Luận văn : ĐÁNH GIÁ KHẢ NĂNG ĐÁP ỨNG MIỄN DỊCH ĐỐI VỚI PROTEIN MBP-VT2eB TRÊN HEO part 2

1.1 ĐẶT VẤN ĐỀ Độc tố verotoxin VT2e do E. coli tiết ra là tác nhân chính gây bệnh phù trên heo sau cai sữa gây thiệt hại lớn cho ngành chăn nuôi heo ở nước ta. Việc sử dụng kháng sinh để điều trị phù ở heo tuy có hiệu quả nhưng gây ra nhiều triệu chứng phụ như rối loạn tiêu hoá, tạo ra các chủng vi sinh vật kháng kháng sinh gây khó khăn cho những lần trị bệnh về sau. Do đó sử dụng vacxin để phòng bệnh phù do E. coli trên heo được xem...
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Luận văn : ĐÁNH GIÁ KHẢ NĂNG ĐÁP ỨNG MIỄN DỊCH ĐỐI VỚI PROTEIN MBP-VT2eB TRÊN HEO part 2 1 PHẦN 1 MỞ ĐẦU1.1 ĐẶT VẤN ĐỀ Độc tố verotoxin VT2e do E. coli tiết ra là tác nhân chính gây bệnh phù trênheo sau cai sữa gây thiệt hại lớn cho ngành chăn nuôi heo ở nước ta. Việc sử dụng kháng sinh để điều trị phù ở heo tuy có hiệu quả nhưng gây ranhiều triệu chứng phụ như rối loạn tiêu hoá, tạo ra các chủng vi sinh vật kháng khángsinh gây khó khăn cho những lần trị bệnh về sau. Do đó sử dụng vacxin để phòng bệnhphù do E. coli trên heo được xem là liệu pháp thích hợp nhất. Một số tác giả đã thửnghiệm vacxin nhược độc, hoặc vacxin chết ...bước đầu ghi nhận hiệu quả bảo vệ nhấtđịnh. Tuy vậy, các phản ứng phụ vẫn là những trở ngại lớn cho việc áp dụng rộng rãinhững loại vacxin này. Vacxin tái tổ hợp được tạo ra bằng cách loại bỏ yếu tố gâybệnh của vi sinh vật mà vẫn giữ được đặc tính kháng nguyên của chúng đang được cácnhà khoa học quan tâm nhằm khắc phục những nhược điểm nói trên. Hiện nay, TS. Nguyễn Ngọc Hải và các cộng sự đã thành công trong việc tạo rađược E. coli mang gen mã hoá cho tiểu phần B của độc tố VT2e và tinh sạch đượcprotein này. Từ thực tế đó, được sự chấp nhận của bộ môn Công Nghệ Sinh Học, vớisự hướng dẫn của TS. Nguyễn Ngọc Hải, chúng tôi thực hiện đề tài: “ Đánh giá khảnăng đáp ứng miễn dịch đối với protein tái tổ hợp MBP-VT2eB trên heo ”.1.2 MỤC TIÊU VÀ YÊU CẦU Mục tiêu- Đánh giá khả năng ứng dụng protein tái tổ hợp MPB-VT2e trong sản xuất vacxinphòng bệnh phù do E. coli trên heo. Yêu cầu- Xây đựng thí nghiệm kiểm tra khả năng đáp ứng miễn dịch của MBP -VT2eB trên heo. Định tính kháng huyết thanh bằng phương pháp khuyếch tán trên thạch. Xác định liều TCID50 (Tissue Culture Infectious Dose) trên tế bào vero Kiểm tra hiệu giá kháng thể kháng MBP-VT2eB bằng phương pháp trung hòa độc tố trên tế bào vero. 1 2 PHẦN 2 TỔNG QUAN TÀI LIỆU2.1 VACXIN 2.1.1 Lịch sử ra đời vacxin Hiện nay vacxin được xem là một phương pháp hữu hiệu để phòng bệnh trênngười và động vật. Từ xa xưa khi mà con người vẫn chưa hiểu biết về hệ thống miễndịch đặc hiệu thì người Trung Quốc đã biết sử dụng những vảy từ người bị bệnh đậumùa để phòng bệnh này. Năm 1798, Edward Jenner đã quan sát thấy hiện tượng nhữngngười vắt sữa bò thường tiếp xúc với những con bò bị đậu mùa thì không bị nhiễmbệnh đậu mùa. Từ đó ông sử dụng virus gây bệnh đậu mùa trên bò như một vacxinchống lại bệnh đậu mùa trên người. Sau này, người ta biết rằng đó là nhờ nhữngprotein trên bề mặt virus gây bệnh đậu mùa trên bò tương tự như những protein có trênbề mặt của virus gây đậu mùa trên người. Và Pasteur là người đặt ra nền móng choviệc sử dụng vacxin khi khám phá ra nguyên lý: “Muốn phòng bệnh phải gây cho t húbệnh nhẹ”. Từ đó đến nay, người ta đã sản xuất ra nhiều loại vacxin phòng nhiều loạibệnh do vi khuẩn, virus, kí sinh trùng gây ra như: bệnh đậu mùa, bệnh lở mồm longmóng, bệnh tả...với nhiều dạng tồn tại khác nhau. Nhưng dù bất cứ dạng nào vacxincũng mang một chức năng chung là tạo miễn dịch cho cơ thể người và động vật, phòngchống lại các loại bệnh truyền nhiễm và nhiều tác nhân gây hại khác [4]. 2.1.2 Đáp ứng miễn dịch 2.1.2.1 Kháng nguyên[4] a. Định nghĩa Kháng nguyên là một chất tự nhiên hay tổng hợp có khả năng gây đáp ứng miễn dịch khi được đưa vào cơ thể của một động vật thích hợp hoặc là chất có khả năng phản ứng với một kháng thể hay một tế bào của hệ thống miễn dịch. Trên cấu trúc phân tử của kháng nguyên có sự hiện diện của các quyết định kháng nguyên gọi là epitope. b. Tính chất của kháng nguyên  Tính sinh miễn dịch: tính sinh miễn dịch của một kháng nguyên phụ thuộc vào: 2 3 Trọng lượng phân tử : kháng nguyên phải có trọng lượng phân tử đạt tối thiểu là 10.000Da. Tuy nhiên có một số chất có trọng lượng phân tử nhỏ nhưng có tính sinh miễn dịch vì chúng gắn với protein khác để trở thành kháng nguyên hoàn chỉnh, ngược lại một số chất có trọng lượng phân tử lớn nhưng không có tính sinh miễn dịch. Lượng epitope khác loài vì hệ thống miễn dịch không phản ứng với các epitope cùng loài.  Tính đặc hiệu Tính đặc hiệu của kháng nguyên do những epitope quyết định. Các epitope là vị trí để kháng thể hay các lympho T mẫn cảm gắn với kháng nguyên một cách đặc hiệu. Tính đặc hiệu của kháng nguyên rất nghiêm ngặt tuy nhiên đôi khi vẫn xả ...