Tìm hiểu khả năng gây bệnh gan thận mủ trên cá tra (Pangasianodon hypophthalmus) của chủng vi khuẩn Edwardsiella ictaluri bị đột biến gen purA

Thí nghiệm gây cảm nhiễm nhân tạo chủng vi khuẩn Edwardsiella ictaluri hoang dại gây bệnh gan thận mủ cá tra (WT) và chủng E. ictaluri bị đột biến gen purA từ chủng WT (PAM) được tiến hành trên cá tra (Pangasianodon hypophthalmus) có khối lượng 10 - 12g/con để xác định khả năng gây bệnh gan thận mủ cá tra của chủng PAM.
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Tìm hiểu khả năng gây bệnh gan thận mủ trên cá tra (Pangasianodon hypophthalmus) của chủng vi khuẩn Edwardsiella ictaluri bị đột biến gen purATaïp chí Khoa hoïc - Coâng ngheä Thuûy saûnSoá 3/2012KEÁT QUAÛ NGHIEÂN CÖÙU ÑAØO TAÏO SAU ÑAÏI HOÏCTÌM HIỂU KHẢ NĂNG GÂY BỆNH GAN THẬN MỦ TRÊN CÁ TRA(PANGASIANODON HYPOPHTHALMUS) CỦA CHỦNG VI KHUẨNEDWARDSIELLA ICTALURI BỊ ĐỘT BIẾN GEN purAASSESSMENT ON THE PATHOGENICITY OF AN EDWARDSIELLA ICTALURI purAMUTANT ON CATFISH (PANGASIANODON HYPOPHTHALMUS)Trần Thị Bích Thủy1, Võ Thị Ngọc Trâm2, Nguyễn Thị Chi3,Võ Hoàng Ánh4,Võ Văn Nha5Ngày nhận bài: 29/9/2011; Ngày phản biện thông qua: 13/4/2012; Ngày duyệt đăng: 12/9/2012TÓM TẮTThí nghiệm gây cảm nhiễm nhân tạo chủng vi khuẩn Edwardsiella ictaluri hoang dại gây bệnh gan thận mủ cátra (WT) và chủng E. ictaluri bị đột biến gen purA từ chủng WT (PAM) được tiến hành trên cá tra (Pangasianodonhypophthalmus) có khối lượng 10 - 12g/con để xác định khả năng gây bệnh gan thận mủ cá tra của chủng PAM. Kết quảcho thấy, 100% cá tra được tiêm chủng WT đều bị chết với biểu hiện của bệnh gan thận mủ tương tự như những mô tả ngoàiao nuôi ở nồng độ tiêm 105CFU/cá, còn tất cả cá tra được tiêm chủng PAM ở nồng độ tiêm 105CFU/cá đều bình thườngsau 15 ngày thí nghiệm, không có cá thể nào biểu hiện bệnh gan thận mủ. Liều gây chết 50% (LD50) của chủng PAM cao(>109CFU/con). Kết quả nghiên cứu chứng tỏ khả năng gây bệnh gan thận mủ trên cá tra của chủng E. ictaluri bị đột biếngen purA (PAM) yếu hơn nhiều so với chủng E. ictaluri hoang dại (WT) khi chưa bị đột biến gen purA. Chủng vi khuẩn nàytiếp tục được nuôi cấy lưu giữ, sử dụng xác định khả năng sinh miễn dịch để làm nguyên liệu sản xuất vắc xin nhược độcphòng bệnh gan thận mủ cho cá tra sau này.Từ khóa: cá tra, Edwardsiella ictaluri, đột biến gen purAABSTRACTStriped catfish (Pangasianodon hypophthalmus) weighing about 10-12 grams were experimentally infected withthe wild-type Edwardsiella ictaluri and purA mutant strain of E. ictaluri to determine their virulence. The result showedthat all fish challenged with wild-type E. ictaluri were killed and displayed a symptom of white spots in the internalorgan as those in naturally infected fish at an injected concentration of 105 CFU per fish, but all fish challenged with PAMwere healthy without any clinical signs of disease at the same concentration after 15 days of exposure. By the injection, a50% lethal dose (LD50) for PAM was higher than 109 CFU per fish. The results demonstrated that PAM strain was highlyattenuated very much compared to wild-type E. ictaluri. Further, this strain continues to determine the immunization asprimary material for production of live attenuated vaccine to prevent the disease symptom of white spots in the internalorgan of striped catfish.Keywords: Pangasianodon hypophthalmus, Edwardsiella ictaluri, purA mutantTrần Thị Bích Thủy: Lớp Cao học Nuôi trồng Thủy sản 2009 - Trường Đại học Nha TrangCN. Võ Thị Ngọc Trâm, 3KS. Nguyễn Thị Chi, 4CN. Võ Hoàng Ánh, 5TS. Võ Văn Nha: Viện Nghiên cứu Nuôi trồngThủy sản III12TRÖÔØNG ÑAÏI HOÏC NHA TRANG ❖ 163Taïp chí Khoa hoïc - Coâng ngheä Thuûy saûnI. ĐẶT VẤN ĐỀCá tra Pangasianodon hypophthalmus là loài cáda trơn nước ngọt được nuôi rộng rãi, đặc biệt ở cáctỉnh Đồng bằng sông Cửu Long với diện tích nuôivà sản lượng ngày càng gia tăng. Để đạt được sảnlượng cao, ngoài việc mở rộng diện tích, người nuôicá tra đã không ngừng phát triển nhiều loài hình nuôinhư nuôi ao, hầm, lồng bè với mật độ thâm canh rấtcao. Chính vì vậy, môi trường bị ô nhiễm, làm xuấthiện nhiều loại bệnh, trong đó bệnh gan thận mủ đãgây thiệt hại lớn cho người nuôi, tỷ lệ cá mắc bệnhchết từ 10 - 90%, thậm chí lên đến 100% tùy thuộcvào mức độ nhiễm bệnh và kích thước cá nuôi. Vikhuẩn E. ictaluri trên cá tra đã kháng với một số loạithuốc kháng sinh như Oxytetracylin, Oxolinic acid,Sulphonamid (Từ Thanh Dung và cộng sự, 2004);Bactrime, Colistin, Florphenicol, Amoxicilin, Tetracyclin,Doxycyclin (Trương Ngọc Loan, 2007). Hơn nữa,các sản phẩm thủy sản sau đó thường không đượcưa chuộng do sự tích lũy thuốc, hoá chất trong thịtcá. Do vậy, việc phòng bệnh gan thận mủ cá trabằng vắc xin là vấn đề được đặt ra cho công nghiệpnuôi cá tra hiện nay. Nghiên cứu này nhằm xác địnhđộc lực của chủng vi khuẩn E. ictaluri bị đột biến genpurA làm cơ sở cho việc sản xuất vắc xin nhược độcphòng bệnh gan thận mủ cá tra.II. ĐỐI TƯỢNG, VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁPNGHIÊN CỨU1. Đối tượng và vật liệu nghiên cứu- Chủng Edwardsiella ictaluri hoang dại gâybệnh gan thận mủ cá tra (WT) và chủng E. ictaluri bịđột biến gen purA từ chủng WT (PAM) được cungcấp từ đề tài cấp Nhà nước do Viện Nghiên cứuNuôi trồng Thủy sản III (Viện III) chủ trì.- Cá tra Pangasianodon hypophthalmus có khốilượng trung bình 10 g/con được nuôi tại khu thựcnghiệm Viện III từ nguồn cá của Trung tâm Quốc giagiống Thủy sản nước ngọt Nam Bộ.2. Phương pháp xác định các chỉ ...