Phát hiện đột biến gen cKIT trên bệnh nhân bạch cầu cấp dòng tủy có chuyển vị t(8;21)(q22;q22)

Nội dung của bài viết trình bày về ứng dụng kỹthuật giải trình tựDNA khảo sátđột biến gen cKIT trên bệnh nhân (BN) bạch cầu cấp dòng tủy có chuyển vịt(8;21)(q22;q22). Kết quả nghiên cứu cho thấy, xây dựng thành công quy trình khảo sátđột biến gen cKIT tại Bệnh viện Truyền máu Huyết học, giúp việc phân nhóm tiên lượng tốt hơn trên nhóm bệnh nhân bạch cầu cấp dòng tủy có t(8;21).
Nội dung trích xuất từ tài liệu:
Phát hiện đột biến gen cKIT trên bệnh nhân bạch cầu cấp dòng tủy có chuyển vị t(8;21)(q22;q22)YHọcTP.HồChíMinh*Tập18*PhụbảncủaSố1*2014NghiêncứuYhọcPHÁTHIỆNĐỘTBIẾNGENcKITTRÊNBỆNHNHÂNBẠCHCẦUCẤPDÒNGTỦYCÓCHUYỂNVỊt(8;21)(q22;q22)PhanThịXinh*,**,HoàngAnhVũ*TÓMTẮTĐặtvấnđề:ỨngdụngkỹthuậtgiảitrìnhtựDNAkhảosátđộtbiếngencKITtrênbệnhnhân(BN)bạchcầucấpdòngtủy(BCCDT)cóchuyểnvịt(8;21)(q22;q22).Đốitượngvàphươngpháp:Mẫutủyxươngcủa15BNBCCDTcót(8;21)và/hoặccóbiểuhiệnAML1‐ETOđượckhảosátđộtbiếngencKITtừexon8đếnexon17tạiBệnhviệnTruyềnmáuHuyếthọctừ05/2012đến05/2013.Kếtquả:Trongnghiêncứunày,chúngtôikhuếchđạiđượcsảnphẩmPCRdài1751bptừexon7đếnexon21chophéppháthiệnhầuhếtcáckiểuđộtbiếntrongvùngtừexon8đếnexon17củacKIT.Phântíchkếtquảcủa15BNpháthiện5BN(33,3%)cóđộtbiến,trongđóBN6mangcùnglúc2kiểuđộtbiếnchothấycótiênlượngxấudokhôngđápứngvớiđiềutrịhóatrịliệuvàdịghéptủy.CáckiểuđộtbiếntrongnghiêncứugồmD816V,D816Y,N822KvàN822Y,làcácđộtbiếnthườnggặpđãđượcbáocáo.Kếtluận:XâydựngthànhcôngquytrìnhkhảosátđộtbiếngencKITtạiBệnhviệnTruyềnmáuHuyếthọc,giúpviệcphânnhómtiênlượngtốthơntrênnhómBNBCCDTcót(8;21).Từkhóa:Bạchcầucấpdòngtủy,t(8;21)(q22;q22),độtbiếncKIT.ABSTRACTDETECTIONOFcKITMUTATIONSINACUTEMYELOIDLEUKEMIAPATIENTWITHt(8;21)(q22;q22)TRANSLOCATIONPhanThiXinh,HoangAnhVu*YHocTP.HoChiMinh*Vol.18‐SupplementofNo1‐2014:277‐231Background:DetectionofcKITmutationsinacutemyeloidleukemia(AML)patientwitht(8;21)(q22;q22)translocationusingdirectDNAsequencingtechnique.Methods:Bonemarrowsamplesof15AMLpatientswitht(8;21)and/orAML1‐ETOexpressionwereusedfordetectionofcKITmutationsfromexons8toexon17atBloodTransfusionandHematologyHospitalfromMay2012toMay2013.Result:Inthisstudy,wewereabletoamplifyPCRproductof1751bp,expandingfromexon7toexon21ofcKIT, which harbored almost all mutations within exon 8 to exon 17. Analyzing the DNA sequences of 15patients,wedetected5patients(33.3%)carryingcKITmutations.Among5patientspositiveforcKITmutation,Patient 6 had 2 kinds of mutation and poor prognosis without response to chemotherapy and allogeneic bonemarrowtransplantation.Mutations in this study are previously reported, including D816V, D816Y, N822K,andN822Y.Conclusion:WesuccessfullydevelopedaprocedurefordetectingcKITmutationatBloodTransfusionandHematologyHospital,whichmayhelptodivideAMLpatientswitht(8;21)todifferentprognosticgroups.Keywords:acutemyeloidleukemia,t(8;21),cKITmutation.*ĐạihọcYDượcTP.HCMTácgiảliênlạc:TS.BS.PhanThịXinhHuyếtHọc**BệnhviệnTruyềnmáuHuyếthọcTP.HCM.ĐT:0932728115Email:227NghiêncứuYhọcYHọcTP.HồChíMinh*Tập18*PhụbảncủaSố1*2014ĐẶTVẤNĐỀĐỐITƯỢNG‐PHƯƠNGPHÁPNGHIÊNCỨUBạch cầu cấp dòng tủy (BCCDT) là bệnh lýác tính về máu đặc trưng bởi sự tăng sinh quámứctếbàonontrongtủyxươngvàtrong máugâygiảm3dòngtếbàomáubìnhthường.Dựavào bất thường nhiễm sắc thể (NST) và gen,BCCDTđượcchiathành3nhómtiênlượngtốt,trung bình và xấu. Nhóm tiên lượng tốt gồmnhữngbệnhnhân(BN)cómangchuyểnvịNSTt(8;21)(q22;q22),t(15;17)(q22;q12‐21)vàinv(16)(p13q22)/t(16;16)(p13;q22), trong đónhómt(15;17)cóbệnhcảnhlâmsàngđặcbiệtlàBCCDTthểM3cótiênlượngrấttốtvớiđiềutrịphốihợphóatrịliệuchuẩnvàATRA,cònnhómt(8;21) và inv(16)/t(16;16) thì đáp ứng với phácđồđiềutrịhóatrịliệucytarabine‐anthracyclinekhôngđồngnhất(5,10).Mộtsốnghiêncứutrênthếgiới cho thấy khoảng 46% BN với t(8;21) vàinv(16)/t(16;16) có thêm đột biến ở exon 8 vàexon 17 của gen cKIT sẽ tái phát sớm sau luibệnhhoàntoàn(1,6,7).Vìthế,hướngdẫncủaMạngLưới Ung Thư Quốc Gia của Hoa Kỳ đề nghịkhảosátđộtbiếncKITthườngquytrongnhómBN có chuyển vị NST t(8;21) và inv(16)/t(16;16)vànhữngBNnàynếucókèmđộtbiếncKITthìđượcxếpvàonhómtiênlượngtrungbình.ĐốitượngCó nhiều kiểu đột biến cKIT được tìm thấytrongBCCDTvớit(8;21)nhưđộtbiếnthêmhoặcmất đoạn tại exon 8 dẫn tới mất amino acidaspartic tại codon 419, đột biến cKIT‐ITD tạiexon11,12hoặcđộtbiếnđiểmlàmthayđổicấutrúc trong vùng tyrosine kinase (exon 17). Độtbiến trên exon 17 phổ biến nhất là D816V và ítphổbiếnhơnlàD816Y,D816H,D816FvàD816Ihoặc đột biến điểm tại một số codon khác như821,822và823(8).Tại Bệnh viện Truyền máu Huyết học ...