Sàng lọc và xây dựng quy trình định lượng polyphenol từ một số dược liệu hướng tác dụng chống oxy hoá, bảo vệ gan

Nghiên cứu này nhằm góp phần tìm ra dược liệu, hoạt chất có tác dụng chống oxy hoá, bảo vệ gan làm cơ sở nghiên cứu thuốc có tác dụng hỗ trợ, bảo vệ gan. Nghiên cứu tiến hành trên 50 mẫu nguyên liệu được thu mua ở nhà thuốc y học cổ truyền, quận 5, Thành phố Hồ Chí Minh.
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Sàng lọc và xây dựng quy trình định lượng polyphenol từ một số dược liệu hướng tác dụng chống oxy hoá, bảo vệ gan Y Học TP. Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 22 * Số 1 * 2018 Nghiên cứu Y học SÀNG LỌC VÀ XÂY DỰNG QUY TRÌNH ĐỊNH LƢỢNG POLYPHENOL TỪ MỘT SỐ DƢỢC LIỆU HƢỚNG TÁC DỤNG CHỐNG OXY HOÁ, BẢO VỆ GAN Huỳnh Thị Như Thuý*, Nguyễn Hữu Lạc Thuỷ*, Võ Thị Bạch Huệ* TÓM TẮT Mở đầu – mục tiêu: Ngày nay, các chứng bệnh về gan đang trở thành một trong số bệnh phổ biến và có nguy cơ tử vong cao ở Việt Nam cũng như trên thế giới. Nh}n d}n thường dùng thuốc có tác dụng bảo vệ gan chủ yếu có nguồn gốc từ thực vật. Y học hiện đại sử dụng dưới dạng cao chiết toàn phần hay hoạt chất tinh khiết. Hiện nay, một trong những hướng phát triển là chứng minh tác dụng của cao toàn phần, cao ph}n đoạn và hoạt chất tinh khiết của dược liệu bằng những mô hình thử nghiệm với các trang thiết bị hiện đại để có kết luận khoa học. Nghiên cứu này nhằm góp phần tìm ra dược liệu, hoạt chất có tác dụng chống oxy hoá, bảo vệ gan làm cơ sở nghiên cứu thuốc có tác dụng hỗ trợ, bảo vệ gan. Đối tượng nghiên cứu: 50 mẫu nguyên liệu được thu mua ở nhà thuốc y học cổ truyền, quận 5, Tp Hồ Chí Minh. Phương pháp nghiên cứu: Sàng lọc tác dụng chống oxy hóa in vitro của 50 dược liệu bằng phương ph{p đo quang phổ với phép thử DPPH. Xây dựng và thẩm định quy trình định lượng polyphenol trong c{c dược liệu tiềm năng bằng phương ph{p đo quang với thuốc thử Folin - Ciocalteu. Thử tác dụng bảo vệ gan in vivo theo hướng chống oxy hóa của dược liệu tiềm năng trên mô hình tổn thương gan bằng cyclophosphamid. Kết quả: Sàng lọc in vitro tác dụng chống oxy hoá. Đã s|ng lọc được 5/50 dược liệu có hoạt tính chống oxy hoá, ức chế trên 85% ở cùng nồng độ 60 g/ml: Cốt khí củ, Hậu phác, Hòe, Trâm mốc, Kim ngân hoa. Chọn dung môi có khả năng chiết cao toàn phần có hoạt tính chống oxy hoá tốt nhất: Cốt khí củ, Hậu phác, Hòe, Trâm mốc: cồn 70%; Kim ngân hoa: cồn 50%. X{c định IC50 của các cao toàn phần. Xây dựng và thẩm định quy trình định lượng polyphenol. Với phương ph{p quang phổ UV - Vis dùng thuốc thử Folin - Ciocalteu, quy trình đã được thẩm định: độ đặc hiệu, tính tuyến tính (ŷ = 0,0141x + 0,0267, R2 = 1,00 với khoảng nồng độ khảo sát 10,0 – 60,0 (μg/ml), độ lặp lại (RSD = 2,7 %) v| độ đúng (tỉ lệ phục hồi 99,86%). Mẫu thử Cao cồn 70% Cao cồn 70% Cao cồn 70% Cao cồn 50% Cao cồn 70% Cốt khí củ Hậu phác Trâm mốc Kim ngân hoa Hòe Polyphenol (%) 10,09 9,34 9,20 7,93 7,29 IC50 (µg/ml) 30,67 33,20 85,54 162,39 118,48 Thử tác dụng bảo vệ gan theo hướng chống oxy hóa in vivo. Cao cồn 70% Cốt khí củ có tác dụng bảo vệ gan ở liều 0,9 v| 1,8 g/kg (tương đương 6,11 g v| 12,22 g dược liệu khô/kg). Kết luận: Cao cồn 70% Cốt khí củ là cao chiết có tác dụng chống oxy hóa tốt nhất trong 50 mẫu nguyên liệu (tương đương 200 mẫu cao), đồng thời có tác dụng chống oxy hoá, bảo vệ gan in vivo. Từ khóa: cốt khí củ, sàng lọc, DPPH, Folin–Ciocalteu, tác dụng chống oxy hóa, bảo vệ gan, cyclophosphamid *Khoa Dƣợc, Đại học Y Dƣợc Thành phố Hồ Chí Minh Tác giả liên lạc: Nguyễn Hữu Lạc Thủy ĐT: 091.551.7890 Chuyên Đề Dƣợc Email: nguyenhuulacthuy@gmail.com 221 Nghiên cứu Y học Y Học TP. Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 22 * Số 1 * 2018 ABSTRACT SCREENING AND DETERMINATION OF POLYPHENOL OF MEDICAL PLANTS ON ANTIOXIDANT ACTIVITIES, HEPATOPROTECTIVE EFFECT Huynh Thi Nhu Thuy, Nguyen Huu Lac Thuy, Vo Thi Bach Hue * Y Hoc TP. Ho Chi Minh * Supplement Vol. 22 - No 1- 2018:221 - 228 Background – Objectives: Nowadays, hepatitis is becoming one of the common, high risk of death deseases in Viet Nam and around the world. People often use medical plants to protect liver. Morden medicine use extract, pure subtances. Demonstrating the effect of extracts, pure subtances by test methods and modern equipments is currently a development trend. The aim of the present study was to indicate more antioxidant, hepatoprotective medical plants, constituents. That will be the basis for hepatoprotective drug studies. Materials: 50 antioxidant medical plants were purchased in Pharmacy of traditional medicines, in District 5, Ho Chi Minh city. Methods: UV–visible spectroscopy method with DPPH for screening of 50 medical plants on antioxidant activities. Determination and validation of Folin-Ciocalteu for the determinatin of polyphenol content in antioxidant medical plants. In vivo, hepatoprotective effect was evaluated in mice induced liver damage by cyclophosphamid. Results: Screening in vitro of herbal plant on antioxidant activities. The best results were obtained for 5/50 antioxidant medical plants which inhibit over 85% at the same concentration - 60 g/ml: Polygonum cuspidatum Sieb. et Zucc. Polygonaceae (1), Magnolia officinalis Rehd. et Wils Magnoliaceae (2), Styphnolobium japonicum L. Fabaceae (3), Lonicera japonica Thunb. Caprifoliaceae (4), Syzygium cumini L. Myrtaceae (5). Ethanol 70% is the best solvent for strongest antioxidant properties: (1), (2), (3), (5), 50% ethanol ...