Xây dựng quy trình pha chế bộ kit định lượng creatinin trong huyết thanh

Nghiên cứu với mục tiêu nhằm xây dựng quy trình pha chế và tiêu chuẩn hóa bộ kit định lượng creatinin trong huyết thanh. Nghiên cứu ứng dụng các phần mềm vi tính (Design-Expert, FormRules, INForm, Microsoft Office Excel) để tối ưu hoá công thức bộ kit.
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Xây dựng quy trình pha chế bộ kit định lượng creatinin trong huyết thanhNghiên cứu Y họcY Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 15 * Phụ bản của Số 1 * 2011XÂY DỰNG QUY TRÌNH PHA CHẾ BỘ KIT ĐỊNH LƯỢNG CREATININTRONG HUYẾT THANHNguyễn Thị Phương Thảo*, Trần Thanh Nhãn**TÓM TẮT:Mở đầu: Việc sản xuất những bộ kit thử dùng cho định lượng các chất trong lĩnh vực xét nghiệm sinh hóalà một vấn đề đã được giải quyết khá lâu ở các nước châu Âu, Mỹ, Nhật. Trong khi đó, tại nước ta hiện nay hầuhết các bộ kit dùng trong lĩnh vực này đều phải nhập khẩu. Sản xuất trong nước những bộ kit thử cho các xétnghiệm hóa sinh với chất lượng ổn định, giá thành rẻ là một đòi hỏi cấp thiếtMục tiêu: Xây dựng quy trình pha chế và tiêu chuẩn hóa bộ kit định lượng creatinin trong huyết thanh.Phương pháp nghiên cứu: Ứng dụng các phần mềm vi tính (Design-Expert, FormRules, INForm,Microsoft Office Excel) để tối ưu hoá công thức bộ kit. Sự ổn định của bộ kit được xác định bằng phương pháp tựnhiên và phương pháp lão hóa cấp tốc.Kết quả: Đề tài đã khảo sát được các thông số tối ưu của bộ kit. Các thông số tối ưu như sau: nồng độ acidpicric = 21,06 mmol/L; nồng độ NaOH = 333,55 mmol/L; nồng độ creatinin chuẩn = 5,41 mg/dL; thời gian t1 =10 giây; thời gian t2 = 104 giây. Thời hạn sử dụng bộ kit được dự đoán là 42 tháng kể từ khi pha chế ở điều kiệnbảo quản mát từ 2 - 8 0C. Bộ kit được sử dụng để định lượng nồng độ creatinin trong huyết thanh của 327 bệnhnhân và 21 huyết thanh nội kiểm tra tại phòng sinh hoá, bệnh viện Quận 4, thành phố Hồ Chí Minh và có sosánh thống kê kết quả với bộ kit ngoại nhập (ISE - Ý) đang sử dụng tại đây. Kết quả cho thấy, bộ kit có chấtlượng tương đương với bộ kit ngoại nhập.Kết luận: Đã thực hiện được việc tối ưu hóa công thức pha chế bộ kit định lượng creatinin trong huyếtthanh và thẩm định được công thức tối ưu.Từ khóa: creatinin, huyết thanh, kit thử, tối ưu hóa.ABSTRACTESTABLISHMENT OF PROCESS OF MANUFACTURING FOR THE KITUSING SERUM CREATININE QUANTIFYNguyen Thi Phuong Thao, Tran Thanh Nhan* Y Hoc TP. Ho Chi Minh * Vol. 15 - Supplement of No 1 - 2011: 652 - 659Background: The production of the kit used to quantify substances in the field of biochemistry is a problemhas been solved a long time in European countries, American and Japan. Meanwhile, in Viet Nam almost of thekits used in this field is imported. The production of test kits for the biochemical tests with stable quality, lowprice is an urgent requirementObjective: Process development and standardization of the kit for the quantification of the creatinin inserum.Methods: Computer softwares (Design - Expert, FormRules, INForm, Microsoft Office Excel) were appliedin the optimum mixing formular of the kit. Real time method and accelerated study were used to determine thestability of the kit.*Bệnh viện đa khoa Quận 4 TPHCM** Khoa Dược ĐHYD TPHCMTác giả liên lạc: PGS. TS. Trần Thanh Nhãn ĐT: 0908593032Email: nhanchi2002@yahoo.com652Chuyên Đề Dược KhoaY Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 15 * Phụ bản của Số 1 * 2011Nghiên cứu Y họcResults: This study has investigated to optimize parameters of the kit. Resulting conditions are as followed:concentration of picric acid = 21.06 mmol/L, concentration of NaOH = 333.55 mmol/L, concentration of standardcreatimin = 5.41 mg/dL, time t1 = 10 seconds, time t2 = 104 seconds. The expiry date of the kit was predicted 42months from the manufacture date at 2 - 80C. The kit was used for the quantitative determination of the creatininin the serum of 327 patients and 21 samples control (Internal Quality Control) at Biochemistry department ofDistrict 4 hospital, at Ho Chi Minh city. And then we compare with imported kit (ISE - Italy) are usingcurrently at hospital. The results showed the quality of this kit is the same with the kit imported (I.S.E - Italy).Conclusion: We have investigated to optimize parameters of the kit using serum creatinine quantify andevaluated the optimal formula of this kitKeywords: creatinin, serum, kit, optimize.ĐẶT VẤN ĐỀBệnh lý về thận là bệnh lý rất thường gặphiện nay. Một trong những biểu hiện của bệnh làsự tăng nồng độ creatinin trong máu. Do đó việcđịnh lượng creatinin trong huyết thanh là mộttrong những xét nghiệm sinh hóa quan trọngcần được thực hiện để giúp cho việc chẩn đoánsớm và điều trị bệnh có hiệu quả.Ở Việt Nam hiện nay, một số phòng thínghiệm của các trường Đại học như Đại họcKhoa học Tự nhiên thành phố Hồ Chí Minh, Đạihọc Nông nghiệp thành phố Hồ Chí Minh vàcủa công ty Nam Khoa có nghiên cứu sản xuấtcác bộ kit thử, nhưng chủ yếu dùng trong sinhhọc phân tử nhằm xác định các tác nhân gâybệnh trên người và động vật như: bộ kit PCR(Polymerase Chain Reaction) chẩn đoán lao,PCR chẩn đoán sốt xuất huyết, PCR chẩn đoánthương hàn, PCR chẩn đoán bệnh đốm trắngcho tôm, …Việc nghiên cứu sản xuất các bộ kitdùng trong xét nghiệm hóa sinh cho đến nayhầu như chưa được quan tâm. Bộ môn Sinh Hóa- Độc ...