Xây dựng quy trình xác định vitamin C trong trái cây bằng phương pháp chuẩn độ điện thế sử dụng thuốc thử 2,6–Dichlorphenol indophenol

Bài viết "Xây dựng quy trình xác định vitamin C trong trái cây bằng phương pháp chuẩn độ điện thế sử dụng thuốc thử 2,6–Dichlorphenol indophenol" khảo sát được giá trị tối ưu của một số thông số của máy chuẩn độ điện thế; tìm được dung môi tối ưu là H2C2O4 cho quá trình chiết mẫu và môi trường tối ưu cho phản ứng chuẩn độ acid ascorbic với chất chuẩn 2,6 – DPIP (pH 4,0). Mời các bạn cùng tham khảo!
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Xây dựng quy trình xác định vitamin C trong trái cây bằng phương pháp chuẩn độ điện thế sử dụng thuốc thử 2,6–Dichlorphenol indophenol XÂY DỰNG QUY TRÌNH XÁC ĐỊNH VITAMIN C TRONG TRÁI CÂY BẰNG PHƯƠNG PHÁP CHUẨN ĐỘ ĐIỆN THẾ SỬ DỤNG THUỐC THỬ 2,6 – DICHLORPHENOL INDOPHENOL Huỳnh Anh Tuấn1, Huỳnh Nguyên Thảo Vy2 1. Viện Phát triển ứng dụng. Email: tuanha@tdmu.edu.vn. 2. Trung tâm Tuyển sinh TÓM TẮT Vitamin C có vai trò rất quan trọng trong cuộc sống hàng ngày của chúng ta, nó tham gia vào các quá trình oxi hoá – khử khác nhau ở cơ thể. Thiếu vitamin C cơ thể sẽ bị bệnh hoại huyết, ảnh hưởng tiêu cực đến sự tự vệ của cơ thể đối với các bệnh nhiễm trùng khác. Ngày nay có nhiều phương pháp xác định vitamin C, tuy nhiên mỗi phương pháp đều có ưu và nhược điểm của nó. Bài báo này được thực hiện nhằm xác định vitamin C trong trái cây bằng phương pháp chuẩn độ điện thế sử dụng thuốc thử 2,6-Dichlorphenol indophenol (2,6-DPIP). Kết quả đã khảo sát được giá trị tối ưu của một số thông số của máy chuẩn độ điện thế; tìm được dung môi tối ưu là H2C2O4 cho quá trình chiết mẫu và môi trường tối ưu cho phản ứng chuẩn độ acid ascorbic với chất chuẩn 2,6 – DPIP (pH 4,0). Từ khoá: 2,6- Dichlorphenol indophenol, Chuẩn độ hiệu điện thế, Vitamin C 1. ĐẶT VẤN ĐỀ Vitamin C hay acid ascorbic là một vitamin tan trong nước, có thể tìm thấy trong nhiều hệ sinh học và thực phẩm như rau tươi và trái cây, cụ thể là cây có múi như cam, chanh, bưởi,…. Nó phân bố rộng rãi trong tế bào thực vật, nơi đóng nhiều vai trò quan trọng trong quá trình tăng trưởng và trao đổi chất. Là một chất chống oxy hóa mạnh, vitamin C có khả năng loại bỏ một số loại oxy phản ứng khác nhau, giữ cho chất chống oxy hóa a-tocopherol liên kết màng ở trạng thái khử, hoạt động như một yếu tố duy trì hoạt động của một số enzym (bằng cách giữ các ion kim loại trong trạng thái giảm), dường như là chất nền cho quá trình sinh tổng hợp oxalat và tartrat và có vai trò trong việc chống stress (Arrigoni & De Tullio, 2002; Davey, 2000; Klein & Kurilich, 2000). Vitamin C đóng vai trò quan trọng trong quá trình sinh tổng hợp collagen (Shingo Tajima, 1982) , sự hấp thụ sắt, và kích hoạt phản ứng miễn dịch và được tham gia trong việc chữa lành vết thương. Nó cũng hoạt động như một chất chống oxy hóa mạnh mẽ chống lại các gốc tự do gây ra bệnh. Ngoài ra, vitamin C còn làm tăng sức đề kháng của cơ thể, kích thích thượng thận bài tiết các corticosteroid, làm tăng sự trưởng thành của hồng cầu. Thiếu vitamin C có thể làm vết thương chậm lành, khiếm khuyết cấu tạo răng, vỡ mao mạch gây xuất huyết dưới da, chảy máu chân răng (Nguyễn Thị Hiền và nnk, 2010). Vitamin C có nhiều trong các loại rau quả tươi như ớt, nước cam, chanh, quýt và có hàm lượng cao trong rau xanh, tiêu, khoai tây, cải brussel, rau cải, cà chua, ớt. Tên theo IUPAC của Vitamin C: 2-oxo-L-threo-hexono-1,4- lactone-2,3-enediol; có công thức phân tử: C6H8O6 và công thức cấu tạo: 184 2,6-Dichlorophenol indophenol (DPIP) là một hợp chất hóa học được sử dụng làm thuốc nhuộm oxi hóa khử. Khi bị oxy hóa, DPIP có màu xanh với độ hấp thụ cực đại ở 600nm; khi giảm, DPIP không màu. DPIP có thể được sử dụng để đo tốc độ quang hợp. DPIP có công thức phân tử: C12H7NCl2O2 và công thức cấu tạo: Hiện nay, có nhiều phương pháp được sử dụng để xác định vitamin C bao gồm chuẩn độ, quang phổ, điện hoá, sắc ký, động học…. Nhưng do những hạn chế sẵn có, những kỹ thuật (trừ chuẩn độ và quang phổ) không thường được sử dụng để phân tích thường xuyên. Tuy nhiên, phương pháp chuẩn độ điện thế được quan tâm nhiều vì dễ dàng tiếp cận, chi phí tương đối thấp và độ nhạy tương đối, thích hợp cho việc xác định hàm lượng vitamin C bằng nhiều loại thuốc thử. Do đó tôi tiến hành khảo sát và xây dựng quy trình xác định vitamin C bằng phương pháp chuẩn độ điện thế sử dụng thuốc thử DPIP (TCVN 6427-2:1998). 2. PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1. Thực nghiệm Hoá chất: Dung dịch acid oxalic 2%, dung dịch CH3COONa 10%, dung dịch Vitamin C 0.002N, dung dịch chuẩn C12H6Cl2NNaO2.2H2O 0.002N, dung dịch NaOH 1M, dung dịch CH3COONa 1M, dung dịch HCl 1M, dung dịch đệm acetate pH = 4.46. Dụng cụ: Máy chuẩn độ điện thế, tủ hút, cân phân tích, các dụng cụ thường sử dụng trong phòng thí nghiệm 2.2. Phương pháp phân tích DPIP là một thuốc nhuộm oxi hóa khử thường được sử dụng như một tác chất của các phản ứng quang hoá. Phản ứng này có tính thuận nghịch, DPIP không màu, có thể bị oxy hoá sang màu xanh (Wikipedia,2015). Nếu có mặt vitamin C, một tác nhân khử, thuốc nhuộm sẽ từ màu xanh chuyển sang màu hồng trong môi trường acid và bị khử thành một hợp chất không màu bởi acid ascorbic. DPIP (màu xanh) + H + → DPIPH (màu hồng) DPIPH (màu hồng) + Vitamin C– → DPIPH2 (không màu) ...