Phản ứng của các loại đường trong nước peptone Enterobacteriaceae. Một loạt các ống nước peptone có chứa các loại đường khác nhau (glucose, mannitol, lactose, sucrose, dulcitol) hoặc urê có thể được dùng để phân biệt chất sinh hoá enterobacteria. Acid sản xuất đã chỉ thị màu đỏ và sản xuất khí đốt được đánh dấu bởi các bong bóng vào ống đảo ngược
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Atlas de poche de microbiologiel - part 5Atlas de microbiologie médicale168-172 Réactions des sucres en eau peptonée des entérobactéries. Une sériede tubes deau peptonée contenant différents sucres (glucose, mannitol, lactose, sucrose,dulcitol) ou de lurée peuvent être utilisés pour différencier biochimiquement les entérobactéries.La production dacide fait virer lindicateur au rouge, et la production de gaz est mise enévidence par les bulles dans le petit tube renversé. (Sucres en eau peptonée, indicateurdAndrade, 24 h à 37 Q169 Escherichia coli170 Shigella sonnei.171 Salmonella typhimurium.172 Profeus mirabilis. 168 169124 Bactéries et in/BClien» JwûHnennes172 125 Atlas de microbiologie médicale173 Réaction dindole en tube. Certaines bactéries hydrolysent le tryptophane enindole, qui réagit avec le réactif de Kovacs en donnant une coloration rouge. £. co/i est indolepositive (droite), K pneumoniae est indole négative (gauche). (Eau peptonée, 24 h à 37 °C)174 Réaction au rouge de méthyle. Les entérobactéries peuvent plus ou moins abaisser le pH dun milieu par fermentation du glucose Avec le rouge de méthyle, seules les espèces capables dabaisser le pH à des valeurs proches de 5 font virer lindicateur au rouge. E co/i est rouge de méthyle positif (droite), Enterobacter cloacae est rouge de méthyle négatif (gauche). (Glucose phosphate en eau peptonée, 24 h à 37 °Q 126 Bactéries et infections bactériennes 175 Réaction de Voges-Proskauer (VP). Certaines entérobactéries fermentent le glu-cose en produisant de lacétylméthylcarbinol, qui est oxydé et reagit avec la-naphtol en don-nant une coloration rouge Enterobacter aerogenes est VP positif (droite), E. col! est VP négatif(gauche). (Glucose phosphate en eau peptonée , 48h à 37 °C, ajout de potasse et da-naph-lol, et lecture au bout de 5 min) 176 Milieu au citrate de Simmons. Permet de distinguer les entérobactéries qui peuventutiliser le citrate comme seule source carbonée. Lindicateur est le bleu de bromothymol qui vire duvert au bleu au cours de cette réaction alcaline. Citrobacfer freundii est citrate de Simmons positif(à droite), E. co/iest négatif (à gauche). (Milieu au citrate de Simmons, 18 h à 37 °C] 127Atlas de microbiologie médicale177 Réduction des nitrates. Le germe à étudier est incubé dans un bouillon contenantdes ions nitrate Au bout de 4 h, on met en évidence la réduction des nitrates en nitrites parréaction avec lacide sulfanilique et lalpha-naphtylamine, qui donne une coloration rouge.Réaction positive E. coli (à droite); réaction négative : P aeruginosa (à gauche). (Bouillonnitrate, 4 h à 37 °Cj 178 Réaction de désamination de la phénylalanine. Certaines entérobacté- ries (Proteus, Providenciaf produisent, à par- tir de phénylalanine, de lacide phényipyruvique, qui se colore en brun-vert en présence de chlorure ferrique Réaction positive : Proteus mirabilis (à droite), réaction négative : £. co/i (à gauche). (Gélose à la phénylalanine, 18 h à 37 °C, puis quatre gouttes de chlorure ferrique à 10%, colora- tion observée après 5 min)128Bactéries et infections bactériennes 179 Galerie API 10S pour entérobactéries. Ces galeries contiennent des réactifs déshydratés dans des cupules, auxquels on ajoute une suspension du germe à étudier La galerie est alors incubée pendant la nuit, et les réactions lues. Cette méthode permet de traiter rapidement un grand nombre de souches Les tests sont, de gauche à droite, ONPG, GLU, ARA, LDC, ODC, CIT, H,S, URÉE, TDA, INDOLE (la présence dune nitrate réductase peut être révélée dans la cupule GLU, Nd1] A Escherichia coli B Klebsiella pneumoniae C Shigella sonne/ (Galeries API 10S, 18 h à 37 °Q 180 Galerie API 10S (suite). D Salmonella lyphimurium E Profeus mirabilis F Ctrobacter freundii (Galeries API 10S, 18 h à 37 C) 129Atlas de microbiologie médicale 181 Réactions en milieu de ...