕ bµo muçi Aedes Albopictus dßng C6/36 ®Ó ph©n lËp virut do muçitruyÒn. Tõ 7 mÉu DNT x¸c ®Þnh d-¬ng tÝnh b»ng kü thuËt RT-PCR víi cÆp måi cña nhãm virut do muçitruyÒn, ph©n lËp ®-îc 7 chñng virut, trong sè nµy cã 5 chñng lµ virut VNNB, 1 chñng lµ virut thuéc nhãmvirut Arbo míi ®-îc ph¸t hiÖn ë ViÖt nam 2002, cßn 1 chñng ch-a ®Þnh lo¹i ®-îc. I. §Æt vÊn ®Ò virut, kü thuËt nµy nh¹y nh-ng chØ cã thÓ øng dông ®Ó ®Þnh lo¹i sù hiÖn diÖn vËt liÖu di Trong nh÷ng n¨m gÇn ®©y, cã rÊt nhiÒu truyÒn cña nh÷ng virut ®· biÕt [8, 9, 10].c¨n nguyªn virut g©y HCNC míi ®-îc ph¸t Trong thùc tÕ vËt liÖu di truyÒn cña nhiÒu viruthiÖn, hoÆc míi thÊy xuÊt hiÖn ë nh÷ng vïng nh- lµ mét tói cãp nhÆt (grap-bags), nã cãtr-íc ®©y ch-a cã sù l-u hµnh cña nh÷ng ®-îc mét sè gen tõ vËt chñ cña nã còng nh-virut nµy vÝ dô nh- virut Hendra, virut viªm cã ®-îc mét sè gen tõ nh÷ng virut kh¸c. Don·o NhËt b¶n (VNNB) ë Australia, virut Nipah vËy vËt liÖu di truyÒn cña nhiÒu virut trong c¸cë Malaysia, virut West Nile ë Mü [6, 8]. ë ViÖt hä kh¸c nhau trong phÇn lín c¸c tr-êng hîpNam theo sè liÖu thèng kª, hµng n¨m cã rÊt kh¸c nhau, nh-ng trong mét sè tr-êngkho¶ng 2000 - 3000 tr-êng hîp bÞ HCNC, hîp l¹i t-¬ng tù nh- nhau vÒ tr×nh tù cña vËtnh-ng cho ®Õn nay míi x¸c ®Þnh ®-îc virut liÖu di truyÒn [3, 5]. Nªn cã gi¶ thiÕt r»ng: kÕtVNNB, virut ®-êng ruét lµ c¨n nguyªn, sè qu¶ x¸c ®Þnh d-¬ng tÝnh tõ mÉu bÖnh phÈmcßn l¹i cã thÓ do nhiÔm virut kh¸c [2, 4]. chØ ®ång nghÜa víi nhËn ®Þnh cã vËt liÖu di §Ó ph¸t hiÖn mét t¸c nh©n virut míi g©y truyÒn cña virut trong mÉu; nh-ng nÕu ph©nbÖnh, ph©n lËp virut cã ý nghÜa quan träng lËp virut tõ nh÷ng mÉu bÖnh phÈm nµy, hiÖucho viÖc x¸c ®Þnh t¸c nh©n, tuy nhiªn ph©n qu¶ ph©n lËp ®-îc virut rÊt cao.lËp virut th-êng Ýt ®¹t kÕt qu¶ do bÞ ¶nh h-ëng Do vËy trong nghiªn cøu nµy cÆp måi cñacña nhiÒu yÕu tè nh- thêi gian lÊy mÉu, b¶o 3 nhãm virut lµ nh÷ng nhãm virut ®· ®-îc x¸cqu¶n vµ vËn chuyÓn mÉu lµm gi¶m hiÖu gi¸ ®Þnh hoÆc gi¶ ®Þnh cã thÓ lµ t¸c nh©n g©yvirut trong mÉu, mÆt kh¸c thêi gian cã kÕt qu¶ HCNC [4, 9, 10] ®-îc sö dông sµng läc mÉuchËm. Ng-îc l¹i kü thuËt PCR cho phÐp DNT ®Ó ph©n lËp virut g©y HCNC do muçikhuÕch ®¹i nhiÒu lÇn theo cÊp sè nh©n nh÷ng truyÒn ë miÒn b¾c ViÖt Nam trong n¨m 2003.®o¹n ADN phiªn m· tõ vËt liÖu di truyÒn cña 15 TCNCYH 30 (4) - 2004 II. VËt liÖu vµ ph-¬ng ph¸p TÕ bµo muç ...