Bài giảng Di truyền thực vật - Nhóm 8: Một số kỹ thuật phổ biến trong công nghệ di truyền

Bài giảng cung cấp cho người học các kiến thức: Một số kỹ thuật phổ biến trong công nghệ di truyền. Hi vọng đây sẽ là một tài liệu hữu ích dành cho các bạn sinh viên đang theo học môn dùng làm tài liệu học tập và nghiên cứu.
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Bài giảng Di truyền thực vật - Nhóm 8: Một số kỹ thuật phổ biến trong công nghệ di truyềnMỘT SỐ KỸ THUẬT PHỔ BIẾN TRONGCÔNG NGHỆ DI TRUYỀNThành viên nhóm1) Lê Công Phúc2) Trần Văn Phong3) Nguyễn Thiện Phước4) Nguyễn Thị Thùy PhươngGiảng Viên TS. Nguyễn PhươngGiới ThiệuVới sự phát triển mạnh mẽ của các nghành khoa học khácnhư vật lý học, toán học, hóa học, di truyền học đã và đang khámphá rất nhiều quy luật về sự tồn tại và lưu truyền sựsống và trở thành một mũi nhọn trong nghiên cứu sinh họcNhững thành tựu rực rỡ của di truyền học đã đem lại nhữngnhận thức mới về cấu tạo và sự vận hành bộ máy di truyền của cơthể sống. Cùng với sự phát triển mạnh mẽ của di truyền học, mộtlĩnh vực nghiên cứu mới của di truyền học ra đời, đó là kỹ thuật ditruyền hay còn gọi là công nghệ gen hoặc công nghệ di truyền.Và đây là hai kỹ thuật phổ biến trong công nghệ di truyềntạo vecto chuyển gen và kỹ thuật nhân đoạn DNA_PCR1.Tạo vecto chuyển genKhái niệm vector chuyển gen:Vector là phân tử DNA nhỏ (ngắn) dạng thẳng hoặcdạng vòng, trong đó, người ta sẽ cài một mảnh DNA (gen quí)cần nghiên cứu. Những mảnh DNA đã được cài gọi là đoạncài (insert) hoặc DNA ngoại lai hoặc DNA lạ.Các phân tử DNA nhỏ này thường là những thựckhuẩn thể hoặc các plasmid mà trong bộ gen của chúng có tínhiệu cần thiết cho chúng tái bản, nhưng chúng lại không biếttái bản (sinh sôi nẩy nở) một mình. Chúng cần đưa vào trongcác tế bào chủ (ví dụ như tế bào vi khuẩn chẳng hạn).1. 1 Công nghệ tạo thực vật chuyển gen nhờ vikhuẩn agrobacterium)A.tumefaciens là loại vi khuẩn gây bệnh khối u ở thực vật sống trongđất, trong lĩnh vực biến nạp gen nó được sử dụng làm vectơ đặc biệt đểchuyển các gen ngoại lai vào thực vật nhằm tạo ra những thực vật manggen có các đặc tính mong muốn. Bản chất tự nhiên của vi khuẩnA.tumefaciens là xâm nhập vào chỗ vết thương, kích thích hình thànhcác chất độc có bản chất phenolic, chất này có tác dụng làm lành vếtthương, vừa là kết hợp chất dẫn dụ vi khuẩn xâm nhập, lại có vai trònhư một chất kích hoạt vùng gen vir thuộc Ti-plasmid kích thích cho sựcắt đoạn T-DNA (tại vùng bờ trái và bờ phải) để gắn vào genom thựcvật. Ti-plasmid đã chuyển một đoạn DNA của Ti-plasmid nhập vào gencủa cây.• Để khai thác và sử dụng Agrobacterium như một vectorchuyển gen, các nhà khoa học đã loại bỏ các gen gây khối u vàgen mã hóa opine của T_DNA và thay vào đó là các markerchọn lọc, trong khi vẫn duy trì các vùng bờ phải và bờ trái củaT_DNA với các gen vir,Gen chuyển được xen vào giữa các vùng bờ của T_DNA, nósẽ được chuyển vào tế bào và trở nên hợp nhất với NST của tếbào. Tuy nhiên một vài yếu tố ảnh hưởng đến hiệu quả biếnnạp là loại mô được biến nạp, giai đoạn phát triển của mô, mứcđộ khởi đầu của vi khuẩn Agrobacterium sử dụng, môi trườngđể nuôi cấy mô sau biến nạp, marker được sử dụng để chọn lọcthể biến nạp, loại vector sử dụng và kiểu gen của thực vật.