Nghiên cứu sử dụng nano bạc trong nhân giống in vitro lan Hồ điệp vàng (Phalaenopsis sp.)

Trong nghiên cứu này, nano bạc (NS) được sử dụng làm chất khử trùng mẫu phát hoa lan Hồ điệp vàng, đồng thời NS được bổ sung vào môi trường nuôi cấy in vitro.
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Nghiên cứu sử dụng nano bạc trong nhân giống in vitro lan Hồ điệp vàng (Phalaenopsis sp.)Công nghệ sinh học & Giống cây trồng NGHIÊN CỨU SỬ DỤNG NANO BẠC TRONG NHÂN GIỐNG IN VITRO LAN HỒ ĐIỆP VÀNG (Phalaenopsis sp.) Đồng Huy Giới1, Bùi Thị Thu Hương2 1,2 Học viện Nông nghiệp Việt Nam TÓM TẮT Trong nghiên cứu này, nano bạc (NS) được sử dụng làm chất khử trùng mẫu phát hoa lan Hồ điệp vàng, đồng thời NS được bổ sung vào môi trường nuôi cấy in vitro. Kết quả đã xác định được: (i) Nồng độ dung dịch nano bạc thích hợp nhất cho việc khử trùng mẫu phát hoa lan Hồ điệp vàng là 125 ppm, thời gian xử lí 45 phút, tỉ lệ mẫu sống sạch thu được là 72,13%; (ii) 27,56% mẫu lá in vitro lan Hồ điệp vàng tạo PLB (protocorm-like body) trong môi trường có bổ sung 4 ppm NS; (iii) Bổ sung 4 ppm NS vào môi trường tạo chồi lan Hồ điệp vàng từ PLB cho hiệu quả tạo chồi tốt nhất với tỉ lệ tạo chồi đạt 92,53%, hệ số nhân chồi là 2,97 lần và chiều cao chồi trung bình đạt 0,87 cm; (iv) Môi trường có bổ sung 2 - 4 ppm NS là thích hợp nhất để nhân nhanh chồi lan Hồ điệp vàng từ chồi in vitro với tỉ lệ mẫu tạo chồi đạt từ 60,00 - 63,33%, hệ số nhân chồi đạt từ 2,33 - 2,37 lần. Từ khóa: Lan Hồ điệp, nano bạc, phát hoa, PLB.1. ĐẶT VẤN ĐỀ quá trình nuôi cấy mô là sự nhiễm nấm và vi Lan Hồ điệp (Phalaenopsis sp.) là một trong khuẩn của mẫu cấy, gây ảnh hưởng lớn tới hiệunhững giống hoa lan rất được yêu thích trên quả nuôi cấy và chất lượng cây con, việc sửthế giới (Griesbach, R. J., 2002). Với màu sắc dụng các hóa chất khử trùng như HgCl2,đa dạng, kiểu dáng sang trọng và tao nhã đã Ca(ClO)2 gây ô nhiễm môi trường, gây độc hạilàm cho nhu cầu chơi lan Hồ điệp ngày càng cho người và các sinh vật khác (Kharrazi vàlớn và trở thành cây trồng đem lại hiệu quả cộng sự, 2011).kinh tế cao. Tuy nhiên, lan Hồ điệp là loài sinh Hiện nay, công nghệ nano là một lĩnh vựctrưởng chậm và rất khó nhân giống, thường mới nhưng mang lại nhiều hứa hẹn với nhữngcho hệ số nhân giống thấp trong điều kiện ứng dụng to lớn trong rất nhiều lĩnh vực khácvườn ươm và môi trường tự nhiên. nhau. Chế phẩm nano cũng được sử dụng có Biện pháp nhân giống lan Hồ điệp phổ biến hiệu quả trong khử trùng mẫu nuôi cấy mô tếhiện nay là nuôi cấy in vitro từ mầm ngủ phát bào thực vật, bên cạnh đó nano bạc còn có táchoa, phương pháp này có ưu điểm là không dụng tích cực tới sự phát sinh hình thái của câylàm tổn thương cây mẹ, so với việc nhân giống in vitro (Rostami A.A. và Shahsavar A., 2009;từ đỉnh sinh trưởng. Hơn nữa, việc nhân giống Shokri và cộng sự, 2015; Đồng Huy Giới vàin vitro từ mầm ngủ phát hoa có thể tạo ra cây Ngô Thị Ánh, 2017). Chính vì vậy, nghiên cứucon sạch bệnh và đồng nhất về di truyền, điều này nhằm bước đầu sử dụng nano bạc để nângmà phương pháp gieo hạt truyền thống không hiệu quả trong nuôi cấy mô lan Hồ điệp.thể đạt được (Nguyễn Thị Pha và cộng sự, 2. PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU2011). Tuy nhiên, tình hình sản xuất cây giống 2.1. Vật liệu, hóa chấtlan Hồ điệp ở nước ta hiện nay vẫn chưa đáp Mẫu giống lan Hồ điệp vàng nhập khẩu từứng được nhu cầu ngày càng tăng của thị Đài Loan; dung dịch nano bạc với kích thướctrường. Nguyên nhân là do các phòng nuôi cấy hạt dao động 15 - 20 nm được điều chế tại Bộmô thường chủ yếu tập trung vào việc lưu giữ môn Sinh học, khoa Công nghệ sinh học, Họcnguồn giống lan mà không sản xuất cây giống viện Nông nghiệp Việt Nam.đại trà, vì thế hầu hết các cơ sở sản xuất hoa 2.2. Phương pháp nghiên cứulan trong nước đều nhập cây con từ một số 2.2.1. Phương pháp khử trùng mẫunước như Đài Loan, Trung Quốc, Thái Lan. Phát hoa lan Hồ điệp vàng sau khi thu sẽBên cạnh đó, một vấn đề luôn gặp phải trong được rửa dưới vòi nước, sau đó cắt thành từng TẠP CHÍ KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ LÂM NGHIỆP SỐ 1 - 2019 19 Công nghệ sinh học & Giống cây trồngđoạn có chứa mắt ngủ. Rửa lại mẫu bằng nước Nhân nhanh chồi từ chồi in vitro: Các chồicất rồi đưa mẫu vào trong box cấy vô trùng, in vitro được nuôi cấy trên môi trường MS +tiến hành lắc mẫu trong cồn 70o trong 1 phút, 10% nước dừa + 3 mg/l BA (Nguyễn Thị Sơnsau đó lắc mẫu với dung dịch nano bạc với các và cộng sự, 2014) có bổ sung nano bạc vớinồng độ khác nhau (75 ppm, 100 ppm, 125 nồng độ từ 2 đến 8 ppm. Sau 6 tuần nuôi cấy,ppm, 150 ppm) trong thời gian 45 phút hoặc theo dõi cá ...