Báo cáo khoa học : ẢNH HƯỞNG CỦA TUỔI BÒ ĐẾN SỐ LƯỢNG VÀ CHẤT LƯỢNG TẾ BÀO TRỨNG CHỌC HÚT BẰNG SIÊU ÂM

Số lượng, chất lượng, nguồn gốc tế bào trứng đóng một vai trò hết sức quan trọng trong việcphát triển các công nghệ sinh sản như sản xuất phôi in-vitro, vi tiêm, cloning, chuyển gen,thành lập ngân hàng tế bào trứng,…Trước đây tế bào trứng để phục vụ nghiên cứu và sản suấtphôi bò ở nước ta được lấy từ lò mổ nên chất lượng di truyền của phôi rất thấp, khả năng triểnkhai vào sản xuất rất hạn chế do ở Việt Nam bò được giết thịt ở các lò mỏ chủ yếu là bò vàng,bò lai sind có...
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Báo cáo khoa học : ẢNH HƯỞNG CỦA TUỔI BÒ ĐẾN SỐ LƯỢNG VÀ CHẤT LƯỢNG TẾ BÀO TRỨNG CHỌC HÚT BẰNG SIÊU ÂM VIỆN CHĂN NUÔI - Tạp chí Khoa học Công nghệ Chăn nuôi - Số 21-Tháng 12-2009 ẢNH HƯỞNG CỦA TUỔI BÒ ĐẾN SỐ LƯỢNG VÀ CHẤT LƯỢNG TẾ BÀO TRỨNG CHỌC HÚT BẰNG SIÊU ÂM Phan Lê Sơn1, Nguyễn Thị Thoa2, Lưu Công Khánh1, Chu Thị Yến1, Nguyễn Thị Hương1, Phạm Khánh Vân2 và Lưu Thị Ngọc Anh2 1 Bộ môn Sinh lý Sinh hóa và Tập tính vật nuôi 2 Phòng thí nghiệm trong điểm Tế bào động vật *Tác giả liên hệ: Phan Lê Sơn - Bộ môn Sinh lý Sinh hóa và Tập tính vật nuôi Viện Chăn nuôi - Thụy Phương - Từ Liêm - Hà Nội Tel: (04) 38.385.940 /0914551149 ; Email: sonphanle@yahoo.com ABSTRACT Effect of cow ages on oocyte quantity and quality Phan Le Son*, Nguyen Thi Thoa, Luu Cong Khanh, Chu Thi Yen, Nguyen Thi Huong, Pham Khanh Van and Lưu Thi Ngoc AnhThe aim of this study was examin the possible effect of age of doner cows on oocytes quantity and quality. Twogroups of Holstein Friese cows of 3 and six years were used . For this study ovum pick up was conducted twice aweeks .It was found that number of follicles with diameter of 2 to ≥ 9 mm obtained from 3 year old cows washigher than that from 6 year old cows (10.35 vs 9.63) p PHAN LÊ SƠN – Ảnh hưởng của tuổi bò ...Nội dung nghiên cứuXác định ảnh hưởng của tuổi bò lên số lượng nang trứng.Xác định ảnh hưởng của tuổi bò lên số lượng tế bào trứng thu được.Xác định ảnh hưởng của tuổi bò lên chất lượng tế b ào trứng thu đ ượcPhương pháp nghiên cứuChuẩn bị bò: Sau khi lắp đặt xong hệ thống máy siêu âm và nhiệt độ của môi trường hút tếb ào trứng (trong bình ổn nhiệt) đ ược làm ấm lên 37oC. Bò cho tế bào trứng được cố định, gâytê cục bộ bằng cách tiêm 4 - 6 ml lidocain 2% vào khấu đuôi, lấy hết phân, rửa sạch và sátkhu ẩn khu âm đạo và khu vực xung quanh bằng cồn 70o.Xác định số lượng và kích thước nang trứngCho đ ầu giò siêu âm vào trực tràng, cố định buồng trứng, đưa buồng trứng về phía mặt quétcủa đầu giò siêu âm. Nhẹ nhàng xoay, đếm và đo kích thước nang trứng có mặt trên buồngtrứng qua màn hình của máy siêu âm. Quá trình đo, đ ếm cần thực hiện tỉ mỉ, chính xác và ghichép cẩn thận.Hút tế bào trứngSiêu âm hút tế bào trứng đ ược thực hiện sử dụng kim 18 G d ài 55 cm, áp suất 120 mmHg vàtần suất 2 lần/tuần. Môi trường hút tế b ào trứng (mDPBS của Sigma) có bổ sung 2% heparinvà 5% huyết thanh b ê và kháng sinh (100.000iu penicilin/ml + 100 l streptomycin/ml) duy trìở nhiệt độ 37oC bằng máy ổn nhiệt.Nhẹ nhàng cho đ ầu dò siêu âm có gắn hệ thống dẫn kim vào âm đạo, cho tay qua trực tràng cốđ ịnh buồng trứng, đ ưa các nang trứng về vị trí mũi kim, quan sát các nang trứng trên màn hìnhmáy siêu âm và chọc hút dịch nang trứng.Trong quá trình hút hệ thống kim và ống dẫn luôn luôn chứa đ ầy môi trường hút tế b ào trứng.Sau khi chọc hút 2 - 4 nang trứng, rút kim ra, hút dung dịch thu tế bào trứng để tế bào trứngchảy vào ố ng falcon (giữ ấm trong bình ổ n nhiêt 37oC), tiến hành hút lặp lại đến khi khôngcòn nhìn thấy nang trứng nào trên buồng trứng thì chuyển qua buồng trứng đối diện.Lọc, soi tìm tế bào trứngSau khi hút xong một buồng trứng, đưa ngay về phòng thí nghiệm, lọc bằng cốc lọc Emcon cóđ ường kính lỗ lọc 20 m, khoảng 10ml dung dịch còn lại được chuyển vào đ ĩa petri vô trùngcó đường kính 90mm để soi tìm, đ ánh giá, phân lo ại tế bào trứng dưới kính hiển vi soi nổi.Đánh giá chất lượng tế bào trứngTế bào trứng thu đ ược được đánh giá phân loại theo phương pháp của Goodhand và cs.(1999). Dựa vào hình dạng, sự đồng nhất của tế b ào chất và đ ặc biệt là màng cumulus.Loại A có ≥ 4 lớp màng cumulus, phân bố rõ ràng, liên kết chặt chẽ và tế bào chất đồng nhất.Loại B có ≥ 1 lớp màng tế b ào cumulus, liên kết chặt chẽ và tế bào chất đồng nhất.Loại C một số phần vỏ ngo ài tế bào trứng bị lột trần, tế bào chất co lại không đều.Loại D tế b ào trứng hoàn toàn bị lột trần và tế bào chất co lại không đều.Xử lý số liệuSố liệu đ ược xử lý theo phương pháp thống kê sinh học có sử dụng phần mềm Excel . 49 VIỆN CHĂN NUÔI - Tạp chí Khoa học Công nghệ Chăn nuôi - Số 21-Tháng 12-2009 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬNẢnh hưởng của tuổi bò lên số lượng nang trứngNang trứng có mặt trên buồng trứng114 lượt buồng trứng được siêu âm ở 2 nhóm bò thí nghiệm với 1137 nang tr ...