Nghiên cứu tối ưu điều kiện thu nhận enzyme protease từ sò lụa và thử nghiệm thủy phân thịt cá

Đề tài này tiến hành tách chiết protease từ sò lụa và bước đầu thử nghiệm sử dụng enzyme thu được để thủy phân thịt cá. Kết quả nghiên cứu xác định được điều kiện tối ưu tách chiết protease thích hợp từ sò lụa là đệm phosphat pH 7 với tỷ lệ dung môi/mẫu là 1,8/1, nhiệt độ chiết tối ưu là 31oC và thời gian chiết tối ưu là 13 phút. Thu được CPE protease bằng phương pháp kết tủa với aceton 96%, tỷ lệ enzyme/dung môi là 1/2, thời gian tủa là 15 phút. Mời các bạn cùng tham khảo!
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Nghiên cứu tối ưu điều kiện thu nhận enzyme protease từ sò lụa và thử nghiệm thủy phân thịt cá Kỷ yếu Hội nghị khoa học NGHIÊN CỨU TỐI ƯU ĐIỀU KIỆN THU NHẬN ENZYME PROTEASE TỪ SÒ LỤA VÀ THỬ NGHIỆM THỦY PHÂN THỊT CÁ Trần Quốc Đảm*, Đào Thị Tuyết Mai Trường Đại học Công nghiệp Thực phẩm TP.HCM *Tác giả liên lạc: damtq@cntp.edu.vn TÓM TẮT Protease có khả năng thủy phân protein thành các peptid và acid amin hay còn gọi là dịch đạm thủy phân được ứng dụng trong nhiều ngành công nghiệp. Động vật thủy sản có chứa hệ enzyme protease có hoạt tính cao nên việc nghiên cứu thu nhận protease từ động vật thủy sản được rất nhiều nhà khoa học quan tâm. Trong nghiên cứu này, chúng tôi tiến hành tách chiết protease từ sò lụa và bước đầu thử nghiệm sử dụng enzyme thu được để thủy phân thịt cá. Kết quả nghiên cứu xác định được điều kiện tối ưu tách chiết protease thích hợp từ sò lụa là đệm phosphat pH 7 với tỷ lệ dung môi/mẫu là 1,8/1, nhiệt độ chiết tối ưu là 31oC và thời gian chiết tối ưu là 13 phút. Thu được CPE protease bằng phương pháp kết tủa với aceton 96%, tỷ lệ enzyme/dung môi là 1/2, thời gian tủa là 15 phút. Thử nghiệm thủy phân thịt cá bằng CPE protease ở nhiệt độ 55 oC, pH 6,0 và hiệu quả thủy phân thịt cá đạt được 33,38% sau thời gian thủy phân là 5 giờ. Từ khóa: Protease, nhuyễn thể 2 mảnh vỏ, sò lụa. STUDY ON OPTIMAL CONDITIONS FOR PRODUCTION OF PROTEASE ENZYME FROM PAPHIA UNDULATA AND EXPERIMENT ON FISH MEAT HYDROLYSIS Tran Quoc Dam*, Dao Thi Tuyet Mai Ho Chi Minh city University of Food Industry *Corresponding Author: damtq@cntp.edu.vn ABSTRACT Protease, known as a proteolytic enzyme which is used in many industries, is capable of hydrolyzing proteins into peptides or amino acids. Aquatic animals contain highly active proteolytic enzyme system, therefore the research on protease collection from aquatic species attracts much attention of various scientists. In this study, we extracted protease from undulated surf clam (Paphia undulata) and initially made experiments using enzyme to hydrolyze fish meat. The study result showed the optimal conditions for protease extraction rom Paphia undulate, including: phosphate buffer (pH 7) with a 1,8/1 ratio solvent/sample, the optimal extraction temperature and time was at 31oC and 13 minutes, respectively. Obtained protease by precipitation with acetone 96%, enzyme/solvent ratio of 1/2, the precipitation duration of 15 minutes. Hydrolysis of fish meat with protease at 55 oC, pH 6.0 and efficiency of fish meat hydrolysis achieved 33,38% after 5 hours of hydrolysis. Keywords: Protease, shellfish, paphia undulata. ĐẶT VẤN ĐỀ hơn. Có rất nhiều CPE được thương mại hóa Protease là một trong những enzyme được ứng và mang lại giá trị kinh tế khá lớn ở nhiều quốc dụng nhiều nhất hiện nay. Trong công nghiệp gia. thực phẩm, protesase có vai trò quan trọng Ngày nay, nghiên cứu thu nhận enzyme từ trong quá trình sản xuất nước nắm, trong sản nguyên liệu thủy sản đã và đang rất được xuất dịch đạm acid amin, sữa, phomai...[2, 8]. nhiều nhà nghiên cứu quan tâm [8]. Nội tạng Việc sử dụng chế phẩm enzyme (CPE) góp động vật thủy sản có chứa nhiều loại enzyme phần nâng cao chất lượng sản phẩm và giảm khác nhau và protease là loại có hoạt tính cao. thiểu tác động gây ô nhiễm môi trường rất Phần lớn các nghiên cứu chỉ tập trung thu nhiều so với việc sử dụng chất hóa học. Chính nhận protease từ hai đối tượng là cá, tôm và vì thế, CPE ngày càng được sử dụng phổ biến mực. Trong thực tế, nhuyễn thể 2 mảnh vỏ 96 Kỷ yếu Hội nghị khoa học cũng có chứa hệ enzyme protease có hoạt tính nước cất và đưa đi nghiền nhuyễn. Hỗn hợp cao [4, 10]. Hệ enzyme protease phân bố phần nội tạng sò được đưa đi ủ ở 35oC trong thời lớn ở nội tạng của động vật thủy sản. Do đó gian khoảng 30 phút trước khi tách chiết việc tận dụng nguồn phế liệu thủy sản để thu enzyme [5, 8]. nhận enzyme protease mang ý nghĩa to lớn Phương pháp thu nhận dịch protease thô từ [8]. sò lụa Nhuyễn thể 2 mảnh vỏ sử dụng thức ăn theo Nội tạng sò được chiết với dung môi theo tỷ lệ cơ chế lọc nên khả năng tích lũy cát sạn, tạp mẫu/dung môi là 1/2, ở nhiệt độ phòng trong chất độc tố trong cơ thể nói chung và nội tạng thời gian 15 phút. Sau khi chiết đủ thời gian nhuyễn thể nói riêng là rất lớn. Như vậy, việc tiến hành đưa mẫu chiết đi ly tâm lạnh với tốc loại bỏ nội tạng nhuyễn thể là cần thiết để độ 6000 vòng/phút, ở 4oC trong 15 phút. Sau đảm bảo sức khỏe cho người tiêu dùng khi sử khi ly tâm, thu phần dịch lỏng có chứa dụng các sản phẩm từ đối tượng này [7]. protease bên trên và loại bỏ phần kết tủa bên Tổng sản lượng nhuyễn thể 2 mảnh vỏ hằng dưới. Phần dịch lỏng này được gọi là dịch năm khoảng 400.000 tấn, trong đó sò 54.280 protease thô [5, 8]. tấn (Tổng Cục thủy sản, 2016). Bên cạnh việc Phương pháp tối ưu hóa khai thác từ tự nhiên, một số nhuyễn thể 2 Tối ưu hóa các điều kiện tách chiết protease từ mảnh vỏ cũng đã được nuôi ở nhiều tỉnh ven sò là theo quy hoạch thực nghiệm. Bố trí thí biển nên sản lượng thu được hàng năm là rất nghiệm và xử lý số liệu tối ưu bằng phần mềm ổn định. Design-Expert 10 (DX10). Để thu nhận enzyme protease có hoạt tính cao Phương pháp xác định hoạt độ của protease thì việc lựa chọn nhuyễn thể 2 mảnh vỏ và Hoạt độ protease được ...