Bài giảng Thực hành vi sinh vật học - Đào Hồng Hà

Bài giảng Thực hành vi sinh vật học - Đào Hồng Hà cung cấp cho học viên các kiến thức về những quy tắc an toàn trong phòng thí nghiệm vi sinh vật; thiết bị, dụng cụ phòng thí nghiệm vi sinh vật và các phương pháp tiệt trùng vi sinh vật; phương pháp pha chế môi trường nuôi cấy vi sinh vật; phương pháp nuôi cấy vi sinh vật; phương pháp quan sát vi sinh vật bằng kính hiển vi quang học;... Mời các bạn cùng tham khảo chi tiết nội dung bài giảng!
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Bài giảng Thực hành vi sinh vật học - Đào Hồng Hà BÀIGIẢNGTHỰCHÀNHVISINHVẬTHỌC ĐàoHồngHàNHỮNGQUYTẮCANTOÀNTRONGPHÒNGTHÍNGHIỆM VISINHVẬT Thaotácantoànlàyêucầucựckỳ quantrọngđốivớithínghiệmvisinhvật.Visinhvậtcókíchthướcnhỏbémàmắtthườngkhôngnhìnthấyđược.Trongquátrìnhlàmthínghiệm,chúngtathườngthaotácvớisốlượngrấtlớnvàđậmđặctế bàovisinhvật. Bêncạnhnhữnggiống,loàivisinhvậtcóíchlànhữnggiống,loàicókhảnănggâybệnhvà cóhạiđốivớisứckhỏeconngười.Mặtkhác,trongquátrìnhthínghiệmchúngtacũngphảisử dụngnhiềuloạihóachất,trongđócónhữnghóachấtcóđộctính.Chínhvìthế,ngườilàmthínghiệmtrongphòngthínghiệmvisinhvậtcầntuânthủ cácquitắccơbản sauđây: 1.Nhữngquiđịnhchung: Nhữngngườikhôngcónhiệmvụkhôngđượcvàophòngthínghiệm. KhivàophòngthínghiệmphảimặcáoBlouse(càikhuykín),cộttócgọngàng. Khôngnóichuyện ồnào,giữ gìntrậttự.Khôngănuống,hútthuốctrongphòng kiểmnghiệm. Mangkhẩutrang,găngtaykhithaotácvớivisinhvậtvàhóachất. Trênbànthínghiệmchỉđể vậtdụngthínghiệm,sốghichép,giấyghichép.Tất cảcácvậtdụngcánhân,áokhoác,túixách,sáchvở,…phảiđểđúngnơiquiđịnh. Trướcvàsaukhikếtthúcthínghiệm,phảisáttrùngmặtbànbằngcáchóachấtsát trùngcồn70%hoặcdungdịchdiệtkhuẩnkhác(lysol5%,amphyl10%,chlorox10%)đã chuẩnbịsẵnvàlaukhôbằnggiấyvệsinh. Cầnghichútênchủng,ngàythángthínghiệm,ngườilàthínghiệmlêntấtcảcác hộppetri,ốngnghiệm,… Tuyệtđốikhôngđể canhtrườnghayvậtphẩmcóvisinhvậtdấylênquầnáo, sáchvởvàdụngcụcánhân.Đồngthờicũngphảichúýbảovệdavàquầnáokhỏibịdínhhóachấtvàthuốcnhuộm. CẩnthậnkhithaotácvớiđèncồnhoặcđènBunsen.Tắtngọnlửakhichưacónhu cầusửdụnghoặcngaysaukhithựchiệnxongmỗithaotác.Tuyệtđốikhôngdùngđèncồn đểmồilửađèncồn. Sửdụngquảbópcaosukhithaotácốnghútđịnhlượng(pipette),Tuyệtđốikhông hútbằngmiệng. Khôngtựýsửdụngtrangthiếtbị,dụngcụtrongphòngthínghiệmkhichưađượchướngdẫncụ thể.Sử dụngtheohướngdẫn,hếtsứcthậntrọng,tránhlàmđổ vỡ vàhưhỏng. Tấtcả cácvậtliệubị nhiễmbẩn,môitrườngchứahoặcnhiễmvisinhvậtcần phảiđượckhửtrùngtrướckhivứtbỏhoặcsửdụnglại.Cácdụngcụ,bìnhchứanhiễmvisinhvậtcầnđượcngâmvàodungdịchdiệtkhuẩn(nướcjavel)trướckhirửavàtáisửdụng. Kếtthúcthínghiệmphảivệsinhcácthiếtbị,dụngcụđãsử dụngtheođúngqui trìnhvàsắpxếpvàođúngnơiquiđịnh. Rửataysạchsẽtrướckhirờiphòngthínghiệm. Tấtcảcáctrườnghợptainạnphảibáocáochocánbộhướngdẫnthínghiệmđểkịpthờivàxửlý. 2.Mộtsố lưuývớisinhviênnhằmđạtkếtquả tốttrongthựchànhvisinh vật a.Trướckhithựchành Cầnđọcbàitrướcnộidungtoànbàiđể hìnhdungđượckhốilượngcôngviệcsẽ Trang2làm. Hiểurõnguyêntắc,mụcđíchcủacácthínghiệm. Đọccẩnthậncáchtiếnhànhthínghiệm b.Tronggiờthựchành: Ghichúcẩnthậnnhữngcăndặncủagiảngviênvềcácthaotácvàquitrìnhthực hành. Thựchiệnthínghiệmtheođúnghướngdẫncủagiảngviên. Trongquátrìnhthínghiệmcónhữngthaotác,côngđoạnkhôngrõcầnhỏilại giảngviênhướngdẫn. Ghichépcẩnthậncácchúýquantrọngcủathínghiệmvàkếtquả củamỗithínghiệm. c.Kếtthúcthựchành: Làmbáocáothựchànhtheocácyêucầutrongmục5củatừngbàithínghiệmvà theoyêucầucủagiảngviên. Trang3 BÀI1 THIẾTBỊ,DỤNGCỤPHÒNGTHÍNGHIỆMVISINH VẬTVÀCÁCPHƯƠNGPHÁPTIỆTTRÙNGVISINHVẬT1.Thiếtbịphòngthínghiệmvisinhvậthọc 1.1.Tủsấy(vacuumoven):totừ60oC–200oC,dùngđểsấykhô,khửtrùngcácloại dụngcụ chịuđượcsứcnóngkhô,chủ yếulàdụngcụ thủytinh,kimloại.Tùyvàođốitượngcầnkhử khuẩnmàsấy ở chế độ tovàthờigiankhácnhau,thườngsấy ở 160oC/2giờ,hoặc180oC/30phút. Hình.Tủsấy 1.2.Tủ ấm(incubatororetuve):to từ 20oC–60oC,cóchế độ ổnđịnhnhiệtđộ,đượcsử dụngđể nuôicấyvisinhvậttạinhiệtđộ thíchhợpchosự sinhtrưởngvàphát triểncủachúng.Tùyvàođốitượngnuôicấymàủởt okhácnhauđểvisinhvậtcóthểphát triểntốt.Vídụ:Coliform30oC/24h–48h,E.colithíchhợpở44oC/24h–48h. 1.3.Tủlạnhhaytủmát(freezer):dùngbảoquảnmôitrườngđãphachế,giốngvikhuẩn,cácchế phẩmsinhhọc(vaccin,huyếtthanh, đĩagiấykhángsinh,…),hóachất,thuốcthửdễphânhủyởnhiệtđộthường. 1.4.Nồihấpướt(Autoclave):Thiếtbịnàycấpnhiệtbằnghơinướcởápsuấtcao(hơinướcbãohòa ở ápsuấtcao),đượcsử dụngđể hấpkhủ trùngmôitrường,mộtsốnguyênliệuvàdụngcụ thínghiệm.Tùyđốitượngmàsử dụng ở chế độ nhiệtđộ vàápsuấtthíchhợp,thườngdùng ở 121oC/1atm/15phút.Hay127oC/1.5atm/30phútvớimôitrườngđất,117oC/0.8atm/15phútvớimôitrườngchứanhiềuđường,môitrườngsữa…… Thểtíchmôitrườngnuôi Thờigianhấptiệttrùng cấy(ml) tốithiểu(phút) 25 20 50 25 100 28 ...