Xây dựng phương pháp định lượng Metoprolol trong huyết tương bằng sắc ký lỏng hiệu năng cao

Bài viết trình bày mục tiêu: (1) Xây dựng phương pháp định lượng metoprolol trong huyết tương bằng sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC) và (2) Thẩm định phương pháp phân tích đã xây dựng. Đối tượng và phương pháp nghiên cứu: Mẫu huyết tương.
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Xây dựng phương pháp định lượng Metoprolol trong huyết tương bằng sắc ký lỏng hiệu năng caoTạp chí Y Dược học - Trường Đại học Y Dược Huế - Tập 8, số 5 - tháng 10/2018 XÂY DỰNG PHƯƠNG PHÁP ĐỊNH LƯỢNG METOPROLOL TRONG HUYẾT TƯƠNG BẰNG SẮC KÝ LỎNG HIỆU NĂNG CAO Nguyễn Viết Khẩn, Nguyễn Thị Hoài Trường Đại học Y Dược, Đại học Huế Tóm tắt Đặt vấn đề: Metoprolol dùng trong điều trị tăng huyết áp, đang có nhu cầu sử dụng cao. Thuốc điều trịbệnh lý tim mạch yêu cầu cách dùng, liều dùng phải chặt chẽ, chính xác, đảm bảo an toàn, hiệu quả cho bệnhnhân. Vì vậy, phương pháp định lượng metoprolol trong huyết tương đơn giản, chính xác, thuận lợi là nhucầu rất cần thiết. Mục tiêu: (1) Xây dựng phương pháp định lượng metoprolol trong huyết tương bằng sắcký lỏng hiệu năng cao (HPLC) và (2) Thẩm định phương pháp phân tích đã xây dựng. Đối tượng và phươngpháp nghiên cứu: Mẫu huyết tương. Kết quả: Điều kiện sắc ký: cột Eclipse XDB-C18, detector huỳnh quang,pha động: acetonitril : đệm NaH2PO4 (25 mmol/L; pH 3,0) với chương trình gradient dung môi. Phương phápphân tích đạt các tiêu chí theo hướng dẫn của FDA về thẩm định phương pháp phân tích sinh học. Kết luận:Phương pháp HPLC đã xây dựng có thể áp dụng để định lượng metoprolol trong dịch sinh học để nghiên cứudược động học và tương đương sinh học trong lĩnh vực kiểm soát chất lượng thuốc. Từ khóa: Metoprolol, huyết tương, HPLC. Abstract METHOD DEVELOPMENT AND VALIDATION FOR THE DETERMINATION OF METOPROLOL IN HUMAN PLASMA BY HIGH PERFORMANCE LIQUID CHROMATOGRAPHY Nguyen Viet Khan, Nguyen Thị Hoai Hue university of Medicine and Pharmacy, Hue university Background: Metoprolol has been widely used in the treatment of hypertension. The usage of drugsfor cardiovascular diseases is highly required safety and effectiveness for patients. Therefore, a convenientmethod for the determination of metoprolol in plasma is necessary. Objectives: (1) To develope an HPLCmethod for quantification of metoprolol in human plasma and (2) To validate of the method. Materials andmethods: human plasma. Results: Chromatographic conditions include: Eclipse XDB-C18 column, fluorescencedetector, mobile phase: acetonitril : NaH2PO4 buffer (25 mmol/L, pH 3.0) with a solvent gradient program. Theanalytical method met current FDA guidelines for bioanalytical method validation. Conclusions: The methodcan be applied to determine metoprolol in biological fluids for pharmacokinetic and biocompatibility study. Keywords: Metoprolol, plasma, HPLC. 1. ĐẶT VẤN DỀ tim mạch, đặc biệt là tăng huyết áp, điều trị dài hạn Theo kết quả điều tra quốc gia năm 2015, tỷ đau thắt ngực, loạn nhịp tim, suy tim độ trung bìnhlệ tăng huyết áp ở nước ta là 22,2%, ở nhóm 30-69 hoặc độ nhẹ. Việc sử dụng các thuốc chẹn beta nóituổi là 30,6%. Chính vì vậy, nhu cầu về thuốc điều trị chung và metoprolol nói riêng trong điều trị bệnh lýbệnh lý tim mạch đã và đang rất cấp thiết để phục vụ tim mạch yêu cầu sự chính xác và chặt chẽ trong liềucho một số lượng lớn bệnh nhân. Metoprolol, thuốc sử dụng nhằm đảm bảo hiệu quả về mặt tác dụngđối kháng chọn lọc thụ thể beta 1 – adrenergic, là dược lý, đồng thời ngăn ngừa những biến chứng cómột trong những thuốc được sử dụng khá rộng rãi thể xảy ra khi không tuân thủ chế độ liều [1], [2], [3],với chỉ định phù hợp cho nhiều tình trạng bệnh lý [4]. - Địa chỉ liên hệ: Nguyễn Viết Khẩn, email: nvietkhan@gmail.com DOI: 10.34071/jmp.2018.5.14 - Ngày nhận bài: 18/7/2018; Ngày đồng ý đăng: 15/10/2018; Ngày xuất bản: 8/11/2018 96 Tạp chí Y Dược học - Trường Đại học Y Dược Huế - Tập 8, số 5 - tháng 10/2018 Ngoài ra, metoprolol là dược chất nằm trong tạo các mẫu xây dựng đường chuẩn. Tương tự, các“Danh mục các dược chất yêu cầu báo cáo số liệu mẫu kiểm soát (QC) ở các nồng độ metoprolol trongnghiên cứu tương đương sinh học khi đăng ký thuốc” huyết tương là 12,5 ng/ml (LQC); 50,0 ng/ml (MQC)kèm thông tư 08/2010/TT-BYT ngày 26/4/2010 [5]. và 200 ng/ml (HQC).Nhu cầu theo dõi nồng độ của metoprolol trong Xử lý mẫuhuyết tương người là hoàn toàn thực tế và có giá trị Cho 30 µl dung dịch atenolol 10 µg/ml vàotrên thực tiễn lâm sàng. eppendorf (2,0 ml) chứa 700 µl huyết tương có Trên thế giới, dược chất này trong huyết tương metoprolol, sau đó thực hiện vortex 15 giây, tiếp tụcđược nghiên cứu định lượng bằng phương pháp thêm 420 µl MeOH, thực hiện vortex 30 giây, thêmHPLC với các loại detector UV, huỳnh quang , … [6], 280 µl TCA/MeOH 5%, thực hiện vortex 90 giây,[7], [8]. Ở Việt Nam, theo Tạ Mạnh Hùng và cộng sự, ly tâm hỗn hợp trong 8 phút ở 150C ( 8500 vòng/trước khi metoprolol trong huyết tương được định phút), hút lấy 500 µl phần dịch trong phía trên, lọclượng bằng phương pháp HPLC, mẫu cần lắc chiết qua màng lọc 0,45 μm, dịch lọc được cho vào vial đểlỏng – lỏng để tách metoprolol khỏi nền mẫu huyết phân tích [6], [7].tương [9]. Trong bài báo này, chúng tôi giới thiệu kết Xây dựng phương pháp định lượng metoprololquả nghiên cứu phương pháp định lượng metoprolol trên HPLCtrong huyết tương bằng HPLC với phương pháp xử lý Kh ...