Phát hiện gen mã hóa Beta-Lactamase phổ rộng blaTEM và blaCTX - M

Mục tiêu của nghiên cứu nhằm phát hiện 2 gen ESBL blaTEM và blacTM - M Ở các chủng E. coli và Klebsiella. pneumoniae phân lập được từ các mẫu bệnh phẩm lâm sàng bằng kỹ thuật multiplex - PCR. Mời các bạn cùng tham khảo nội dung chi tiết.
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Phát hiện gen mã hóa Beta-Lactamase phổ rộng blaTEM và blaCTX - M PHÁT HIỆN GEN Mà HÓA BETA-LACTAMASE PHỐ RỘNG bỉarm VÀ blacTx-u Ở VI KHUẨN E. COLI VÀ KLEBSIELLA PNEUMONIAE BẰNG PHẢN ỨNG MULTIPLEX-PCR Ths. H oàng T h ị H oa D iễm * H ường dẫn: TS. Nguyễn Đắc Trung*T Ó M T ẤT Trong vài thập niên gần đây. vi khuẩn kháng kháng sinh đã tạo ra một vấn đề nghiệm trọng trong diều trị bệnhnhiễm khuẩn. Sự xuất hiện của vi khuẩn sinh betalactamase phổ rộng (ESBLs, Extended spectrum beta lactamases),đặc biệt làE.coỉi Kl bsi lla,pnumonia và hiện đang là mối quan tâm hàng đầu cho sự phát triển phương thức điều trịbệnh nhiễm khuẩn. ESBLs gồm 3 nhóm chính ỉà: TEM, CTXM và SHV, Mục tiêu của nghiên cứu nhằm phát hiện 2gen ESBL bla-TEM blacĩM-Mà và E.coli Kl bsi lla,pnumonia các chủng và phân lập được từ các mẫu bệnh phẩm lâmsàng bằng kỹ thuật multipiexPCR. Đối tượng nghiên cứu: 43 chủng E. coli và 24 chủng Kl bsi lla, pn umonia đượcphân lập từ bệnh phẩm lâm sàng tại Bệnh viện Đa khoa Trung ương Thái Nguyên và Bệnh viện Đại học Y khoa TháiNguyên. Phương pháp nghiên cún: Các chủng vi khuẩn được phân lập và định đanh trên hệ thống máy tự động Viiek2 compact 60. Mức độ nhạy cảm với kháng sinh của vi khuẩn được kiểm tra bằng phương pháp khoanh giấy kháng sinhkhuếch tán (Kỹ íhuật Kirby Bauer). Khả năng sinh ESBL ở các chủng vi khuẩn được sàng lọc bằng phương phápkhoanh giấy đôi (doubledisk test). Gen mã hóa ESBL bla-ỉEM blữcix-u và được phát hiện bằng phản ứng PCR đơn mồivà multiplexPCR. K ết quả: 17 chủng E.coỉi (39,53%) và 8 chủng K.pn umonia(33,33%) sinh ESBL; Có sự gia tăngvề mửc độ kháng kháng sinh ở các chủng E. coli và K. pn umonia sinh ESBL so vói các chủng không sinh ESBL, đặcbiệt là các kháng sinh cephalosprin thế hệ 3; Như vậy có thể có sự liên quan giữa khả năng sinh ESBL với mức độ đềkháng kháng sinh của vi khuẩn. Có 9 chủng E. coliK.pnumonia và 2 chủng bla-TEM chỉ mang gen (970 bp), genblaCTMM (540 bp) được t m thấy ở 4 chủng E. coỉi và 5 chủng K. pn um onia . Đặc biệt, 2 chủng E. coli mang đồng thờicà gen bla-m uvà blữcm-u, có 2 chủng E.colivà 1 chủng K.pnumonia không t m thấy bất kỳ gen bỉanào kể ưên. Cóthể ESBL ở các chủng vi khuẩn này đo gen còn lại là bỉasỵv mã hóa. Kết luận: Gen bỉa-TEMvà ủ/ữcTMM niã hóa betalactamase phổ rộng đã được t m thẩy ờ một sổ chùng vi khuẩn E. coli và K. pn umonia được nghiên cứu. Hai genESBL này không chỉ tồn ỉại riêng lẻ mà còn được t m thấy cùng tồn tại ở một số chủng vi khuẩn. * Từ khóa: Betalactamase phổ rộng; blarm t bỉacm-wí E. coỉv, Kl bsi lla pn umonia ; MultiplexPCR. Detection o f bỉdtem an d blactx.m genes in c . coli and K lebsiella pneum oniae strains bymuUiplex-PCRSummary For several decades, antibioticresistant bacteria have created a constant problem in therapy of bacterial infection. Theemergence of extendedspectrum betalactamase (ESBL)producing bacteria, particularly E. coli and K. pn umonia , is now acritical concern for the development of therapies against bacterial infection. ESBLs consist of 3 major genetic groups: TEM,SHV, and CTXM types. This study was undertaken to detect gen bla-TEM blacm-M coli Klbsillapnumonia and in £• andisolated in Thai Nguyen. Methods: A total of 43 strains of E. coli and 24 strains of Kl bsi lla pn umonia isolated fromclinical specimens. All strains were tested for antibiotic susceptibility and screened for production of extendedspectrum betaIactamases (ESBLs) by doubledisk test. The amplification for ESBL genes of bla-TEM blacrx-M and was also undertaken bysingle PCR and multiplexPCR. Results: The presence of ESBL was found in 17 of 43 isolates of E.coli (39.53%) and 8 of24 isolates o f K. pn umonia (33.33%). There was an increase in the level of antibiotic resistance, especially with the thirdgeneration cephalosprins in strains of E.coli K.pnumonia and ESBL(+) compared to nonESBL strains. There might be anassociation between ESBL production to level of antibiotic resistance of these bacteria. With ESBLprodu ...