Thử nghiệm hoạt tính bảo vệ gan ex vivo của cao chiết diếp cá houttuynia cordata

Qua khảo sát sàng lọc các cây có tác dụng chống oxy hóa với 3 phân đoạn cao dichloromethan, methanol, nước theo độ phân cực của các chất có trong cây trong nghiên cứu cho thấy kết quả cao methanol của cây diếp cá có tác dụng chống oxy hóa mạnh trên mô hình sàng lọc tác dụng chống oxi hóa DPPH (1,1-diphenyl-2-picryl-hydrazyl).
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Thử nghiệm hoạt tính bảo vệ gan ex vivo của cao chiết diếp cá houttuynia cordataNghiên cứu Y họcY Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 15 * Phụ bản của Số 1 * 2011THỬ NGHIỆM HOẠT TÍNH BẢO VỆ GAN EX VIVOCỦA CAO CHIẾT DIẾP CÁ HOUTTUYNIA CORDATANguyễn Thị Phương Hạnh*, Võ Văn Giàu*, Huỳnh Ngọc Thụy*TÓM TẮT:Giới thiệu: Qua khảo sát sàng lọc các cây có tác dụng chống oxy hóa với 3 phân đoạn cao dichloromethan,methanol, nước theo độ phân cực của các chất có trong cây trong nghiên cứu của chúng tôi cho kết quả caomethanol của cây diếp cá có tác dụng chống oxy hóa mạnh trên mô hình sàng lọc tác dụng chống oxi hóa DPPH(1,1-diphenyl-2-picryl-hydrazyl)(3). Do đó cao methanol của cây diếp cá được dùng để kiểm tra tác dụng bảo vệgan ex vivo, nếu cao này có tác dụng sẽ được tiếp tục thử nghiệm trên mô hình in vivo.Việc sàng lọc tác dụnglàm hạ men gan, bảo vệ tế bào gan sẽ được triển khai trên dòng tế bào gan chuột tách ra và nuôi cấy theo PPKiso(2) sau đó bị gây độc bằng CCl4. Đánh giá mức độ thương tổn tế bào gan và đánh giá hoạt tính bảo vệ gan củacao chiết ở các nồng độ khác nhau qua kết quả đo hoạt lực men gan.Đối tượng và phương pháp nghiên cứu: Sử dụng mô hình tách tế bào gan chuột của Kiso(2) đã có thay đổimột số bước cho phù hợp với điều kiện hiện tại của phòng thí nghiệm ở Việt Nam. Tế bào đơn sau khi tách được ủphục hồi với thời gian 2 h trong môi trường EMEM có bổ sung một số chất cần thiết cho tế bào, sau đó gây độc tếbào bằng CCl4 1,5% trong thời gian 45‘ làm tăng cao hoạt độ của enzym ALT trong môi trường. Tiến hành thửnghiệm tác dụng bảo vệ tế bào gan của cao chiết methanol từ cây diếp cá (Houytuynia cordata) trên mô hình gâytổn thương tế bào gan bằng carbon tetrachlorid (CCl4) (ex vivo) với các tế bào mới tách và nuôi cấy.Kết quả: Kết quả thử nghiệm cho thấy các nồng độ khác nhau của cao chiết methanol lá diếp cá đều có tácdụng hạ men gan, bảo vệ tế bào.Kết luận: Từ các kết quả thu được sơ bộ kết luận cao chiết methanol của lá diếp cá có tác dụng quả trongviệc làm hạ men gan khi tế bào gan bị gây nhiễm độc CCl4.Từ khóa: tế bào gan, diếp cá, CCl4, tác dụng bảo vệ gan.ABSTRACTHEPATOPROTECTIVE ACTIVITIES OF HOUTTUYNIA CORDATA EXTRACT ON CARBONTETRACHLORIDE INDUCED HEPATOTOXICITY EX VIVONguyen Thi Phuong Hanh, Vo Van Giau, Huynh Ngoc Thuy* Y Hoc TP. Ho Chi Minh * Vol. 15 - Supplement of No 1 - 2011: 622 - 627Introduction. Houttuynia cordata Thunb. is a medicinal herb that generally be used in Vietnamesetraditional medicine. Many studies have shown that flavonoids exhibited a wide range of biological orphysiological effects including anti-inflammatory, anti-allergic, and anti-cancer activities. However, no reports tobe discussed about the relationship between the levels of H. cordata flavonoids and its biological characteristics.Method: In our present study, the hepatoprotective activities of the Houttuynia cordata extracts withdifferent solvents were performed on carbon tetrachloride (CCl4) induced cytotoxicity model modified by Kisoprocedure. Suspension of isolated mouse hepatocytes was incubated in EMEM medium under a 95% O2 and 5%CO2, 37 oC in 2h before the addition of 1.5% CCl4 and incubated in 45 min. CCl4 administration significantly* ĐH Ton Duc Thang; * BM. Dược liệu – Khoa Dược - ĐH Y Dược TP.HCMTác giả liên lạc: TS. Huỳnh Ngọc ThụyĐT: 0902373986Email: huynhthuyth@gmail.com622Chuyên Đề Dược KhoaY Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 15 * Phụ bản của Số 1 * 2011Nghiên cứu Y họcincreased serum alanine aminotransferase (ALT) activity, a biochemical marker of hepatocyte injury, in medium.Results:the methanol extract of Houttuynia cordata have reduced the level of ALT and protected mice livercells at a concentration of 0.05 mg/ml.Conclusion: the methanol extract of Houttuynia cordata have reduced the level of ALT and protected miceliver cells.Key words: hepatocyte, Houttuynia cordata, CCl4, hepatoprotective activity.nghiên cứu của chúng tôi cho kết quả caoĐẶT VẤN ĐỀmethanol của cây diếp cá có tác dụng chống oxyBệnh gan là một trong những vấn đề thườnghóa mạnh trên mô hình sàng lọc tác dụng chốnggặp trong cộng đồng. Có nhiều loại bệnh ganoxi hóa DPPH (1,1-diphenyl-2-picryl-hydrazyl)(3)trong đó bệnh thường gặp là những tổn thươngvà tác dụng chống oxy hóa thì có liên quan đếngan gây ra bệnh viêm gan dẫn đến xơ gan vàviệc phòng ngừa và chữa trị nhiều loại bệnh tậtung thư gan cuối cùng là gây tử vong vớitrong đó có tác dụng chữa bệnh viêm gan. Do đónguyên nhân chủ yếu là do virút và nhiễm độc.cao methanol của cây diếp cá được dùng đểPhần lớn các chất gây độc cho gan chủ yếu dokiểm tra tác dụng bảo vệ gan ex vivo, nếu caosuperoxid hóa lipid và các thương tổn khác donày có tác dụng sẽ được tiếp tục thử nghiệmstress oxy hóa(1).trên mô hình in vivo.Hiện nay các phương pháp thử nghiệm inViệc sàng lọc tác dụng làm hạ men gan, bảovitro được dùng phổ biến để sàng lọc ban đầuvệ tế bào gan sẽ được triển khai trên dòng tế bàocác cao chiết, phân đoạn chiết của dược liệu hoặcgan chuột tách ra và nuôi cấy theo phương phápcủa các chất tinh khiết vì các phương pháp nàyKiso(2) sau đó bị gây độc bằng CCl4. CCl4 là mộtcó thể sàng lọc được một lượng lớn mẫu trongchất độc được sử dụng phổ biến trong mô hìnhthời gian ngắn với chi phí thấp, lượng mẫu sửthử nghiệm gây tổn thương gan in vitro và in vivo.dụng nhỏ và kết quả có độ lặp lại cao. PhươngChất này gây nên sự xơ hóa gan và làm thay đổipháp sàng lọc in vitro có nhiều mô hình kháccác chỉ số sinh hóa của gan với các triệu chứngnhau được sử dụng trên thế giới. Trong nghiêntương tự với viêm gan do virút cấp tính(3,4). Khi tếcứu này chúng tôi sử dụng phương pháp tách tếbào bị tổn thương các enzym transaminsase nhưbào đơn từ gan thú vật thử nghiệm(2) nhưng cóALT, AST tiết ra môi trường làm cho hoạt độ ALTnhững khảo sát thay đổi trong bước tiến hànhđo được trong môi trường tăng. Đánh giá mức độcho phù hợp với điều kiện phòng thí nghiệmthương ...