Phát hiện đột biến gen ATP7B trên gia đình bệnh nhân Wilson

Bài viết nghiên cứu nhằm phát hiện đột biến gen ATP7B trên 6 bệnh nhân được chẩn đoán mắc bệnh Wilson trong cùng một gia đình. Mời các bạn cùng tham khảo bài viết để nắm chi tiết nội dung nghiên cứu.
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Phát hiện đột biến gen ATP7B trên gia đình bệnh nhân WilsonTCNCYH Phụ trương 91 (5) - 2014 PHÁT HIỆN ĐỘT BIẾN GEN ATP7B TRÊN GIA ĐÌNH BỆNH NHÂN WILSON Phan Tôn Hoàng, Trần Huy Thịnh, Tạ Thành Văn, Lê Văn Hưng Nguyễn Ngọc Hùng, Nguyễn Đức Hinh, Trần Vân Khánh Trư ng h YH N n nh tr n n tr n nh th thư ng g n n t n g n TP nn tr ntr ng tr ng tr nh h tr nh h th h n h th tr ng tr ng ơ th Ngh n ư th h n ụ t h th n t n g n TP tr n nh nh n ư h n n nh n tr ng ng tg nh n TP ư h h ng 21 h h 21 n g n n h PC ư g tr nht g n nh t n t h th nh nh n ư h th n 2 t n ng h t tr ng n TP g n 4 -4 C C tr n n1 45 tr n nTừ khóa: gen ATP7B, bệnh Wilson, đột biến genI. ĐẶT VẤN ĐỀ chứng lâm sàng của gan, não, vòng Kayser - Fleischer ở mắt và các xét nghiệm hóa sinh trong máu (nồng độ Bệnh Wilson hay bệnh rối loạn chuyển hóa đồng, là đồng trong nước tiểu 24 giờ, hàm lượng ceruloplasminmột bệnh lý liên quan đến tổn thương gen. Đây là bệnh huyết thanh, nồng độ đồng trong gan) [6]. Đột biến điểmdi truyền lặn trên nhiễm sắc thể (NST) thường, đồng là đột biến thường gặp trên gen ATP7B và chủ yếu sửtích tụ ở một số cơ quan trong cơ thể, đặc biệt là gan dụng kỹ thuật giải trình tự gen để phát hiện đột biến, tuyvà não, gây nhiều biến chứng. Trên thế giới, tần suất nhiên do đột biến nằm rải rác khắp chiều dài gen ATP7Bmắc bệnh dao động trong khoảng 1/30.000 ÷ 1/100.000 nên cần phải giải trình tự toàn bộ gen ATP7B với 21người [1]. Ở Việt Nam, các nghiên cứu lâm sàng chủ exon mới phát hiện được đột biến nên khá tốn kém vàyếu tập trung vào đặc điểm lâm sàng [2]. Năm 2010, mất thời gian. Các nghiên cứu ở mức độ sinh học phânlần đầu tiên chúng tôi phát hiện hai trường hợp bệnh tử là cần thiết đề xác định chính xác các đột biến gâynhân có đột biến gen Arg778Leu [3]. Các nghiên cứu bệnh giúp cho công tác điều trị và xác định người lànhsau đó là xác định đột biến ở một số vùng đột biến mang gen bệnh để có những tư vấn di truyền thích hợp.trọng điểm và hoàn thiện quy trình xác định đột biến gen Bởi vậy đề tài được thực hiện nhằm mục tiêu: Phát hiệnATP7B. Năm 2011,trung tâm Nghiên cứu Gen - Protein đột biến gen ATP7B trên bệnh nhân được chẩn đoánthuộc trường Đại học Y Hà Nội đã tiến hành nghiên cứu mắc bệnh Wilson.phát hiện đột biến gen ATP7B gây bệnh Wilson [4; 5]. II. ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁPVề sinh bệnh học phân tử, nguyên nhân gây bệnhWilson là do thiếu hụt enzym ATPase typ P (P - ATPase), 1. Đối tượngđược mã hóa bởi gen ATP7B trên NST 13q14.3. EnzymP - ATPase đóng vai trò vận chuyển đồng qua màng tế Nhóm bệnh: 7 bệnh nhân trong một gia đình, đượcbào. Sự thiếu hụt hoặc giảm hoạt tính của enzym dẫn chẩn đoán mắc bệnh Wilson dựa vào triệu chứng lâmđến giảm sự bài tiết đồng từ tế bào gan vào mật và gây sàng và xét nghiệm hóa sinh máu.ứ đọng đồng tại gan. Khi lượng đồng trong gan tăng Nhóm chứng: 1 người bình thường, tiền sử gia đìnhquá mức, đồng sẽ theo hệ thống tuần hoàn tới các cơ không có người mắc bệnh di truyền.quan như: não, mắt, thận và gây các tổn thương cho 2. Phương phápcác cơ quan này. 2.1. Quy trình lấy mẫu: Bệnh nhân sẽ được lấy 2ml Chẩn đoán bệnh Wilson có thể dựa trên các triệu máu tĩnh mạch chống đông trong EDTA. Quy trình đảm bảo tuyệt đối vô trùng. h n h Tr n H Th nh nH nh trư ng 2.2. Quy trình tách chiết DNA tổng số: Quy trìnhh YH N tách chiết DNA tổng số được tiến hành theo quy trình h th nh h phenol/chloroform. Nồng độ và độ tinh sạch DNA đượcNg nh n 24 2014 kiểm tra nhờ phương pháp quang phổ (OD 260/280).Ng h th n 1 11 201430 TCNCYH Phụ trương 91 (5) - 2014 2.3. Quy trình giải trình tự gen xác định đột biến phần mềm ABI PRISM TM 3100 – Avant Data Collection,+ K ...