Xác định các Protein có tính kháng nguyên của Streptococcus suis serotype 2 bằng phương pháp Immunoproteomics

Nhiễm trùng liên cầu lợn ở người là một bệnh nhiễm trùng cấp tính với biểu hiện lâm sàng đa dạng bao gồm nhiễm trùng huyết, viêm màng não mủ, viêm nội tâm mạc, viêm khớp... Hiện vẫn chưa có vaccine phòng bệnh hữu hiệu trên lợn và cà người. Đề tài nghiên cứu nhằm cung cấp dữ liệu về các protein có tính khống nguyên được xác định bằng phương pháp immunoproteomics.
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Xác định các Protein có tính kháng nguyên của Streptococcus suis serotype 2 bằng phương pháp Immunoproteomics XÁC ĐỊNH CÁC PROTEIN CÓ TÍNH KHÁNG NGUYÊN CỦA STREPTOCOCCUS SUIS SEROTYPE 2 BẰNG PHƯƠNG PHÁP IMMUNOPROTEOMICS Tác giả: Nguyên Hoàng Bách (Tiến sỹ, Giàng viên Bộ môn Vi Sinh, Đại học YDược Huếj Giáo viên hướng dẫn: TS. Lê Văn An (Giảng viên Bộ môn Vi Sinh, Đại học YDược Huế) GS. Alberto A lberti (Đại học Sassarí, Cộng hoà Y) TÓM TẤT Mở đầu: Nhiễm trùng liên cầu lợn ở người là một bệnh nhiễm trùng cấp tính với biểu hiện lâm sàng đa dạngbao gồm nhiễm trùng huyết, viêm màng não mủ, viêm nội tâm mạc, viêm khớp... Hiện vẫn chưa có vaccinephòng bệnh hữu hiệu trên lợn và cà người. Nghiên cứu của chúng tôi cung cấp dữ liệu về các protein có tínhkhống nguyên được xốc định bằng phương pháp immunoproteomics. Đối tuựng và phương pháp: Protein hòatan tống số củaSS2 được phân giải bằngđiện di protein 1 chiều trên gelacrylamide và sàng lọc huyết thanhcủa các bệnh nhân nhiễm bệnh bằng western immunoblotting. Các protein có tính kháng nguyên được nhậnbiết bằng kỹ thuật immunoblottịng trên 2-D acrylamide gel và định danh bằng kỹ thuật nanoLC-ESI-MS/MS.Kết quả. Định danh 4 protein bằng sắc ký/khối phổ: enoỉãse, 60kDA chaperonin, Chaperone protein DnaK andelongation factor Tu. Tắt cà 4 protein đã được báo cảo có tính sinh miễn dịch với ở câc vật chủ khác trong trêncâc nghiên cứu gần đây. Từ khóa: Nhiễm trùng liên cầu lợn, SS2. SUMMARY IDENTIFICATION ANTIGENIC PROTEINS OF Streptococcus suis serotype 2 BY IMMUNOPROTEOMICSAPPROACH Auhtor: Nguyen Hoang Bach (Department o f Microbiology, Hue University o f Medicine and Pharmacy) Supervisor: Dr. Le Van An (Department o f Microbiology, Hue University o f Medicine and Pharmacy) Prof. Alberto Alberti (University o f Sassari, Italy) Introduction: Streptococcus suis infection in humans is an acute infectious disease with diverse clinicalmanifestations include septicemia, meningitis, endocarditis, arthritis... There are no effective vaccines against SS2 for both swine and humans. This study provides data on the antigenic proteins identified byimmunoproteomics method. Materials and methods: Total soluble protein extracts of SS2 were resolved on 1-D acrylamide gel. Patient sera were tested by western blot. Immunogenic protein were identified by immunoblotting techniques on 2-D acrylamidegels and identified by nanoLC-ESI-MS/MS. Results: 4 proteins have been identified by the data obtained from nanoLC-ESI-MS/MS: enolase, 60kDA chaperonins, Chaperone proteins and elongation factor Tu DnaK. In recent studies, all o f 4 proteinsare involved in binding antigens and presenting them to the immune system. Keywords: Streptococcus suis infection, SS2. Đ Ặ Ĩ VẮN ĐỀ đây ở các nước phát triển người ta sử dụng kỹ thuật Nhiễm trùng liên cầu lợn ở người là một bệnh immunoproteomics. Phương pháp này đã áp dụngnhiễm trùng cấp tính với biểu hiện lâm sàng đa dạng trong nghiên cứu để tạo ra vaccine và sinh phẩm chẩnbao gòm nhiễm trùng huyết, viêm màng não mủ, viêm đoán với các vi khuẩn Mycoplasma mycoides,nội tâm mạc, viêm khớp. Nhiễm liên cau lợn ở người Streptococcus pneumoniae, Streptococcus equi ssp.được phát hiện đầu tiên vào năm 1960 và số lượng Zooepidemicus, Bordetella bronchisepíicav Vibriobệnh nhân nhiễm ngày càng tăng. Bằng các kỹ thuật parahaemolyticus, Bruceiia meíitensis [4], [15], [16],phân lập và nuôi cấy thông thường, S.suis gây bệnh [19], [21] [25](chủ yếu là serotype 2 ) được phân lập từ các bệnh Nghiên cứu này chúng tôi sử dụng kỹ thuậtphẩm lâm sàng hoặc tiến hành lảm xét nghiệm huyết immunoproteomics đề phân tích và xác định tínhíhanh học hoặc bằng phương pháp reaí-time PCR. kháng nguyên của các protein sinh miễn dịch ờ liên Kháng nguyên vỏ liên cầu lợn có cấu trúc cầu !ợn type 2. Kết quả của nghiên cứu này sẽ làm cơpolysaccharide đặc hiệu, đóng vai trò quan trọng trong sở đế có thề đưa các protein kháng nguyên này iàmkhả năng gây bệnh cùa vi khuẩn, người ta chia liên mô hình vaccine hay tạo ra các bộ sinh phẩm để chẩncầu lợn thành 35 íỵpe huyết thanh khác nhau dựa vào đoán nhiễm trùng liên cầu type 2 ở người vả động vật.cấu trúc kháng nguyên polysaccharides, trong đó các ĐÓI TƯỢNG VÀ PHƯỚNG PHÁP NGHIÊN c ứ uíype 1/2 và 2 thường được phân lập trên lợn bệnh và 1. Đối tứợng nghiên cứucó khả năng lây sang người [9], [10]. Chùng Vi khuan: 3 chủng Streptococcus suis ...